提取植物和微生物DNA的SDS—CTAB改进法

该文介绍了一种简便快速地提取植物和微生物细胞总ＤＮＡ的方法，该法是对提取真菌ＤＮＡ的ＳＤＳ－ＣＴＡＢ法进行改进而成，经过修改后的ＳＤＳ－ＣＴＡＢ法可在数小时内高效地提取细胞总ＤＮＡ。制备物经琼脂糖凝胶电泳检测到大于２０ｋｂ的ＤＮＡ主带，基本无ＤＮＡ碎带；不用ＲＮａｓｅ处理，就已经无ＲＮＡ的干扰。ＯＤ２６０／２８０值显示产物纯度较高，无需任何纯化处理即可以用于ＰＣＲ扩增和ＲＡＰＤ分析。     

一种适合枣合酸枣基因组DNA的提取方法

研究比较了ＣＴＡＢ法和ＳＤＳ法在枣和酸枣基因组ＤＮＡ提取中的效果，并分析了取样时间、部位、样品状况、抗氧化剂和不同纯化处理等对所提ＤＮＡ质和量及其ＲＡＰＤ扩增效果的影响。结果表明：用改良后的ＣＴＡＢ法优于ＳＤＳ法，可有效地去除多糖，所提ＤＮＡ的质和量均能满足ＰＣＲ扩增要求。取样时间与部位对所提基因组ＤＮＡ的质量无影响，但与产量有关，以旺盛生长期的幼叶或嫩梢尖为佳。样品采用液氧处理－７０℃低温保存，     

DNA提纯方法对6种甘蔗亚族植物RAPD的影响

甘蔗植物组织内的多酚类、色素类等物质是干扰ＲＡＰＤ扩增反应的主要成分。本研究以ＣＡＴＢ法和ＳＤＳ法为基础,着重对抗氧化剂（ＰＶＰ等）、酶（蛋白酶Ｋ、ＲＮａｓｅＡ）和酚抽提等因素对提取ＤＮＡ的质量及其ＲＡＰＤ的影响进行了比较筛选。结果表明：①甘蔗ＤＮＡ提取质量和纯度与ＲＮａｓｅＡ、抗氧化剂等处理直接相关,蛋白酶Ｋ、ＣＡＴＢ和ＳＤＳ的处理无明显差异;②对于甘蔗ＲＡＰＤ反应,模板ＤＮＡ中含有一定量的ＲＮ     

几种茄属植物基因组DNA提取与RAPD分析

研究了适于茄子及其近缘野生种基因组ＤＮＡ的提取方法，并对ＤＮＡ初步进行了ＲＡＰＤ分析。结果表明：ＳＤＳ－氯仿－异戊醇法不适于茄属植物ＤＮＡ提纯，而改进的ＣＴＡＢ－酚－氯仿－异戊醇对其成株叶／芽即可获得较高产率及纯度的ＤＮＡ；ＰＣＲ反应扩增出不同片段，引物ＯＰＧ—１１扩增片段在栽培品种与野茄中无差异，而在红茄与龙葵中呈现出一定的多态性。     

柿树带化和刺槐丛枝的PCR检测

根据植物菌原体１６ＳｒＲＮＡ基因序列,合成一对寡核苷酸引物,用ＳＤＳ ＣＴＡＢ改进法直接提取田间发病的柿树带化病、刺槐丛枝病树和健康树皮层的ＤＮＡ,用ＰＣＲ方法成功地从病树ＤＮＡ模板中扩增出约１．１７ｋｂ的特异产物,经酶切进一步证实为植物菌原体１６ＳｒＤＮＡ．此项研究表明用特异合成的引物Ｆ１６／Ｒ１６,经ＰＣＲ扩增可以快速灵敏地检测植物菌原体．     

