扇贝加工废弃物蛋白酶解及其酶解产物分子量分布的研究

对用复合酶酶解扇贝加工废弃物制备水解蛋白的工艺进行了研究,通过正交试验方法确定了用两种复合酶酶解的最适水解条件。结果表明,用枯草杆菌中性蛋白酶和风味酶复合酶酶解的最佳酶解参数为:加酶量比为2∶1,温度为65℃,pH为7.0,时间为5 h,水解液氨基酸态氮含量为50.3%,蛋白质水解度为95.5%。用木瓜蛋白酶和风味酶复合酶酶解的最佳酶解参数为:加酶量比为2∶1,温度为65℃,pH为7.0,时间为5 h,水解液氨基酸态氮含量为43.2%,蛋白质水解度为85.0%。用SephadexG-15葡聚糖凝胶柱层析法对水解产物的分析结果表明,两种混合酶的酶解产物为蛋白肽和游离氨基酸,其相对分子质量均集中分布在585和150左右。     

豇豆籽肽的制备及抗氧化活性研究

[目的]采用酶法制备豇豆籽蛋白肽,并探讨其抗氧化活性。[方法]先用碱提酸沉法制备豇豆籽蛋白,然后分别用碱性蛋白酶和木瓜蛋白酶水解制备豇豆籽肽,后者脱盐后进行DPPH自由基、羟基自由基和超氧阴离子清除活性分析。[结果]碱性蛋白酶水解能力强于木瓜蛋白酶,2种酶水解后的豇豆籽肽对3种自由基均具有较好的清除活性。在相应浓度范围内,对DPPH自由基最大清除率分别为63.92%(碱性蛋白酶)和63.06%(木瓜蛋白酶),半数抑制浓度IC50分别为3.20和3.28 mg/ml;对羟基自由基最大清除率分别为87.66%(碱性蛋白酶)和85.88%(木瓜蛋白酶),相应IC50分别为4.21和4.89 mg/ml;对超氧阴离子自由基的最大清除率64.06%(碱性蛋白酶)和47.92%(木瓜蛋白酶)。[结论]研究可为豇豆籽蛋白肽的深度开发和综合利用提供一定的理论基础。     

多酶法水解河蚬蛋白的工艺研究

以河蚬为原料,水解度和苫味评价为指标,通过单因素和正交试验筛选酶法水解河蚬蛋白的最佳工艺条件.结果表明:河蚬蛋白的较优水解酶为木瓜蛋白酶、中性蛋白酶和胰蛋白酶;多酶水解的最佳工艺条件为:木瓜蛋白酶、中性蛋白酶和胰蛋白酶按1:2:1 (W/W/W)合同时水解,酶用量0.7%(W/W)、料液比1:2(W/V)、55℃、pH6.5、水解6 h,水解度达5.92%,苦味评分为4.制得的水解液水解度较高,溶液澄清透明,气味较好,具较少腥苦味.     

鱿鱼肝脏活性肽的制备及生物活性研究

[目的]为鱿鱼肝脏的高值化利用提供基础研究数据。[方法]以鱿鱼肝脏蛋白为原料,通过蛋白酶水解来制备生物活性肽,研究了多种蛋白酶水解鱿鱼肝脏制得水解液的抗凝血活性、抑制血管紧张素Ⅰ转换酶（ACE）活性及抗氧化活性。[结果]当鱿鱼肝脏水解液浓度为5 mg/ml时,中性蛋白酶的水解液对ACE抑制率为68.0%;APTT值为59.8 s,TT值为34.2 s,比空白对照组分别延长26.7和20.6 s,表明鱿鱼肝脏的中性蛋白酶水解液具有抗凝血活性。中性蛋白酶解液对Fe3＋的还原力为0.588,羟自由基清除能力为64.5%,说明鱿鱼肝脏中性蛋白酶水解液具有较好的抗氧化活性;而其余的木瓜蛋白酶、酸性蛋白酶、碱性蛋白酶、胰蛋白酶的鱿鱼肝脏水解液的抗凝血活性和ACE抑制活性均低于中性蛋白酶水解液的酶解液活性。[结论]鱿鱼肝脏蛋白质具有较好的综合利用价值。     

水解小麦蛋白对蛋白质风味影响研究

试验通过利用碱性蛋白酶和酸性蛋白酶对小麦蛋白进行水解,采用不同水解时间、水解温度处理,得到碱性蛋白酶最佳水解时间为4.5 h,酶解温度为50℃;然后在最适水解度下测定游离氨基酸的含量,并进行比较,通过游离氨基酸量的变化来研究蛋白质风味的变化.     

