几种茄属植物基因组DNA提取与RAPD分析

研究了适于茄子及其近缘野生种基因组ＤＮＡ的提取方法，并对ＤＮＡ初步进行了ＲＡＰＤ分析。结果表明：ＳＤＳ－氯仿－异戊醇法不适于茄属植物ＤＮＡ提纯，而改进的ＣＴＡＢ－酚－氯仿－异戊醇对其成株叶／芽即可获得较高产率及纯度的ＤＮＡ；ＰＣＲ反应扩增出不同片段，引物ＯＰＧ—１１扩增片段在栽培品种与野茄中无差异，而在红茄与龙葵中呈现出一定的多态性。     

RAPD技术在粤星番茄种子纯度检测中的初步研究

应用２０个随机引物对华南地区番茄主栽品种之一－粤星及其亲本的基因组ＤＮＡ进行了ＲＡＤ分析，发现７个引物可以在粤星及其亲本的ＲＡＰＤ图谱中形成多态性差异，其中引物Ｐ１８可应用于粤星番茄种子中混杂的母本类假杂种的检测。     

栽培大豆品种间遗传关系的RAPD研究

选用８１种随机引物，利用ＲＡＰＤ技术对１３种栽培大豆品种的基因组ＤＮＡ多态性进行了分析，结果表明大多数的随机引物均得到了良好的ＰＣＲ扩增结果，显示出不同的栽培大豆品种之间基因组ＤＮＡ既有高度的同源性，又具有良好的多态性。通过Ｎｅｉ氏遗传共享度分析，使用ＵＰＧＭＡ（ｔｈｅ ｕｎｗｅｉｇｈｔｅｄ ｐａｉｒ ｇｒｏｕｐ ｍｅｔｈｏｄ ｆｏｒａｒｉｔｈｍｅｔｉｃ ａｖｅｒａｇｅｓ）进行聚类分析，得到了ＵＰ     

栽培大豆品种间遗传关系的RAPD研究

选用８１种随机引物,利用ＲＡＰＤ技术对１３种栽培大豆品种的基因组ＤＮＡ多态性进行了分析,结果表明大多数的随机引物均得到了良好的ＰＣＲ扩增结果,显示出不同的栽培大豆品种之间基因组ＤＮＡ既有高度的同源性,又具有良好的多态性．通过Ｎｅｉ氏遗传共享度分析,使用ＵＰＧＭＡ（ｔｈｅｕｎｗｅｉｇｈｔｅｄｐａｉｒｇｒｏｕｐｍｅｔｈｏｄｆｏｒａｒｉｔｈｍｅｔｉｃａｖｅｒａｇｅｓ）进行聚类分析,得到了ＵＰＧ－ＭＡ系统树和实验材料之间的遗传关系．     

RAPD标记检测蔬菜种子纯度中DNA提取方法研究

对ＤＮＡ提取方法的ＳＤＳ法进行改进的研究结果表明：改进了的ＳＤＳ法操作简便,操作过程可在１小时内完成,适于番茄,辣椒,黄瓜等蔬菜作物的基因组ＤＮＡ提取,且宜于在种子纯度检测的ＲＡＰＤ分析中应用。     

褐飞虱不同生物型基因组DNA的RAPD分析

试验了两种ＤＮＡ提取方法抽提褐飞虱基因组ＤＮＡ的效果及其用所获得的ＤＮＡ进行ＲＡＰＤ扩增的技术条件,结果发现,采用蚜虫ＤＮＡ的提取方法（略有改进）来抽提高飞虱基因组ＤＮＡ,并用Ｓ系列的随机引物、ＲＡＰＤ的通用反应体系及９４℃变性,３６℃退火和７２℃延伸的扩增条件来对其进行随机扩增,可获得满意的效果,不同致害类群的群体间和同一致富类群的个体间的ＲＡＰＤ多态性均有差异,单雌纯化只能将个体间的差异缩小,     

用聚合酶链式反应技术鉴定杂交稻种子纯度的初步研究

应用聚合酶链式反应（ＰＣＲ）技术,对３个杂交稻组合及其相应亲本的核ＤＮＡ进行了分析,筛选出９个随机扩增多态性ＤＮＡ（ＲＡＰＤ）随机引物和１对简单重复序列（ＳＳＲ）引物,可对供试材料进行真伪和纯度鉴定,该技术具有快速,简便,准确的特点,每人每天可测定１８０份样品,适用于杂交稻种子的商业化鉴定。     

RAPD鉴定番茄一代杂种遗传纯度的研究

以番茄优良一代杂交种毛粉８０８、毛粉８１８和强选一号为材料,提取ＤＮＡ进行ＲＡＰＤ分析,在３００个ＲＡＰＤ随机引物中筛选出了可鉴定３个品种一代杂种遗传纯度的特异性引物。其中Ｓ１０１９,Ｓ１３８８和Ｓ１４２２可用于这３个品种的纯度鉴定;Ｓ１０７２用于毛粉８０８和毛粉８１８的纯度鉴定;Ｓ１３８８用于区分３个品种的父本和子代。     

