响应面试验设计优化鲢鱼鳞胶原蛋白抗氧化活性肽的制备条件

采用酶解法制备抗氧化活性肽,研究了鲢鱼鳞胶原蛋白抗氧化活性肽制备的优化条件。以水解度(DH)、DPPH·、超氧阴离子(O-2·)和羟基(·OH)自由基清除率为指标,比较碱性蛋白酶、中性蛋白酶和木瓜蛋白酶对鲢鱼鳞胶原蛋白的酶解效果及酶解产物的抗氧化活性。结果表明:碱性蛋白酶酶解产物的抗氧化活性最强,对DPPH·、O-2·和·OH自由基的清除率分别为76.9%、43.1%和58.2%;采用响应面试验设计优化碱性蛋白酶制备鲢鱼鳞胶原蛋白抗氧化活性肽的条件,得到最优的制备条件为底物浓度5.47%,酶解时间4.24 h,酶添加量4 200 U/g,在此条件下,所得抗氧化肽对DPPH·、O-2·和·OH的清除率分别为79.6%、46.3%和63.5%。     

榛子粕抗氧化肽制备条件的优化及体外模拟消化的研究

为选出最佳的水解蛋白酶,选用碱性蛋白酶、中性蛋白酶、木瓜蛋白酶3种蛋白酶水解榛子粕蛋白,研究单一蛋白酶和复合蛋白酶水解产物的水解度、DPPH自由基清除能力和氨基酸含量,对榛子粕抗氧化肽制备工艺进行优化,分析体外模拟消化前后榛子粕抗氧化肽DPPH自由基清除能力和氨基酸含量的变化。结果表明:木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶和中性蛋白酶水解产物水解度分别为2.89%,6.26%,9.50%。1N复合蛋白酶水解产物、1A复合蛋白酶水解产物、2NA复合蛋白酶水解产物和2AN复合蛋白酶水解产物水解度分别为6.31%,7.20%,6.25%,4.99%。木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶和中性蛋白酶水解产物清除DPPH自由基的IC50分别为12.0,4.60和2.53mg·mL~(-1)。1N复合蛋白酶水解产物、1A复合蛋白酶水解产物、2NA复合蛋白酶水解产物和2AN复合蛋白酶水解产物清除DPPH自由基的IC50分别为3.05,3.50,3.25和2.81mg·mL~(-1)。木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶和中性蛋白酶水解产物氨基酸总量分别为22.08,34.13和41.36g·100g-1。1N复合蛋白酶水解产物、1A复合蛋白酶水解产物、2NA复合蛋白酶水解产物和2AN复合蛋白酶水解产物的氨基酸总量分别为18.18,18.47,26.70和24.49g·100g-1。因此,选用中性蛋白酶为水解榛子粕蛋白的最佳酶源;通过响应面分析,确定制备榛子粕抗氧化肽的最佳工艺条件为:温度43.7℃、时间1.7h、加酶量17000U·g-1,中性蛋白酶水解产物水解度为11.57%、DPPH清除率80.38%、氨基酸含量46.07g·100g-1;体外模拟胃肠消化后,榛子粕抗氧化肽的清除DPPH自由基的IC50升高3.27mg·mL~(-1)、氨基酸总量降低l0.05g·100g-1。     

核桃蛋白中性蛋白酶水解物的制备及其抗氧化活性研究

[目的]研究制备核桃蛋白水解物的最佳工艺条件及水解物的抗氧化活性。[方法]以核桃蛋白为底物,采用正交试验研究制备其中性蛋白酶水解物的工艺条件,通过测定自由基清除能力研究酶水解物的抗氧化活性。[结果]制备核桃蛋白酶水解物的最优工艺条件为:温度40℃、底物浓度4%、酶浓度4 000 U/g、pH值8.0;核桃蛋白酶水解物的水解度与其对羟自由基(OH.)和超氧阴离子自由基(O2.)的清除能力有关,其水解度为24.2%时对羟自由基(OH.)和超氧阴离子自由基(O2.)的清除率分别为17.0%和52.0%。[结论]采用Sephdex G-25凝胶柱层析对水解度为24.2%的酶水解物进行分离,得到了A、B、C和D 4种肽混合物,其中,肽混合物C的自由基清除能力最大,肽混合物D最小。     

