一种适合枣和酸枣基因组 DNA 的提取方法

研究比较了CTAB法和SDS法在枣和酸枣基因组DNA提取中的效果 ,并分析了取样时间、部位、样品状况、抗氧化剂和不同纯化处理等对所提DNA质和量及其RAPD扩增效果的影响。结果表明 :用改良后的CTAB法优于SDS法 ,可有效地去除多糖 ,所提DNA的质和量均能满足PCR扩增要求。取样时间与部位对所提基因组DNA的质量无影响 ,但与产量有关 ,以旺盛生长期的幼叶或嫩梢尖为佳。样品采后液氮处理 - 70℃低温保存 ,与新鲜材料所提DNA差异不大。抗氧化剂可有效地阻止多酚类物质氧化变褐 ,1%的 β 巯基乙醇即可满足要求。用于RAPD分析的模板DNA中含有RNA和少量蛋白质对扩增结果无影响     

提取植物和微生物DNA的SDS-CTAB改进法

该文介绍了一种简便快速地提取植物和微生物细胞总ＤＮＡ的方法，该法是对提取真菌ＤＮＡ的ＳＤＳ ＣＴＡＢ法进行改进而成，经过修改后的ＳＤＳ ＣＴＡＢ法可在数小时内高效地提取细胞总ＤＮＡ．制备物经琼脂糖凝胶电泳检测到大于２０ｋｂ的ＤＮＡ主带，基本无ＤＮＡ碎带；不用ＲＮａｓｅ处理，就已经无ＲＮＡ的干扰．ＯＤ２６０／２８０值显示产物纯度较高，无需任何纯化处理即可以用于ＰＣＲ扩增和ＲＡＰＤ分析     

提取植物和微生物DNA的SDS—CTAB改进法

该文介绍了一种简便快速地提取植物和微生物细胞总ＤＮＡ的方法，该法是对提取真菌ＤＮＡ的ＳＤＳ－ＣＴＡＢ法进行改进而成，经过修改后的ＳＤＳ－ＣＴＡＢ法可在数小时内高效地提取细胞总ＤＮＡ。制备物经琼脂糖凝胶电泳检测到大于２０ｋｂ的ＤＮＡ主带，基本无ＤＮＡ碎带；不用ＲＮａｓｅ处理，就已经无ＲＮＡ的干扰。ＯＤ２６０／２８０值显示产物纯度较高，无需任何纯化处理即可以用于ＰＣＲ扩增和ＲＡＰＤ分析。     

几种茄属植物基因组DNA提取与RAPD分析

研究了适于茄子及其近缘野生种基因组ＤＮＡ的提取方法，并对ＤＮＡ初步进行了ＲＡＰＤ分析。结果表明：ＳＤＳ－氯仿－异戊醇法不适于茄属植物ＤＮＡ提纯，而改进的ＣＴＡＢ－酚－氯仿－异戊醇对其成株叶／芽即可获得较高产率及纯度的ＤＮＡ；ＰＣＲ反应扩增出不同片段，引物ＯＰＧ—１１扩增片段在栽培品种与野茄中无差异，而在红茄与龙葵中呈现出一定的多态性。     

DNA提纯方法对6种甘蔗亚族植物RAPD的影响

甘蔗植物组织内的多酚类、色素类等物质是干扰ＲＡＰＤ扩增反应的主要成分。本研究以ＣＡＴＢ法和ＳＤＳ法为基础,着重对抗氧化剂（ＰＶＰ等）、酶（蛋白酶Ｋ、ＲＮａｓｅＡ）和酚抽提等因素对提取ＤＮＡ的质量及其ＲＡＰＤ的影响进行了比较筛选。结果表明：①甘蔗ＤＮＡ提取质量和纯度与ＲＮａｓｅＡ、抗氧化剂等处理直接相关,蛋白酶Ｋ、ＣＡＴＢ和ＳＤＳ的处理无明显差异;②对于甘蔗ＲＡＰＤ反应,模板ＤＮＡ中含有一定量的ＲＮ     