RAPD标记在大豆品种鉴定中的应用初探

以十六烷基溴化铵（ＣＴＡＢ）选择性沉淀ＤＮＡ的方法，提取大豆种子、新鲜叶片或冷冻干燥叶片的总ＤＮＡ，所得ＤＮＡ纯度好，降解少，分子量大，完全可以用于ＲＡＰＤ分析。本文就ＲＡＰＤ标记手段在大豆品种鉴定中的应用作一简报，仅ＯＰＡ－０４就能将供试的１７份大豆品种区分开，表明ＲＡＰＤ用于种子纯度鉴定及品种鉴定是可行的。     

不结球白菜抗病育种研究：Ⅴ.抗TuMV遗传研究

不结球白菜抗病育种研究Ⅴ．抗ＴｕＭＶ遗传研究曹光亮，曹寿椿（南京农业大学农业与生命科学学院，南京２１００９５）ＳＴＵＤＩＥＳＯＮＢＲＥＥＤＩＮＧＦＯＲＤＩＳＥＡＳＥＲＥＳＩＳＴＡＮＣＥＩＮＮＯＮ－ＨＥＡＤＩＮＧＣＨＩＮＥＳＥＣＡＢＢＡＧＥⅤ．ＡＳＴＵ...     

褐飞虱种群的DNA的提取及RAPD分析

以福建省５个不我的褐飞虱种群为虫源,通过对褐飞虱基因组ＤＮＡ提取和ＲＡＰＤ分析方法的摸索,结果表明,用ＣＴＡＢ方法提取的５个种群的基因组ＤＮＡ,无降解情况,ＲＮＡ去除较为干净,可用于褐飞虱的ＤＮＡ提取;随机引物筛选结果为,所用的４５个随机引物中５个引物扩增结果完全相同,７个引物出现多态性,扩散带数为４９条具多态笥,占４２．８５％。利用Ｎｅｉ氏相似系数,对５个种群的ＲＡＰＤ－ＰＣＲ结果进行分析,结果     

孟加拉粉大蕉抗寒、抗病性初步研究

孟加拉粉大蕉抗寒、抗病性初步研究林静芸（仲恺农业技术学院园艺系广州５１０２２５）ＰＲＥＬＩＭＩＮＡＲＹＲＥＳＥＡＲＣＨＯＮＣＯＬＤ－ＢＡＲＤＹ，ＤＩＳＥＡＳＥＲＥＳＩＳＴＡＮＴＣＨＡＲＡＣＴＥＲＯＦＢＥＮＧＡＬＥＳＥＰＬＡＮＴＡＩＮＬｉｎＪｉｎｇｙｕ...     

辣椒基因组DNA提取与RAPD分析

采用液氮－ＳＤＳ法、ＳＤＳ法和氯化苄法对辣椒的ＤＮＡ进行了提取。结果表明：液氮－ＳＤＳ法提取的ＤＮＡ具有典型的天然ＤＮＡ分子的标准紫外吸收光谱,其Ａ２６０／Ａ２８０在１．６０～１．７０之间,Ａ２６０／Ａ２３０在１．５～１．８之间,１００ｍｇ叶子ＤＮＡ产量为６０～９０μｇ。用该法提取的辣椒ＤＮＡ适于进行ＲＡＰＤ分析。ＳＤＳ法、氯化苄法不适于辣椒ＤＮＡ的提取。     

一种简单快速分离鉴定少量质粒DNA方法

建立了一种以一定ＥＤＴＡ深度的ＮａＯＨＯ－ＳＤＳ溶液和ＢａＡＣ２溶液快速分离鉴定质粒ＤＮＡ的方法。该法是将菌落直接挑在ＮａＯＨ－ＳＤＳ溶液中，待细菌细胞壁破裂、质粒ＤＮＡＩ了出来后，按比例加入ＢａＡＣ２溶液、离心取上清液电泳、紫外灯下分析鉴定。与其他快速分离鉴定质粒ＤＮＡ的方法相比较，本法具有简单、可靠、省时、无染色体ＤＮＡ及ＲＮＡ污染、灵敏度高（可检出１ｍｍ左右直径的单个菌落听质粒ＤＮＡ）等优点     

抗病棉自变世代群体抗病性观察简报

抗病棉自变世代群体抗病性观察简报汪勤生，张青，钱立军（江苏海安县种子公司，海安２２６６００；海安县墩头镇种子站；海安棉花原种场）ＡＢＲＩＥＦＲＥＰＯＲＴＡＢＯＵＴＴＨＥＤＩＳＥＡＳＥＲＥＳＩＳＴＡＮＣＥＥＸＰＲＥＳＳＥＤＯＮＳＥＬＦＥＤＧＥＮＥＲＡＴ...     