不同蛋白酶水解鹿鞭制备活性肽的比较研究

[目的]研究制备鹿鞭活性肽的最佳蛋白酶。[方法]选用碱性蛋白酶、中性蛋白酶、复合蛋白酶和胰蛋白酶分别在最适条件下水解鹿鞭,以水解物鹿鞭活性肽的水解度(DH)及其对还原能力、抑制硫代巴比妥酸(TBARS)的作用和清除DPPH自由基作用的影响为指标,优选出最佳水解蛋白酶。[结果]碱性蛋白酶水解鹿鞭产物鹿鞭活性肽的水解度、还原能力、对卵磷脂脂质氧化的抑制作用和DPPH自由基的清除率都为最高。[结论]碱性蛋白酶水解鹿鞭产物鹿鞭活性肽具有很好的抗氧化性。     

藏鸡蛋卵白蛋白酶解制备抗氧化肽及其体外抗氧化活性

采用碱性蛋白酶水解藏鸡蛋卵白蛋白,制备抗氧化活性肽,以水解度和超氧阴离子自由基(O_2~-·)清除率为指标,通过单因素试验和正交试验确定最佳酶解参数,并对酶解多肽的体外抗氧化活性进行测定。结果表明:碱性蛋白酶酶解的最适条件为底物质量分数2%、酶解时间5 h、酶添加量7 000 U/g;在最适条件下,碱性蛋白酶酶解所得抗氧化肽的O_2~-·、DPPH自由基、羟基自由基(·OH)清除率分别为71.75%、56.47%、84.46%;还原力、抗脂质过氧化能力分别为0.87、82.83%。     

木瓜蛋白酶水解核桃蛋白的工艺条件优化及水解物抗氧化活性研究

[目的]研究采用木瓜蛋白酶水解核桃蛋白的工艺条件及水解物的抗氧化活性。[方法]采用正交试验法确定木瓜蛋白酶水解核桃蛋白的最适工艺条件,采用Sephadex G-25凝胶色谱分离酶水解物,通过测定羟自由基（OH·）和超氧阴离子自由基清除能力研究了酶水解物的抗氧化活性。[结果]核桃蛋白木瓜蛋白酶水解的最优奈件是温度55℃,底物浓度4％,酶浓度60000U／g,pH值8．0;在水解度达到38．4％时,其酶解产物对羟自由基（OH·）和超氧阴离子自由基（O2·）的清除率分别为22．5％和46．4％。采用Sephadex G-25凝胶柱层析对水解度38．4％的酶水解物进行分离得到了A、B、C和D4个肽片段,其中肽片段c的自由基清除能力最大。[结论]核桃蛋白木瓜蛋白酶水解物具有一定抗氧化活性。     

水解鹿血血红蛋白的抗自由基活性研究

评价了水解鹿血血红蛋白的抗自由基活性。方法是通过测定水解鹿血血红蛋白的DPPH自由基清除能力、羟基自由基和超氧阴离子自由基清除能力,以评价其抗自由基活性。得出结果,10mg/mL鹿血活性多肽对DPPH自由基、羟基自由基、超氧阴离子自由基的清除率分别为90.2%、66.1%、52.9%。结论是鹿血血红蛋白的水解产物抗自由基活性较高,具有很强的抗衰老能力。     

酶法制备大米活性肽及抗氧化性的研究

以水解液中活性多肽的得率为目标,分别采用5种蛋白酶对大米蛋白进行水解,得出最佳水解酶。水解大米蛋白然后脱盐处理,用铁氰化钾测定了大米多肽的还原能力,并考查了大米多肽对羟基自由基(.OH)、超氧阴离子(O2-.)、二苯代苦味肼酰基自由基(DPPH.)的抑制作用,并同VC做了比较。结果表明:大米蛋白制备活性肽的最佳水解工具酶为枯草杆菌碱性蛋白酶。大米多肽具有还原能力,并对这几种自由基体系具有不同的清除作用。在20.00～50.00 mg/mL时,大米多肽和VC对.OH的清除作用相当;大米多肽对O2-.的清除作用随浓度的增加而增强;在5.00 mg/mL时,大米多肽对DPPH.的清除率达到57.69%,但对O2-.和DPPH.的清除能力均低于VC。     