酶法水解鲢鱼蛋白质及副产物研究进展

综述了酶法水解鲢鱼蛋白质及副产物的研究进展,总结了广泛应用于鲢鱼蛋白质及副产物水解中的碱性蛋白酶、中性蛋白酶、木瓜蛋白酶、复合蛋白酶及风味酶的特性。在综述水解液去腥工艺的基础上,比较了水解过程中的复合酶水解工艺及分步式水解工艺。最后总结了水解产物的功能特性及应用进展。     

用木瓜蛋白酶水解蟹肉最佳工艺条件的选择

采用MFHX数据优化软件,经随机试验和质心计算,得出了木瓜蛋白酶水解蟹肉的最佳工艺条件为：酶底比3450U／g,固液比1：2．5,温度64．8℃,pH5,水解3h,水解率可达到89％左右,所得水解液中含有16种游离氨基酸,含量为1931．3mg／L。水解液有着浓郁的蟹香风味,与蟹的天然风味接近。     

酶法水解非洲鲫鱼蛋白的优化工艺研究

以水解度和感官评价为指标,通过单因素和正交试验筛选酶法水解非洲鲫鱼的最佳工艺.结果表明:鲫鱼蛋白的较优水解酶为木瓜蛋白酶和碱性蛋白酶,其中,木瓜蛋白酶对鲫鱼蛋白的较优水解条件是:60℃、pH6.0、料液比1∶5(w/v)、酶用量5%(w/w)、水解4.0 h;碱性蛋白酶的较优水解条件是:酶用量5%、料液比1∶3、65℃p、H 8.0、水解4.5 h;而双酶水解的优化工艺是碱性蛋白酶和木瓜蛋白酶按1∶3(w/w)混合同时水解,酶用量为5%、料液比1∶5、55℃p、H 8.0、水解4.0 h,水解度最高达30.94%,制得的水解液清亮透明,气味较好,基本没有腥味和苦味.     

微波辐射辅助木瓜蛋白酶水解大豆蛋白的研究

【目的】针对常规酶解反应所需时间较长,研究了微波辐射对蛋白酶水解蛋白质的影响,为蛋白的工业化快速酶解提供技术支持。【方法】根据木瓜蛋白酶水解大豆蛋白的最佳工艺条件,用自行设计的微波辐射蛋白酶催化反应器,在不加微波和480 W微波功率条件下（微波功率密度为4 W/g）,采用木瓜蛋白酶水解大豆蛋白,用甲醛滴定法测试水解液中氨基酸含量,比较2种条件下的水解效果,并用高效液相色谱法分析了2种条件下水解液中氨基酸的组成。【结果】不加微波条件下氨基氮含量达到0.535 5 g/L需要水解5 h,而在480 W微波辐射下水解1 h,氨基氮含量就达到了0.568 7 g/L,反应速率提高了5倍以上。高效液相色谱分析表明,于常规条件下水解5 h和480 W微波辐射辅助水解1 h,木瓜蛋白酶水解大豆蛋白的酶解液中游离氨基酸含量和总氨基酸含量基本相同。【结论】微波辐射可以加快蛋白酶水解反应,提高反应速率。     

