褐飞虱种群的DNA的提取及RAPD分析

以福建省５个不我的褐飞虱种群为虫源,通过对褐飞虱基因组ＤＮＡ提取和ＲＡＰＤ分析方法的摸索,结果表明,用ＣＴＡＢ方法提取的５个种群的基因组ＤＮＡ,无降解情况,ＲＮＡ去除较为干净,可用于褐飞虱的ＤＮＡ提取;随机引物筛选结果为,所用的４５个随机引物中５个引物扩增结果完全相同,７个引物出现多态性,扩散带数为４９条具多态笥,占４２．８５％。利用Ｎｅｉ氏相似系数,对５个种群的ＲＡＰＤ－ＰＣＲ结果进行分析,结果     

用牛血清白蛋白改善荸荠基因组DNA的RAPD扩增

在荸荠基因组ＤＮＡ的ＲＡＰＤ（随机扩增多态性ＤＮＡ）扩增中，具合适浓度和片段长度的ＤＮＡ常常在适宜条件下无法扩增。这种现象常在干燥叶状茎ＤＮＡ的扩增中发生。提取的ＤＮＡ中存在一些ＲＡＰＤ（或ＰＣＲ）抑制剂可能是ＲＡＰＤ扩增失败的原因。多糖、多酚和其他...     

不同年份采收的豇豆种子的RAPD研究

ＲＡＰＤ是一种建立在ＰＣＲ基础之上的新的分子标记技术，利用ＲＡＰＤ技术对不同年份采收的豇豆种子进行了研究从豇豆干种子中直接提取的基因组ＤＮＡ可以用于ＲＡＰＤ分析在２０种１０ｂｐ随机引物中筛选出Ｓ２０７和Ｓ２０８２种引物，并获得了豇豆基因组ＤＮＡ的指纹图谱筛选出的２种引物均只在１９９７年采收的豇豆种子的基因组ＤＮＡ上扩增出１条ＤＮＡ带研究结果表明，不同年份采收的豇豆种子在遗传性上相当一致，而豇豆种子的基因组ＤＮＡ在贮藏过程中会受到损伤     

棉药黄萎病菌致病类型及其分子指纹分析

对２０个大丽轮枝菌菌株的致病性进行了测定和ＲＡＰＤ指纹扩增,完成了供试菌株致病类群与其ＲＡＰＤ指纹组间的相关性分析。结果表明,根据２０个菌株对５个棉花品种的抗感反应及其平均病情指数分为４种不同的致病类群;用１０个随机引物对２０个菌株进行ＲＡＰＤ－ＰＣＲ扩增,产生９２条ＤＮＡ带（其中５１条为多态带）;用计算机进行聚类分析,２０个供试菌株聚类为９个ＲＡＰＤ指纹组。相关性分析表明,致病类群与ＲＡＰＤ指纹     

草鱼和鲤RAPD引物筛选及鱼种特异性分子标记

以草鱼和鲤为材料,提取基因组ＤＮＡ,制备ＲＡＰＤ－ＰＣＲ模板,对３个随机引物盒共６０个１０－ｍｅｒ引物进行了ＰＣＲ扩增,共筛选出７个较理想的可用于鱼种内或鱼种间群体遗传分析的随机引物．用这７个引物所获得的草鱼和鲤的ＲＡＰＤ指纹图谱平均带纹总数分别为４．２８±１．８９和６．７１±４．１９,多态性带纹总数分别为１．７１±１．６０和５．１４±４．７４．ＲＡＰＤ指纹图谱特征反映出草鱼比鲤具有更高的遗传纯度．７个引物共扩增出草鱼特异性带纹１８条,鲤特异性带纹３２条．大量特异性带纹的检出表明,两个鱼种间存在较大的遗传差异,同时也为鱼种间基因转移（特别是全基因组ＤＮＡ导入）提供了分子检测的候选遗传标记     

藏山羊RAPD及RFLP标记的初步研究

利用简单随机抽样获得亚东山羊,高原型藏山羊样本,以吕梁山羊为对照进行基因组ＤＮＡ ＲＡＰＤ及ＲＦＬＰ标记的分析。结果表明,序列为５‘－ＴＧＧＴＧ－ＣＡＣＴＣ－３’的随机引物可以作为区分亚东山羊与高在型藏山羊的标记引物,Ｓ及ＭＡＰＤ在某种程度上揭示了类群间遗传相似性;     

几种茄属植物基因组DNA提取与RAPD分析

研究了适于茄子及其近缘野生种基因组ＤＮＡ的提取方法，并对ＤＮＡ初步进行了ＲＡＰＤ分析。结果表明：ＳＤＳ－氯仿－异戊醇法不适于茄属植物ＤＮＡ提纯，而改进的ＣＴＡＢ－酚－氯仿－异戊醇对其成株叶／芽即可获得较高产率及纯度的ＤＮＡ；ＰＣＲ反应扩增出不同片段，引物ＯＰＧ—１１扩增片段在栽培品种与野茄中无差异，而在红茄与龙葵中呈现出一定的多态性。     