南极磷虾肽制备工艺优化及体外抗氧化研究

本文研究了3种不同的蛋白酶(木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶、胰蛋白酶)分别水解南极磷虾得到多肽的体外抗氧化活性,以清除超氧阴离子、羟自由基和DPPH的能力为指标。结果表明,木瓜蛋白酶水解制备的多肽抗氧化活性比较好,其次是碱性蛋白酶。用响应面法优化木瓜蛋白酶水解南极磷虾制备多肽的工艺参数,经凝胶电泳测定其分子量,显示该多肽有3个明显条带,其分子量大多位于3~7 ku。将上述多肽溶液脱氟后经超滤系统分离,按分子量(molecular weight,MW)大小分为MW≥10 ku,5~10 ku,MW≤5 ku的3种多肽,并比较其抗氧化活性的强度。在本实验体系浓度范围内,3种不同分子量的多肽对超氧阴离子、羟自由基、DPPH的清除能力有所差异,随着多肽浓度的增加,其对清除能力也增大,呈明显的剂量依赖关系。     

天然黄茧丝蛋白多肽的抗氧化活性研究

以天然黄茧"金丝1号"茧丝为对象,制备蚕丝蛋白液,利用碱性蛋白酶酶解得到蚕丝蛋白多肽,测定其清除DPPH、羟自由基和超氧阴离子能力,探讨蚕丝蛋白多肽的抗氧化活性。结果表明,酶解3.5h时,其对DPPH和羟自由基清除率达最佳,分别为58.3%和87.3%;酶解4h时对超氧自由基清除率最大,为43.0%;酶解3.5h的天然黄茧蚕丝蛋白多肽液抗氧化性由于BHT和VC。为天然黄茧的高附加值开发利用提供了参考。     

菲律宾蛤仔木瓜蛋白酶水解物抗氧化活性研究

以菲律宾蛤仔蛋白为原料,用木瓜蛋白酶对其进行水解,采用正交实验方法研究酶解温度、酶解时间,加酶量和pH对水解度和抗氧化性的影响;通过检测羟自由基清除率、DPPH自由基清除、超氧阴离子自由基清除率和还原力评价水解物的抗氧化性。结果表明：水解度与抗氧化性之间没有正反相关系,当温度为45℃,时间为6 h,加酶量为1 500μg/g,pH为7.0时,水解度最大;温度为45℃,时间为2 h,加酶量为2 000μg/g,pH为7.0时,水解物的抗氧化活性最强;水解物对羟自由、DPPH自由基和超氧阴离子自由基均有很好的清除作用,并呈现浓度依赖性。因此,菲律宾蛤仔蛋白的木瓜蛋白酶水解物具有很好的抗氧化性。     

山黄皮果总黄酮体外清除自由基活性研究

[目的]研究山黄皮果总黄酮体外清除自由基的活性。[方法]采用Fenton(邻二氮菲)法和邻苯三酚自氧化法(325 nm)评价山黄皮果总黄酮体外清除自由基活性,以Vit C为阳性对照品。[结果]山黄皮果总黄酮清除羟自由基和超氧阴离子自由基的EC50分别为58.7和23.5μg/ml,Vit C清除羟自由基和超氧阴离子自由基的EC50分别是128.8和77.6μg/ml,表明山黄皮果总黄酮的清除能力比Vit C强。[结论]山黄皮果总黄酮具有较强的体外清除自由基能力,是一种天然有效的自由基清除剂。     

发菜多糖清除自由基活性的研究

[目的]为发菜多糖的药物和食品开发提供科学依据。[方法]采用分光光度法研究发菜多糖对自由基的清除作用。[结果]发菜胞外多糖和荚膜多糖对DPPH自由基均具有一定的清除能力,当多糖加入量为312μg时,胞外多糖对DPPH自由基的清除率(12.8%)高于荚膜多糖(11.2%)。发菜胞外多糖对羟自由基的清除效果较明显,在试验浓度范围内荚膜多糖对羟自由基的最大清除率为37.7%。发菜胞外多糖和荚膜多糖对超氧自由基的清除效果均较明显,当多糖浓度为125μg/ml时,胞外多糖对超氧自由基的清除率(42.6%)略高于荚膜多糖(41.5%)。[结论]发菜胞外多糖与荚膜多糖对DPPH自由基、羟自由基和超氧阴离子自由基都有清除能力,且在一定浓度范围内,其清除效果与多糖浓度呈正相关。胞外多糖的作用效果强于荚膜多糖。     