柿树带化和刺槐丛枝的PCR检测

根据植物菌原体１６ＳｒＲＮＡ基因序列,合成一对寡核苷酸引物,用ＳＤＳ ＣＴＡＢ改进法直接提取田间发病的柿树带化病、刺槐丛枝病树和健康树皮层的ＤＮＡ,用ＰＣＲ方法成功地从病树ＤＮＡ模板中扩增出约１．１７ｋｂ的特异产物,经酶切进一步证实为植物菌原体１６ＳｒＤＮＡ．此项研究表明用特异合成的引物Ｆ１６／Ｒ１６,经ＰＣＲ扩增可以快速灵敏地检测植物菌原体．     

应用RT-PCR和RFLP分析肾型鸡传染性支气管炎病毒基因型

对来自浙江省３个不同地区的肾型鸡传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ－ＪＤ,ＤＱ,ＨＹ）和参考株Ｈ１２０,通过蛋白酶Ｋ－ＳＤＳ处理、酚－氯仿法抽提基因组ＲＮＡ,经ＲＴ－ＰＣＲ扩增得到了预期为１．７２ｋｂ的Ｓ１蛋白基因ｃＤＮＡ,用限制性内切酶ＨａｅⅢ,ＰｓｔＩ,Ｋｓｐ６３２１对Ｓ１基因ｃＤＮＡ进行ＲＦＬＰ分析。结果表明ＪＤ,ＤＱ,ＨＹ毒株的ＲＦＬＰ带型相同,但与经典的肾型ＩＢＶ代表株（即Ｔ株、Ｇｒａｙ株、Ｈｏ     

玉米大斑病菌的RAPD分析Ⅰ.应用CTAB法提取玉米大斑病菌DNA

用采自河北、辽宁、黑龙江、山东、吉林等５省的１４个玉米大斑病菌菌株为试材进行液体培养，然后采用ＣＴＡＢ法从菌丝中提取ＤＮＡ，通过７５２型紫外光栅分光光度计检测，最后将所提取的ＤＮＡ在热循仪ＰＥ－４８００上进行随机引物多态性扩增。结果发现，所提取的ＤＮＡ的ＯＤ２６０／ＯＤ２８０比值介于１．７３０－１．８４７之间，扩增产物经琼脂糖凝胶电泳后得到了较清晰的扩增图谱，从而证明了采用的ＣＴＡ法是提取玉米大斑病菌ＤＮＡ并用于分子生物学研究的一种行之有效的玉米。     

褐飞虱不同生物型基因组DNA的RAPD分析

试验了两种ＤＮＡ提取方法抽提褐飞虱基因组ＤＮＡ的效果及其用所获得的ＤＮＡ进行ＲＡＰＤ扩增的技术条件,结果发现,采用蚜虫ＤＮＡ的提取方法（略有改进）来抽提高飞虱基因组ＤＮＡ,并用Ｓ系列的随机引物、ＲＡＰＤ的通用反应体系及９４℃变性,３６℃退火和７２℃延伸的扩增条件来对其进行随机扩增,可获得满意的效果,不同致害类群的群体间和同一致富类群的个体间的ＲＡＰＤ多态性均有差异,单雌纯化只能将个体间的差异缩小,     

孟加拉粉大蕉抗寒、抗病性初步研究

孟加拉粉大蕉抗寒、抗病性初步研究林静芸（仲恺农业技术学院园艺系广州５１０２２５）ＰＲＥＬＩＭＩＮＡＲＹＲＥＳＥＡＲＣＨＯＮＣＯＬＤ－ＢＡＲＤＹ，ＤＩＳＥＡＳＥＲＥＳＩＳＴＡＮＴＣＨＡＲＡＣＴＥＲＯＦＢＥＮＧＡＬＥＳＥＰＬＡＮＴＡＩＮＬｉｎＪｉｎｇｙｕ...     