榛子粕抗氧化肽制备条件的优化及体外模拟消化的研究

为选出最佳的水解蛋白酶,选用碱性蛋白酶、中性蛋白酶、木瓜蛋白酶3种蛋白酶水解榛子粕蛋白,研究单一蛋白酶和复合蛋白酶水解产物的水解度、DPPH自由基清除能力和氨基酸含量,对榛子粕抗氧化肽制备工艺进行优化,分析体外模拟消化前后榛子粕抗氧化肽DPPH自由基清除能力和氨基酸含量的变化。结果表明:木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶和中性蛋白酶水解产物水解度分别为2.89%,6.26%,9.50%。1N复合蛋白酶水解产物、1A复合蛋白酶水解产物、2NA复合蛋白酶水解产物和2AN复合蛋白酶水解产物水解度分别为6.31%,7.20%,6.25%,4.99%。木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶和中性蛋白酶水解产物清除DPPH自由基的IC50分别为12.0,4.60和2.53mg·mL~(-1)。1N复合蛋白酶水解产物、1A复合蛋白酶水解产物、2NA复合蛋白酶水解产物和2AN复合蛋白酶水解产物清除DPPH自由基的IC50分别为3.05,3.50,3.25和2.81mg·mL~(-1)。木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶和中性蛋白酶水解产物氨基酸总量分别为22.08,34.13和41.36g·100g-1。1N复合蛋白酶水解产物、1A复合蛋白酶水解产物、2NA复合蛋白酶水解产物和2AN复合蛋白酶水解产物的氨基酸总量分别为18.18,18.47,26.70和24.49g·100g-1。因此,选用中性蛋白酶为水解榛子粕蛋白的最佳酶源;通过响应面分析,确定制备榛子粕抗氧化肽的最佳工艺条件为:温度43.7℃、时间1.7h、加酶量17000U·g-1,中性蛋白酶水解产物水解度为11.57%、DPPH清除率80.38%、氨基酸含量46.07g·100g-1;体外模拟胃肠消化后,榛子粕抗氧化肽的清除DPPH自由基的IC50升高3.27mg·mL~(-1)、氨基酸总量降低l0.05g·100g-1。     

扇贝加工废弃物自溶技术的研究

对扇贝加工废弃物的自溶水解技术进行了研究。结果表明:用紫外线照射扇贝加工废弃物后能够激活自溶酶,当照射40 m in时,自溶水解液中游离氨基酸态氮含量最高(3.389 g/L);pH对自溶水解影响较大,pH为7.0时水解效果最佳;采用40-65℃(5℃/h)的梯度升温自溶水解4 h或60℃恒温下自溶水解3 h,其水解效果最佳;无机离子Na 、Ca2 对自溶酶具有激活作用,当Na 的浓度为0.07 mol/L、Ca2 的浓度为0.03 mol/L时,自溶水解效果最佳,而Zn2 对自溶酶的影响很小;扇贝加工废弃物在最佳条件下自溶水解3 h后(60℃恒温),其水解液中氨基酸态氮的含量为4.006 g/L。用SephadexG-15葡聚糖凝胶柱层析法对扇贝加工废弃物的自溶水解产物进行分析,结果显示,水解液中蛋白肽相对分子质量集中分布在784.25左右,说明自溶水解产物多为小分子的蛋白肽,可进一步对其开发利用,制备海鲜调味料等。     

糙米发芽过程中蛋白酶活力及含氮物质的变化

以糙米为原料,研究其发芽过程中蛋白酶活力及蛋白质含量、组成、水解度和肽含量等降解产物的变化。结果表明:糙米经48h发芽,与未发芽前相比,蛋白酶活力增加3.39倍,蛋白质水解度提高5.37倍,肽总量升高38.68%,水解度与肽含量间相关系数达0.9606;清蛋白和球蛋白含量下降74.76%,谷蛋白和醇溶蛋白含量增加95.68%,游离氨基酸含量升高2.17倍,非蛋白氮含量增加。糙米发芽72h时,蛋白酶活力增幅减小,蛋白质水解度及肽含量继续升高,而清蛋白增多,谷蛋白减少。SDS-PAGE测定结果显示,糙米发芽过程中,大分子量的蛋白质组分降解,小分子量的多肽类成分增加,游离氨基酸含量显著升高;发芽48h前蛋白质的转化与降解趋势平缓,之后其变化极显著。因此,糙米发芽48h是其含氮物质变化的重要转折点。     