板栗基因组DNA几种提取方法比较研究

通过对板栗基因组ＤＮＡ几种提取方法获得的ＤＮＡ质量分析,表明改良ＳＤＳ法是最为理想的提取方法,能满足ＲＡＰＤ及其他分子生物学研究的需要。     

RAPD标记检测与肉鸡肥度性状关联的QTLs——肉鸡个体间RAPD指纹变异

采用随机扩增多态ＤＮＡ（ＲＰＡＤ）技术分析了肉鸡群个体间ＲＡＰＤ指纹的变异程度。１０个随机引物在３６只公鸡中共扩增出８３个片段,其中有６７个是多态性片断,多态率为８０．７２％,１１个随机引物在３６只母鸡中共扩增了９９个片段,其中有８６个是多态性片段,多态率为８６．８７％,公、母鸡群体内个体间遗传相似系数分别为０．７８５８、０．７３２８。结果表明：ＲＡＰＤ标记的多态性明显,作为一种ＤＮＡ标记,它可以     

马铃薯RAPD分析方法优化初探

以云南马铃薯主要栽培品种为材料,使用进口ＰＣＲ仪,对马铃薯ＲＡＰＤ分析中的ＤＮＡ模板浓度、引物浓度、ｄＮＴＰ浓度以及ＰＣＲ扩增反应循环次数进行报研究。结果表明适用于马铃薯ＲＡＰＤ反应的最佳条件为：模板ＤＮＡ１５￣５０ｍｇ,１０－ｍｅｒ随机引物２５￣５０ｎｇ,ｄＮＴＰ２００μＭ,扩增反应周期４０￣４５个循环。每个循环包括９４℃变性１ｍｉｎ,３７℃退火１ｍｉｎ,７２℃延伸２ｍｉｎ。使用这一ＲＡＰＤ程序     

水稻品种对褐飞虱不同生物型抗性的HPLC分析

借助高效液相色谱检测了对褐飞虱2种生物型具有不同抗性水平的2类水稻品种中的13个次生化合物色谱峰的差异,并运用多元回归分析法,分别建立了水稻品种对褐飞虱2种生物型的抗性级别与这些次生化合物含量之间的回归模型．结果表明,被测的13个组分中,峰1、峰2、峰8、峰12是影响水稻对褐飞虱生物型Ⅱ抗性水平的主要抗原次生化合物;峰3、峰4、峰5、峰9、峰11、峰12则是水稻抗褐飞虱孟加拉型的主要抗原次生化合物．提出了以抗原次生物质为标记的快速分析、鉴定、预测水稻对褐飞虱生物型Ⅱ、孟加拉型抗性水平的新途径．     

砀山酥梨自然保护区梨种质资源RAPD分析

利用RAPD技术,采用从80个随机引物中筛选的12个随机引物,对砀山地区梨树24个品种的基因组DNA进行扩增,通过3种编码方式(0-1编码,0-3编码,强带编码)对扩增的谱带进行标记并进行聚类分析.结果表明,运用特异性条带可鉴定梨树的品种类型、营养系变异和杂交种;白梨与沙梨具有较近的亲缘关系.在RAPD带型分析中,以0-3编码比0-1编码和强带编码反映的信息更全面.     

稻褐飞虱新抗源的鉴定和利用

通过筛选抗源、抗性遗传分析,水稻品系BPHR96对褐飞虱生物型Ⅱ和孟加拉型具有高水平广谱抗性,其抗性遗传受2对显性基因控制.通过抗性基因聚合可以有效地获得高抗广谱的抗虫材料,甚至可以从4~6个抗性基因重组后代中获得1级的高抗材料.同时,利用褐飞虱优异抗源BPHR96,获得一大批抗褐飞虱的创新种质.研究结果表明,BPHR96是具有重要利用价值的BPH抗性资源,抗性基因重组与聚合是培育广谱持久高抗性水稻品种的有效途径,特别是利用BPHR96与其他抗源进行抗性基因重组和聚合可为水稻育种提供更理想的抗性.     

三个鸡品系遗传关系的RAPD分析*

 为了从分子水平上阐明快羽系、绿壳蛋系和合成系3个鸡品系之间的遗传差异及其遗传关系,为进一步开展这3个鸡品系的杂交配套利用提供依据,本文采用RAPD标记对3个品系的血样进行了群体遗传关系分析。实验共筛选出27条随机引物,对3个鸡品系的池DNA进行了RAPD分析。27条引物共产生235种扩增片段,扩增产物片段的长度大小在277~2441bp范围内。利用电泳分析数据分别计算了3个品系群体之间的遗传相似系数和遗传距离指数。结果表明:快羽系与绿壳蛋系间的遗传关系最近;而快羽系与合成系间的遗传关系最远。     

