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相似文献
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1.
辣椒基因组DNA提取与RAPD分析   总被引:27,自引:0,他引:27  
采用液氮-SDS法、SDS法和氯化苄法对辣椒的DNA进行了提取。结果表明:液氮-SDS法提取的DNA具有典型的天然DNA分子的标准紫外吸收光谱,其A260/A280在1.60~1.70之间,A260/A230在1.5~1.8之间,100mg叶子DNA产量为60~90μg。用该法提取的辣椒DNA适于进行RAPD分析。SDS法、氯化苄法不适于辣椒DNA的提取。  相似文献   

2.
提取植物和微生物DNA的SDS—CTAB改进法   总被引:7,自引:1,他引:7  
该文介绍了一种简便快速地提取植物和微生物细胞总DNA的方法,该法是对提取真菌DNA的SDS-CTAB法进行改进而成,经过修改后的SDS-CTAB法可在数小时内高效地提取细胞总DNA。制备物经琼脂糖凝胶电泳检测到大于20kb的DNA主带,基本无DNA碎带;不用RNase处理,就已经无RNA的干扰。OD260/280值显示产物纯度较高,无需任何纯化处理即可以用于PCR扩增和RAPD分析。  相似文献   

3.
提取植物和微生物DNA的SDS-CTAB改进法   总被引:40,自引:1,他引:40  
该文介绍了一种简便快速地提取植物和微生物细胞总DNA的方法,该法是对提取真菌DNA的SDS CTAB法进行改进而成,经过修改后的SDS CTAB法可在数小时内高效地提取细胞总DNA.制备物经琼脂糖凝胶电泳检测到大于20kb的DNA主带,基本无DNA碎带;不用RNase处理,就已经无RNA的干扰.OD260/280值显示产物纯度较高,无需任何纯化处理即可以用于PCR扩增和RAPD分析  相似文献   

4.
板栗基因组DNA几种提取方法比较研究   总被引:19,自引:0,他引:19  
通过对板栗基因组DNA几种提取方法获得的DNA质量分析,表明改良SDS法是最为理想的提取方法,能满足RAPD及其他分子生物学研究的需要。  相似文献   

5.
RAPD是一种建立在PCR基础之上的新的分子标记技术,利用RAPD技术对不同年份采收的豇豆种子进行了研究从豇豆干种子中直接提取的基因组DNA可以用于RAPD分析在20种10bp随机引物中筛选出S207和S2082种引物,并获得了豇豆基因组DNA的指纹图谱筛选出的2种引物均只在1997年采收的豇豆种子的基因组DNA上扩增出1条DNA带研究结果表明,不同年份采收的豇豆种子在遗传性上相当一致,而豇豆种子的基因组DNA在贮藏过程中会受到损伤  相似文献   

6.
RAPD标记鉴定作物品种单粒种子提取DNA方法的改进   总被引:3,自引:0,他引:3  
利用改进的方法从洒米单粒种子的糙米中提取DNA用于RAPD分析,结果表明,该提取方法简捷、扩增多态性好、谱带清晰,对其他作物如玉米、小麦、水稻等直接利用种子提取DNA提供借鉴。  相似文献   

7.
几种茄属植物基因组DNA提取与RAPD分析   总被引:11,自引:1,他引:11  
研究了适于茄子及其近缘野生种基因组DNA的提取方法,并对DNA初步进行了RAPD分析。结果表明:SDS-氯仿-异戊醇法不适于茄属植物DNA提纯,而改进的CTAB-酚-氯仿-异戊醇对其成株叶/芽即可获得较高产率及纯度的DNA;PCR反应扩增出不同片段,引物OPG—11扩增片段在栽培品种与野茄中无差异,而在红茄与龙葵中呈现出一定的多态性。  相似文献   

8.
DNA提纯方法对6种甘蔗亚族植物RAPD的影响   总被引:19,自引:1,他引:18  
甘蔗植物组织内的多酚类、色素类等物质是干扰RAPD扩增反应的主要成分。本研究以CATB法和SDS法为基础,着重对抗氧化剂(PVP等)、酶(蛋白酶K、RNaseA)和酚抽提等因素对提取DNA的质量及其RAPD的影响进行了比较筛选。结果表明:①甘蔗DNA提取质量和纯度与RNaseA、抗氧化剂等处理直接相关,蛋白酶K、CATB和SDS的处理无明显差异;②对于甘蔗RAPD反应,模板DNA中含有一定量的RN  相似文献   

9.
一种适合枣合酸枣基因组DNA的提取方法   总被引:7,自引:0,他引:7  
研究比较了CTAB法和SDS法在枣和酸枣基因组DNA提取中的效果,并分析了取样时间、部位、样品状况、抗氧化剂和不同纯化处理等对所提DNA质和量及其RAPD扩增效果的影响。结果表明:用改良后的CTAB法优于SDS法,可有效地去除多糖,所提DNA的质和量均能满足PCR扩增要求。取样时间与部位对所提基因组DNA的质量无影响,但与产量有关,以旺盛生长期的幼叶或嫩梢尖为佳。样品采用液氧处理-70℃低温保存,  相似文献   

10.
褐飞虱不同生物型基因组DNA的RAPD分析   总被引:11,自引:3,他引:11  
试验了两种DNA提取方法抽提褐飞虱基因组DNA的效果及其用所获得的DNA进行RAPD扩增的技术条件,结果发现,采用蚜虫DNA的提取方法(略有改进)来抽提高飞虱基因组DNA,并用S系列的随机引物、RAPD的通用反应体系及94℃变性,36℃退火和72℃延伸的扩增条件来对其进行随机扩增,可获得满意的效果,不同致害类群的群体间和同一致富类群的个体间的RAPD多态性均有差异,单雌纯化只能将个体间的差异缩小,  相似文献   