海蛰蛋白质酶水解工艺优化研究

以新鲜海蛰为材料进行海蜇蛋白质酶水解试验.结果表明:木瓜蛋白酶为适宜的海蜇蛋白质水解酶,最适条件为:酶用量2.0%、料水比1:2.在60℃、pH7.0条件下水解8 h,水解液中氨基氮含量达到37.2545 mg/100mL;其次为胰蛋白酶,在酶用量3.0%、料水比1:2、55℃、pH7.5条件下水解8 h,水解液中的氨基氮含量为14.8403 mg/100mL.     

大黄鱼鱼肉蛋白水解制备抗氧化肽的工艺

以大黄鱼为原料,采用不同蛋白酶(碱性蛋白酶、中性蛋白酶、木瓜蛋白酶、胃蛋白酶、胰蛋白酶和复合蛋白酶)分别水解鱼肉,制备抗氧化肽;研究不同酶的水解效果,筛选出最佳的水解用酶;采用单因素试验,以蛋白水解度及水解液的还原力和超氧阴离子自由基(O-·2)清除力为指标,研究不同水解p H、酶添加量、水解温度、底物浓度和水解时间对水解效果的影响;在此基础上,采用Box-Behnken响应面设计法,以水解液的还原力为评价指标,对水解工艺参数进行优化.结果表明,中性蛋白酶为水解大黄鱼的最适用酶,其最佳工艺条件为:底物浓度26.55%、水解温度46℃、水解时间7.2 h、p H 7.0、酶添加量2400 U·g-1,在此条件下,水解液的还原力达到最大(0.967),此时,O-·2清除力为87.46%,蛋白水解度为36.51%.     

不同蛋白酶对灰树花蛋白的水解度及水解产物的抗氧化活性

为明确不同蛋白酶对灰树花蛋白的水解度及水解产物的抗氧化活性,采用胃蛋白酶、胰蛋白酶、胃蛋白酶+胰蛋白酶、碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶分别水解灰树花蛋白,并测定不同蛋白酶对灰树花蛋白水解产物的抗氧化活性。结果表明:5种蛋白酶对灰树花蛋白的水解度由高到低的顺序依次为碱性蛋白酶胃蛋白酶+胰蛋白酶胃蛋白酶胰蛋白酶木瓜蛋白酶,以碱性蛋白酶的水解度最高,水解度达35.48%;碱性蛋白酶、胃蛋白酶、胃蛋白酶+胰蛋白酶的水解产物抗氧化活性均随着浓度的增加而提高,相同浓度下3种蛋白酶中以碱性蛋白酶水解产物的抗氧化活性最强,当其浓度为0.5mg·mL-1和1.0mg·mL-1时,对DPPH自由基的清除率达90%以上,与对照Vc相当。     

响应曲面法研究白果蛋白的酶解工艺

[目的]确定白果蛋白的最佳酶解条件。[方法]分别采用木瓜蛋白酶,2709碱性蛋白酶,中性蛋白酶对白果蛋白进行酶解,并对酶解效果较好的碱性蛋白酶进行单因素试验,考察各因素对酶解效果的影响;采用Designexpert软件设计试验、创建模型,采用响应曲面法分析试验结果。[结果]碱性蛋白酶对白果蛋白的水解度最大（50.50%）;酶解温度为50℃时蛋白水解度最大,酶用量为3g和酶解时间为6h时蛋白水解度达到稳定点;据模型分析,各因素对酶解效果的影响依次为：pH值〉温度〉底物浓度,最佳酶解条件为：时间6h,酶用量2g,pH值9.0,温度47℃,底物浓度2.17%。[结论]最佳酶解条件下白果蛋白的水解度可达67.75%,水解液过膜后干燥可得粗多肽1.3g（占干燥白果粉的6.51%）。     