南北五味子随机扩增DNA多态性（RAPD）指纹图谱研究

目的建立南北五味子随机扩增DNA多态性标记（（random amplified polymorphic DNA,RAPD）指纹图谱,为南北五味子的鉴别提供可靠依据．方法采用CTAB法从不同产地的南北五味子样品中提取基因组DNA并纯化,将南北五味子基因组DNA进行随机DNA多态性扩增．结果北五味子和南五味子基因组DNA随机引物PCR扩增产物的差异以不同条带数目和条带亮度得已验证;同时体现出北五味子种内变异较小,南五味子种内变异较大．结论RAPD技术为南、北五味子的鉴别提供一种简单、有效、可信度高的方法．     

利用RAPD分子标记分析东北地区杂草稻的亲缘关系

采用随机扩增多态性DNA(RAPD)技术,对东北地区杂草稻生态型以及普通水稻共15个样品进行亲缘关系的分析.所分析的10个随机引物共扩增出了93条DNA片段,其中多态性条带为36条,多态性比例为38.71%,利用93个RAPD标记,在MEGA2.1软件中,计算遗传距离,建立UPGMA聚类图.结果表明:RAPD分子标记可以将杂草稻与普通稻、杂草稻不同生态型之间分开;杂草稻之间形态相似、地理分布相近的物种聚类在一起.     

偃麦草E染色体组特异RAPD和SCAR标记的建立

用100条10碱基随机引物，以普通小麦中国春，中间偃麦草为材料进行RAPD分析，筛选到一个偃麦草染色体组特异引物OPF03，并从中间偃麦草中克隆了该引物的特异DNA片段OPF031291。将该片断与比萨偃麦草中的OPF031296（GenBank序号U43516）比较，同源性为88％。根据OPF031291的序列，设计了2对SCAR引物，利用OPF03和引物P3，P4对普通小麦，普通小麦－中间偃麦草的部分双二倍体，长穗偃麦草，中间偃麦草，小麦－二倍体长穗偃麦草代换系，附加系共6类材料进行了RAPD和SCAR分析，发现RAP标记OPR031291没有出现在含E^e染色体组的材料中，而标记SCAR982则出现于所有含E染色体组的材料中。说明，根据E^b染色体组特异RAPD标记转化的SCAR标记，可以同时检测小麦背景下的E^e染色体。     

水稻品种对褐飞虱代谢酶的影响

用水稻敏感品种TNl和具有不同抗性基因的品种Mudgo,ASD7和Rathu Heenati饲养稻褐飞虱(Nilaparvata lugens)，研究不同品种对褐飞虱体内酯酶、谷胱甘肽转移酶和多功能氧化酶氧—脱甲基活性的影响。结果表明，褐飞虱在3种抗性品种上饲养一代后，其酯酶活性与敏感品种上的试虫相比没有显差异。然而，取食Mudgo和ASD7的雌成虫之间酯酶活性达到显性差异；取食Mudgo和Ruthu Heenati的雄成虫酯酶的Km值分别为取食TNl的2．78和2．58倍。褐飞虱体内酯酶活性还因其生物型的不同而异。对褐飞虱生物型1和生物型2个酯酶活力分布的测定结果表明，生物型2的雌、雄成虫酯酶活性均显低于生物型1的。研究还表明，在ASD7与Rathu Heenati上饲养一代后，褐飞虱雌、雄成虫GST的活性显高于取食TNl和Mudgo的个体，但抗性品种对褐飞虱成虫的多功能氧化酶氧—脱甲基活性没有明显影响。因此，水稻品种对褐飞虱代谢酶的影响因品种的特性，代谢酶的类型，甚至褐飞虱的性别而异。中对其可能的机制进行了探讨。     

甜菜离子注入诱变高糖突变体的RAPD分子标记筛选

以离子注入诱变技术获得的甜菜高糖突变体S10和未做诱变处理的F104及F2代85株单株为研究材料,提取DNA并进行RAPD分析,选取800条RAPD随机引物对S10和F104进行扩增,结果表明,S10和F104之间在DNA水平上存在差异.从800条随机引物中筛选到19条引物在S10和F104中存在较稳定差异,存在差异的引物占所用引物数的2.3;,该研究利用S10和F104做亲本构建分子标记作图群体,进而为定位高糖性状基因或QTL奠定了基础.     

家系纯化对褐飞虱致害特性的影响

采用标准苗鉴法,系统考察了褐飞虱生物型１和生物型２的致害特性在连续五代家系纯化过程中的变化状况,结果发现,家系纯化对两种生物型个体及群体的致害力均有影响,个体间存在的致害力差异有所减小但未被消除;两种生物型群体的致害力均显著下降,至第五代时对ＴＮ１的致害力已分别下降了２３％和１６％,但它们的致害特征并未发生根本性的改变,表明不同生物型的致害特性具有相对的稳定性,此外,致害力的纯化速度缓慢,容易发生衰退,显示的是数量性状的特征和某种程度的杂种优势,文中还对褐飞虱生物型的本质进行了讨论。