褐飞虱种群的DNA的提取及RAPD分析

以福建省５个不我的褐飞虱种群为虫源,通过对褐飞虱基因组ＤＮＡ提取和ＲＡＰＤ分析方法的摸索,结果表明,用ＣＴＡＢ方法提取的５个种群的基因组ＤＮＡ,无降解情况,ＲＮＡ去除较为干净,可用于褐飞虱的ＤＮＡ提取;随机引物筛选结果为,所用的４５个随机引物中５个引物扩增结果完全相同,７个引物出现多态性,扩散带数为４９条具多态笥,占４２．８５％。利用Ｎｅｉ氏相似系数,对５个种群的ＲＡＰＤ－ＰＣＲ结果进行分析,结果     

叶面喷施麦根酸铁对矫正果树缺铁黄叶病效果的初探

本文在苹果和桃树上,以ＣＫ、ＦｅＥＤＴＡ、ＢＡＳＦ多元微肥和柠檬酸复合铁（ＦＣＵ）为对比,探讨了叶面喷施麦根酸铁（ＦｅＰＳ）对矫正苹果和桃树缺铁黄叶病的效果。研究表明,桃树和苹果叶绿素含量在叶面喷施时间达２～３个月以前ＦｅＰＳ处理小于ＦＣＵ和ＦｅＥＤＴＡ处理,在施用时间２～３个月以后ＦｅＰＳ处理大于ＦＣＣＵ和ＦｅＥＤＴＡ处理。叶面喷铁桃树叶片全铁含量在施用时间达２个月以前以ＦｅＥＤＴＡ最高,在施用时间达２个月以后以ＦｅＰＳ最高;而在苹果上喷施ＦｅＰＳ叶片全铁含量仅大于ＢＡＳＦ喷施,小于ＦＣＵ和ＦｅＥＤＴＡ处理。叶面喷施ＦｅＰＳ,桃树和苹果叶片活性铁含量变化与全铁变化相同,桃树上在施用时间达２个月以前以ＦｅＥＤＴＡ最大,在施用时间达２个月以后ＦｅＰＳ最大;在苹果上则喷施ＦｅＰＳ叶片活性铁仅大于ＢＡＳＦ处理,低于ＦＣ     

一种简单快速分离鉴定少量质粒DNA方法

建立了一种以一定ＥＤＴＡ深度的ＮａＯＨＯ－ＳＤＳ溶液和ＢａＡＣ２溶液快速分离鉴定质粒ＤＮＡ的方法。该法是将菌落直接挑在ＮａＯＨ－ＳＤＳ溶液中，待细菌细胞壁破裂、质粒ＤＮＡＩ了出来后，按比例加入ＢａＡＣ２溶液、离心取上清液电泳、紫外灯下分析鉴定。与其他快速分离鉴定质粒ＤＮＡ的方法相比较，本法具有简单、可靠、省时、无染色体ＤＮＡ及ＲＮＡ污染、灵敏度高（可检出１ｍｍ左右直径的单个菌落听质粒ＤＮＡ）等优点     

抗病棉自变世代群体抗病性观察简报

抗病棉自变世代群体抗病性观察简报汪勤生，张青，钱立军（江苏海安县种子公司，海安２２６６００；海安县墩头镇种子站；海安棉花原种场）ＡＢＲＩＥＦＲＥＰＯＲＴＡＢＯＵＴＴＨＥＤＩＳＥＡＳＥＲＥＳＩＳＴＡＮＣＥＥＸＰＲＥＳＳＥＤＯＮＳＥＬＦＥＤＧＥＮＥＲＡＴ...     