RAPD标记在高粱基因组分析中的应用

本实验研究了ＲＡＰＤ标记在高粱基因组分析中的可用性。Ｍｇ＾２＋,酶及引物浓度是优化ＰＣＲ反应的重要参数。经２２个引物对高粱品系,ＩＳ３６２０ｃ和ＢＴＸ６２３及其杂交Ｆ８的１２０株后代个体的ＤＮＡ进行ＰＣＲ扩增,在获得的５５个ＲＡＰＤ标记中,有４２个标记定位于已存在的ＲＦＬＰ高粱遗传图谱中,实验结果表明,ＲＡＰＤ标记可以稳定遗传。     

松材线虫和拟松线虫种间及种下群体的RAPD指纹分析

利用ＲＡＰＤ技术对松材线虫（Ｂｕｒｓａｐｈｅｌｅｎｃｈｕｓ ｘｙｌｌｐｈｉｌｕｓ）和拟松材线虫（Ｂ．ｍｕｃｒｏｎａｔｕｓ）的分离物基因组ＤＮＡ进行了ＤＮＡ片段的随机扩增,以确定种间及种内群体的亲缘关系和筛选具有种鉴定特征的分子标记。通过对４０个１０聚体随机引物的筛选,应用８个引物对两种线虫种间种内分离物扩增片段的遗传分析显示：两种间群体ＲＡＰＤ扩增片段的共享度为４０％￣５６％,百在松材线虫的不同分     

"夏光"、"早夏16"甘蓝杂交种DNA指纹图谱的构建

用SDS法提取甘蓝(Brassica oleraceavar.capitata)杂交种“夏光”、“早夏16”及其各自亲本的基因组DNA,通过SSR、RAPD两种分子标记方法构建其DNA指纹图谱用于纯度鉴定。利用30对甘蓝SSR引物和50个适用于甘蓝的RAPD引物,以各杂交种及其亲本的基因组DNA为模板组合进行筛选,结果显示:多数SSR引物对两组合扩增带型一致,未能建立SSR指纹图谱;通过RAPD标记方法筛选出能鉴定两杂交种纯度的引物分别为S15、S42、S147和S42、S78、S88,其中引物S42对两组合均能扩增出特异的RAPD指纹图谱,并将RAPD指纹图谱转变为相应的数字指纹。     

福建省12个地方解放钟枇杷的RAPD分析

采用Sangon 13个长度为10 bp的引物对福建省12个地方的解放钟枇杷进行了RAPD分析,在12个样品中共扩增出64条带,不同引物获得的扩增带1-8条,S60最少,只有1条;S80最多,有8条;平均4.85条。其中11条引物对12个地方解放钟枇杷RAPD扩增结果都相同,而引物S66、S80对12个不同地方的解放钟枇杷进行RAPD扩增,结果表明3号在850bp、9号在250 bp处缺失1条扩增带,其余62条带都相同。这在DNA水平上证实了解放钟枇杷在遗传上保持较高的稳定性,但随着时间、环境的变化也会产生一些基因变异。     

金花梨基因组DNA提取及其RAPD分析

以金花梨嫩芽为试材 ,通过在磨样时添加不同量的抗氧化剂Vc ,对CTAB法作了一定的改进 ,比较了不同处理的提取效果 ,再分别以成熟叶片、新梢和嫩芽为材料 ,采用改进的CTAB法提取基因组DNA ,进一步比较了不同材料的提取效果 ,并以金花梨及其 18个变异单系的基因组DNA为模板 ,4 0个随机引物进行RAPD分析。结果表明 :以嫩芽为试材 ,在磨样时每克鲜样添加 0 10g的Vc ,能够提取到高质量的基因组DNA ;采用改进的CTAB法 ,用成熟叶片、新梢和嫩芽均能提取到可直接用于RAPD分析的基因组DNA ;大部分引物可以在不同模板上扩增出条带 ,但仅有 5个引物可以同时在金花梨及其 18个变异单系基因组DNA上扩增出条带 ;用RAPD结果对金花梨及其 18个变异单系进行聚类分析     

小麦吸浆虫不同滞育虫态的RAPD研究

应用44条随机引物,对麦红吸浆虫Sitodiplosis mosellana(Gehin)10个不同滞育阶段的个体进行RAPD检测,筛选出6条随机引物S1,S50,S81,S83,S1031,S1248,可以扩增出清晰稳定的多态性片断81条,相对分子质量在200bp~2000bp之间。应用UPGMA(非加权配对算术平均法)对多态性片断进行聚类分析,构建树状图,推测不同滞育阶段之间的聚类关系。结果表明:在各个滞育阶段中,裸露幼虫相互之间的遗传距离和亲缘关系比较近,具有比较同质的遗传背景,而不同阶段的结茧幼虫相互之间的关系比较复杂。     