海芦笋黄酮类化合物抗氧化活性研究

[目的]为海芦笋的进一步开发利用提供一定的理论依据。[方法]以海芦笋为原料,研究其中的黄酮类化合物抑制植物油脂的自氧化和清除DPPH自由基、羟自由基、氧自由基的效果,评价海芦笋黄酮类化合物的体外抗氧化活性。[结果]海芦笋黄酮类化合物具有较强的抑制植物油自氧化、清除DPPH自由基、Fenton反应中产生的羟自由基、邻苯三酚氧化产生的氧自由基的作用,且抑制作用与海芦笋黄酮类化合物的浓度呈正相关。[结论]海芦笋黄酮类化合物可以作为天然的食品抗氧化剂进行开发。     

乌贼内脏酶解多肽的制备和抗氧化活性研究

[目的]探讨乌贼内脏酶解多肽的制备和抗氧化活性。[方法]以乌贼内脏为原料,用胰蛋白酶对其进行水解,采用单因素和正交试验方法研究酶解温度、酶解时间、加酶量和pH对水解度和抗氧化性的影响;通过检测羟自由基清除率、DPPH清除率和还原力评价不同分子量水解物多肽的抗氧化性。[结果]当酶解温度为35℃,时间为5 h,加酶量为5 000 U/g,pH为7.5时,水解度最大;当酶解温度为40℃、时间为7 h、加酶量为4 500 U/g,pH为8.0时,水解物对羟自由基清除率最大。超滤后不同分子量多肽对羟自由基的清除率为3～5 kD3 kD以下5～10 kD;DPPH清除率:3～5 kD3 kD以下5～10 kD;还原力:3 kD以下3～5 kD5～10 kD。[结论]乌贼内脏酶解多肽具有较好的抗氧化活性,不同分子量多肽的活性不同。     

猕猴桃根提取物体外抗氧化活性研究

[目的]探讨猕猴桃根提取物的体外抗氧化作用。[方法]采用DPPH自由基、超氧阴离子、羟基自由基、过氧化氢和还原力反应体系,测定猕猴桃根提取物的体外抗氧化作用,并用维生素C进行对照试验。[结果]试验条件下,ERHM对DPPH自由基、超氧阴离子（O2-.）、羟基自由基（.OH）、过氧化氢（H2O2）等均有较强的清除或抑制作用,且显示较好的量效关系,同时具有一定的还原力。其消除DPPH自由基的EC50为8.03μg/ml,清除超氧阴离子（O 2-.）的EC50为1.28 mg/ml,抑制羟基自由基（.OH）能力可达69.4%,浓度为100μg/ml时,对过氧化氢（H2O2）的清除率为42%。[结论]猕猴桃根提取物具有较强的还原力,能有效清除DPPH和超氧阴离子自由基,并抑制羟基自由基的产生。所以,ERHM有效成分具有较为显著的抗氧化作用。     

7种不同来源灵芝热水提物体外抗氧化活性研究

[目的]比较不同地区灵芝热水提物的体外抗氧化活性。[方法]分别从总还原力、清除羟基自由基(·OH)、超氧阴离子自由基(O_2~-·)和DPPH自由基4个方面对7种灵芝子实体热水提物的体外抗氧化活性进行了初步研究。[结果]在相同浓度下,猫儿山野生灵芝热水提物的总还原力最强,吸光度高达2.48;·OH清除能力最高,清除率99.46%;清除DPPH自由基能力最强,清除率为96.62%;清除O_2~-·能力排第三。[结论]猫儿山野生灵芝热水提取物在总还原力、清除·OH、DPPH自由基3个方面的抗氧化能力表现出最强,说明猫儿山野生灵芝具有非常好的开发潜力。     

龙葵果提取物抗氧化活性测定及酚类活性成分分析

[目的]比较不同龙葵果提取物的抗氧化活性,同时测定其活性成分.[方法]用浓度60％乙醇浸提龙葵果,获得粗提物,减压蒸馏后分别用正丁醇、乙酸乙酯、氯仿3种溶剂萃取,采用DPPH·、·OH,O2-·清除法对各提取物的抗氧化作用进行评价,并与浓度60％乙醇粗提物溶液进行比较;分别测定4种龙葵果提取物中酚酸、黄酮、原花青素和花色苷的含量.[结果]浓度60％乙醇粗提物对DPPH·和·OH的清除效果最好,清除率分别为（68.45％±2.68％）和（49.12％±2.26％）;乙酸乙酯萃取物对O2-·的清除率最大为（79.64％±5.16％）.浓度60％乙醇粗提物中花色苷浓度为3.65 mg/ml,而乙酸乙酯萃取物中含有高浓度黄酮,浓度为3.42 mg/ml.[结论]龙葵果提取物中起主要抗氧化作用的是花色苷和黄酮.