11.
玉米单粒种子DNA提取新方法   总被引:67,自引:1,他引:67  
本研究主要对玉米粒种子DNA的提取方法进行了探讨,取得了突破性进展,研究出在不同液氮的情况下,防止DNA降解的关键技术,该方法操作步骤简单,快速,实用性强,一天时间可以提取近300个样品,并且采用该方法提取的DNA分子量较大,质量好,为RAPD在玉米种质及纯度鉴定上的广泛应用提供了技术上的保证,有利于该项技术的普及和推广。  相似文献   

12.
新城疫病毒F_(48)E_8株cDNA文库的构建   总被引:1,自引:0,他引:1  
以SPF鸡胚繁殖我国标准新城疫病毒F_(48)E_8强毒株,经蔗糖密度梯度超速离心纯化病毒。再以酚-SDS法提取病毒基因组RNA,作为反应模板、采用Promega公司商品试剂盒合成双股cDNA。以同聚物加尾的方法将cDNA克隆到质粒pGEM3Zf(一)中,经AIX平板筛选,限制性内切酶分析和Digoxigenin标记的核酸探针检测,共获得插入外源片段大小在0.6~4.8kb的阳性克隆75个,初步构建了F_(48)E_8株的cDNA文库  相似文献   

13.
用非放射性原位杂交技术定位家猪PGD和HSL基因   总被引:2,自引:2,他引:0  
用地高辛为标记物,以随机引物法标记猪PGD cDNA和HSL cDNA探针,经与半微量全血培养法制备的染色体进行原位杂交后,将猪PGD和HSL基因分别定位在猪6号染色体6q^25和6cen-6q^21区域。  相似文献   

14.
棉花DNA的快速提纯   总被引:1,自引:0,他引:1  
棉花DNA的快速提纯陈翠霞,于元杰,王洪刚(山东农业大学农学系)关键词:棉花DNA;提取;纯化AMETHODFORISOLATIONOFCOTIONDNA¥Chencuixia;YuYuanjie;WangHonggang(Dept.ofAgrono...  相似文献   

15.
建立了一种以一定EDTA深度的NaOHO-SDS溶液和BaAC2溶液快速分离鉴定质粒DNA的方法。该法是将菌落直接挑在NaOH-SDS溶液中,待细菌细胞壁破裂、质粒DNAI了出来后,按比例加入BaAC2溶液、离心取上清液电泳、紫外灯下分析鉴定。与其他快速分离鉴定质粒DNA的方法相比较,本法具有简单、可靠、省时、无染色体DNA及RNA污染、灵敏度高(可检出1mm左右直径的单个菌落听质粒DNA)等优点  相似文献   

16.
新城疫病毒F48E8株cDNA文库的构建   总被引:2,自引:0,他引:2  
以SPF鸡胚繁殖我国标准新城疫病毒F48E8强毒株,经蔗糖密度梯度超速离心纯化病毒。再以酚-SDS法提取病毒基因组RNA,作为反就模板,采用Promega公司商品试剂合成双股cDNA。以同聚物加尾的方法将cDNA克隆 粒pGEM 3Zf中,经AIX平板筛选,限制性内切酶分析和Digoxigenin标记的核酸探针检测,共获得插入外源片段大小在0.6-4.8kb的阳性克隆75个,初步构建了F48E8株  相似文献   

17.
利用RAPD技术鉴定早青3号黄瓜种子纯度的研究   总被引:3,自引:0,他引:3  
改进黄瓜DNA抽提方法,利用RAPD技术从40个随机引物中筛选出2个引物,能准确快速,有效地检测早青3号黄瓜杂种的纯度。  相似文献   

18.
家蚕微孢子虫(Nosema bombycis)表面蛋白提取法研究   总被引:6,自引:0,他引:6  
对微孢子虫表面蛋白的提取法研究表明,在微孢子虫的纯化中采用蔗糖法,甘油法及Percoll法,结果Percoll法是纯化微孢子虫的理想方法,微孢子虫表面蛋白采用高盐法,碱法及SDS法提取,其蛋白量的OD值分别为0.094,0.021和0.268,SDS法提取量最多。  相似文献   

19.
11种野生苹果种质资源RAPD标记研究   总被引:2,自引:0,他引:2  
利用C.G.Alpha等的DNA微量提取法,提取了山荆子MalusbaccataBorkh.等11个苹果属植物野生种类的DNA,并用5对引物对所研究材料的RAPD标记进行了研究。探讨了叶片中富含多酚类化合物的苹果植物叶片DNA的提取及纯化方法,并初步建立了野生苹果RAPD标记的PCR反应条件。  相似文献   

20.
玉米大斑病菌的RAPD分析Ⅰ.应用CTAB法提取玉米大斑病菌DNA   总被引:16,自引:2,他引:16  
用采自河北、辽宁、黑龙江、山东、吉林等5省的14个玉米大斑病菌菌株为试材进行液体培养,然后采用CTAB法从菌丝中提取DNA,通过752型紫外光栅分光光度计检测,最后将所提取的DNA在热循仪PE-4800上进行随机引物多态性扩增。结果发现,所提取的DNA的OD260/OD280比值介于1.730-1.847之间,扩增产物经琼脂糖凝胶电泳后得到了较清晰的扩增图谱,从而证明了采用的CTA法是提取玉米大斑病菌DNA并用于分子生物学研究的一种行之有效的玉米。  相似文献   

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