西瓜和甜瓜杂种一代种子纯度的RAPD鉴定

选用100条随机引物(S71-S190)对西瓜、甜瓜杂种一代和其父、母本的种子进行随机扩增多态性DNA(RAPD)分析,探索西瓜和甜瓜杂交品种种子纯度鉴定的便捷途径.结果表明:在100条引物中筛选出4条有特征条带的引物,其中S92号引物能使甜籽一号、白兰蜜和黄河蜜6号与其母本有效区分开来;S162号、S181号引物能使甜籽一号与其母本区分开来;S175号引物能使白兰蜜与其母本区分开来;但未发现使T×14E与其母本区分开来的引物.     

芦笋ISSR引物筛选及遗传多样性分析

采用ISSR技术对26份芦笋品种进行遗传多样性分析。以芦笋基因组DNA为模板,筛选出18条适用于芦笋的ISSR引物,并确定了它们的最佳退火温度。用这18条引物对收集自5个国家的26份芦笋品种进行ISSR分析,共获得扩增位点145个,其中多态性位点111个,多态性位点比例为76.6%。采用NTSYS2.10e软件进行相似系数分析,构建聚类树状图。在相似系数0.78处划线,可将样品划分为5个类群。     

基于磁性微球的基因组核酸提取及其在中药材真伪鉴别和亲缘关系分析中的应用

为从分子水平上对中药材质量进行控制,基于磁性微球对中药材核酸进行纯化及后续生物鉴定,采用磁分离技术提取高纯度的核酸模板,以高磁响应性、粒径均一的超顺磁性四氧化三铁微球为固相载体,在聚乙二醇和氯化钠等的协同作用下,对根、茎、叶、花、果实、种子类中药材基因组核酸进行提取;分别提取丹参和柴胡的基因组核酸,并对其进行聚合酶链式反应扩增(PCR)和随机扩增多态性分析(RAPD),用于对丹参的真伪鉴别和对柴胡进行亲缘关系分析.结果表明:经提取,获得了纯度较高(OD260 nm/OD280 nm介于1.6~2.0)的中药材核酸模板;通过扩增叶绿素rpl16基因片段,可有效鉴别丹参及其伪品牛蒡;采用3个有效随机引物,可从基因水平上分析4个柴胡品种的亲缘关系远近     

不同花色铁棒锤基因组DNA提取及遗传差异分析

利用RAPD-PCR技术对不同花色的铁棒锤植物进行遗传差异分析,旨在为今后铁棒锤的引种驯化及品种选育提供参考。采用CTAB法,从铁棒锤植物不同材料提取基因组DNA,用琼脂糖凝胶电泳法和紫外分光光度法检测所得总DNA的浓度和纯度,并用20条RAPD随机引物进行PCR扩增及琼脂糖凝胶电泳分析。结果表明,CTAB法从铁棒锤的新鲜叶片及干燥种子中均可提取出基因组DNA,但前者DNA的质量好、产量高;有3条引物可以扩增出条带,其中,引物E68629的扩增产物清晰稳定,可用于铁棒锤遗传差异分析。RAPD分析结果表明,2种花色铁棒锤在分子水平上具有遗传学差异。     

应用RAPD技术探讨红叶李、李和杏的亲缘关系

为了对红叶李Prunus cerasifera cv.Atropurpurea,李P.salicina和杏P.armeniaca的亲缘关系、品种识别及资源保存提供分子生物学依据,也为了验证传统的形态学分类方法,从132个随机引物中筛选出20个引物对红叶李、李和杏的8个材料进行了基因组DNA扩增,均具有多态性,共扩增出264条带,平均每个引物产生13.2个RAPD片段.RAPD带型及聚类分析表明:RAPD技术能将红叶李、李属植物和杏属植物完全分开,红叶李、李和杏之间表现出一定的亲缘关系,各属品种之间都有不同的遗传距离,证明RAPD技术可作为种和属水平的分类鉴定依据;利用红叶李、李和杏品种的特异谱带结合DNA指纹,可将参试的各品种鉴别出来,从而说明了RAPD技术能够用于种或品种之间的鉴定.图2表2参12     

γ-^60Co处理红安久梨种子诱变效应的RAPD分析

通过4个辐射剂量（100rad、400rad、700rad和1000rad,剂量率均为0．97Gy／min）的γ-^60Co辐射处理红安久梨部分已萌发的种子,经播种移栽,处理后的实生苗分离成红色苗和绿苗。为明确辐射处理对红安久梨种子基因组DNA的影响,对处理后的实生苗以及未辐射处理的实生苗进行了RAPD分析。用400个随机引物进行了重复筛选,共获得9个稳定的RAPD引物。结果表明,辐射处理对红安久梨种子基因组DNA造成了一定的损伤。