斑点叉尾鮰下脚料蛋白酶水解工艺优化

以蛋白质水解度为考察指标,从木瓜蛋白酶、复合蛋白酶、风味蛋白酶、中性蛋白酶、碱性蛋白酶中筛选水解斑点叉尾鮰下脚料的适宜蛋白酶,并通过单因素试验和正交试验优化工艺条件。结果表明：5种蛋白酶中复合蛋白酶的水解度最高;复合蛋白酶酶解斑点叉尾鮰下脚料的最佳酶解条件为温度55 ℃,时间4 h,pH 9.0,酶质量浓度2 500 U/g,料液比1∶3,在该条件下,蛋白质的水解度为53.26%。     

青鳞鱼蛋白酶解工艺及产物组分分析

以青鳞鱼鱼肉为原料,用风味蛋白酶对其进行水解处理制取水解蛋白质,通过单因素试验考察了酶解温度、加酶量、酶解时间、底物浓度、pH值等不同因素对青鳞鱼蛋白质水解物中游离氨基态氮含量和水解度的影响。在此基础上,采用Box-Behnken试验设计,优化了青鳞鱼水解蛋白质的制备工艺。结果表明:在水解温度50℃、pH值6.5、底物∶水=1.0∶1.9(质量比)、加酶量2 200 U/g、酶解时间300 min条件下,青鳞鱼蛋白质的水解度为14.82%,与理论预测值之间误差仅为0.29%,游离氨基态氮含量为1.946 mg/ml,表明采用响应面法优化得到的青鳞鱼蛋白质酶解工艺参数准确可靠。酶解产物主要由3～19肽构成,占总酶解产物的71.63%,其中2～4肽占总酶解产物的48.86%。表明青鳞鱼鱼肉经风味蛋白酶水解时主要生成聚合度为2～4的小分子寡肽,风味蛋白酶对青鳞鱼蛋白质具有较强水解作用。     

猪肉蛋白酶法水解优化工艺研究

通过单因素试验和正交试验,研究了猪肉蛋白质酶水解的优化工艺,结果表明:猪肉蛋白质的较优水解酶为木瓜蛋白酶和中性蛋白酶,其中木瓜蛋白酶水解猪肉蛋白的最适条件为:酶用量2.6%,pH 7.0,55℃,水解3.5 h;中性蛋白酶水解猪肉蛋白的最适条件为:酶用量1.8%,pH 6.5,40℃,水解4.5 h.双酶水解的最适工艺参数为:木瓜蛋白酶与中性蛋白酶按1∶2混合同时水解,总用酶量1.5%,pH 8.0,50℃,水解4.0 h,水解度可达到31.95%,且制得的水解液色泽金黄,澄清透明,无异味.     

沙蚕不同酶解产物抗氧化效果研究

海洋生物蛋白资源是海洋生物资源的重要组成部分，对其进行高值化加工利用是海洋生物技术研究的重要内容，酶解是提高海洋蛋白功能性的有效方式，但酶种类不同,其作用位点不同，可能对酶解产物的活性有一定影响。为了探究了沙蚕不同酶解产物的抗氧化性，采用6种蛋白酶（碱性蛋白酶、中性蛋白酶、胃蛋白酶、木瓜蛋白酶、风味蛋白酶、胰蛋白酶）酶解沙蚕，测定了不同酶解时间下的水解度、分子量分布、3种自由基（DPPH、O-2·、·OH）的清除率等反映抗氧化水平的指标。结果表明：胰蛋白酶小分子肽得率最高，为70.47%；胃蛋白酶次之，为68.12%。酶解液浓度为5 mg·mL-1时，胃蛋白酶和木瓜蛋白酶酶解4 h时，DPPH清除率效果较好，分别为90.87%和90.52%。胃蛋白酶酶解3 h时，O-2·清除率效果最佳，为89.78%；木瓜蛋白酶酶解3 h时，O-2·清除率效果次之，为57.99%。碱性蛋白酶酶解4 h和胃蛋白酶酶解2 h时，·OH清除率效果较好，分别为85.07%和83.37%。胰蛋白酶和胃蛋白酶对提高酶解液水解度和小肽生成作用明显，胃蛋白酶的酶解产物对3种自由基清除率较好，更适用于制备沙蚕抗氧化肽。