马立克氏病病毒Ⅰ型疫苗毒克隆株pp38基因同源物的扩增和克隆

用ＰＣＲ技术,从马立克氏病病毒（ＭＤＶ）ＣＶ１９８８／Ｃ株感染的鸡胚成纤维细胞（ＣＥＦ）基因组ＤＮＡ中扩增出含起始密码子的ＭＤＶｐｐ３８基因同源物编码序列,在以Ｄｉｇｏｘｉｇｅｎｉｎ标记的ｐｐ３８基因作为探针,在Ｓｏｕｌｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ中,该探针能识别该ＰＣＲ扩增片段。将该ＰＣＲ扩增片段在ＢａｍＨ Ｉ和ＰｓｔＩ位点克隆进ｐＵ１８质粒载体,酶切分析筛选到含ｐｐ３８基因同源物的重组质粒并进行了全序     

不结球白菜抗病育种研究：Ⅴ.抗TuMV遗传研究

不结球白菜抗病育种研究Ⅴ．抗ＴｕＭＶ遗传研究曹光亮，曹寿椿（南京农业大学农业与生命科学学院，南京２１００９５）ＳＴＵＤＩＥＳＯＮＢＲＥＥＤＩＮＧＦＯＲＤＩＳＥＡＳＥＲＥＳＩＳＴＡＮＣＥＩＮＮＯＮ－ＨＥＡＤＩＮＧＣＨＩＮＥＳＥＣＡＢＢＡＧＥⅤ．ＡＳＴＵ...     

玉米基因组DNA的提取

玉米鲜叶不经冻干处理直接用ＣＴＡＢ法提取ＤＮＡ，其分子量和纯度均较高，可用于限制酶切、基因文库构建及基因组分析等。     

鸡传染性支气管炎病毒地方-分离株S1基因克隆和基因型鉴定

利用ＩＢＶ全长Ｓ１基因特异性引物,以纯化的３个标准株Ｍ４１、Ｈ５２、Ｔ和６个地方分离株（ＱＤ、ＺＺ、ＧＺ、ＧＪ、ＤＬ和ＹＣ）的基因组ＲＮＡ为模板,用ＲＴ－ＰＣＲ方法扩增出预期大小约１．７３ｋｂｃＤＮＡ片段,经ＢＡＭＨＩ和ＨｉｎｄⅢ酶切插入到质粒ｐＵＣ１８中,并在大肠杆菌ＪＭ８３中实现了克隆。对６个分离株的Ｓ１基因ＰＣＲ产物进行ＨａｅⅢＲＦＬＰ分析,表明ＱＤ、ＴＪ属于Ｍ４１基因型,ＺＺ和ＧＺ与Ｔ基因     

不同年份采收的豇豆种子的RAPD研究

ＲＡＰＤ是一种建立在ＰＣＲ基础之上的新的分子标记技术，利用ＲＡＰＤ技术对不同年份采收的豇豆种子进行了研究从豇豆干种子中直接提取的基因组ＤＮＡ可以用于ＲＡＰＤ分析在２０种１０ｂｐ随机引物中筛选出Ｓ２０７和Ｓ２０８２种引物，并获得了豇豆基因组ＤＮＡ的指纹图谱筛选出的２种引物均只在１９９７年采收的豇豆种子的基因组ＤＮＡ上扩增出１条ＤＮＡ带研究结果表明，不同年份采收的豇豆种子在遗传性上相当一致，而豇豆种子的基因组ＤＮＡ在贮藏过程中会受到损伤     

RAPD技术在产气荚膜杆菌基因分型中的应用研究

采用随机扩增多态性ＤＮＡ技术对产气荚膜杆菌进行ＰＣＲ扩增。结果产气荚膜杆菌Ａ，Ｂ，Ｃ，Ｄ４个型均可扩增出约４３０ｂｐ的条带，Ｂ，Ｃ型还扩增出约２１０ｂｐ条带，Ｂ，Ｄ型还扩增出约１２１０ｂｐ条带，Ａ型还扩增出约２４０ｂｐ和６９０ｂｐ条带，各型之间的条带差别明显，从而为产气荚膜杆菌的基因分型、ＰＣＲ快速诊断提供可靠的依据。