11种野生苹果种质资源RAPD标记研究

利用Ｃ．Ｇ．Ａｌｐｈａ等的ＤＮＡ微量提取法,提取了山荆子ＭａｌｕｓｂａｃｃａｔａＢｏｒｋｈ．等１１个苹果属植物野生种类的ＤＮＡ,并用５对引物对所研究材料的ＲＡＰＤ标记进行了研究。探讨了叶片中富含多酚类化合物的苹果植物叶片ＤＮＡ的提取及纯化方法,并初步建立了野生苹果ＲＡＰＤ标记的ＰＣＲ反应条件。     

一种有效提取油菜叶片总DNA的方法

一种有效提取油菜叶片总ＤＮＡ的方法李佳，沈斌章，韩继祥，甘莉（华中农业大学中心实验室武汉４３００７０；华中农业大学农学系武汉４３００７０）关键词ＤＮＡ，提取方法，试剂，国产，油菜ＡＥＦＦＥＣＴＩＶＥＰＲＯＣＥＤＵＲＥＦＯＲＥＸＴＲＡＣＴＩＮＧＴＯＴＡ...     

马立克病毒糖蛋白D基因转入感染细胞DNA的研究

用ＥｃｏＲＩ，ＰｓｔＩ内切酶将已分离和克隆的马立克氏病病毒（ＭＤＶ）糖蛋白Ｄ（ｇＤ）基因从重组ｐＭｇＤ１８质粒中切出，克隆进反转录病毒质粒载体（ＲＣＡＳ）的连接质粒载体ｐＵＣＣｌａ１１２Ｎ的相同位点。用Ｃｌａｌ再将ｇＤ重组ｐＵＣＣｌａ１１２Ｎ中的ｇＤ基因切出，用ＣｌａＩ将ＲＣＡＳ载体切开，将ｇＤ基因构建于ＲＣＡＳ的ＣｌａＩ位点。通过原位杂交筛选重组ＲＣＡＳ，并结合酶切分析鉴定出ｇＤ插入方向正确的重组ＲＣＡＳ。用磷酸钙沉淀法将ｇＤ重组ＲＣＡＳ转染鸡胚成纤维细胞。收集转染后第９天的细胞上清，并用其感染原代ＣＥＦ，在感染后第４天和第６天收集ＣＥＦ。提取ＣＥＦ基因组ＤＮＡ，用Ｄｉｇｏｘｉｇｅｎｉｎ（ｄｉｇ）标记ｇＤ基因片段作为探针，通过ｄｏｔｂｌｏｔ和Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ检测基因转移情况。结果表明，转染的重组ＲＣＡＳ不仅在细胞内变成有传染性的完整病毒，而且成功地将ｇＤ基因与病毒前ＤＮＡ一起整合在ＣＥＦＤＮＡ中     

用吖啶橙处理法制备猪高分辨G带染色体

用吖啶橙处理法制备猪高分辨Ｇ带染色体熊统安赵雅心李奎李明军彭中镇（华中农业大学畜牧兽医学院，武汉４３００７０）ＨＩＧＨ－ＲＥＳＯＬＵＴＩＯＮＧ－ＢＡＮＤＩＮＧＣＨＲＯＭＯＳＯＭＥＳＯＦＰＩＧＳＢＹＵＳＩＮＧＴＨＥＡＣＲＩＤＩＮＥＯＲＡＮＧＥＴＲＥＡ...     

扭转轴在冲击载荷作用下冲击应力和动载系数的计算

扭转轴在冲击载荷作用下冲击应力和动载系数的计算姜玉明（南京农业大学农业工程学院，南京２１００３２）ＣＡＬＣＵＬＡＴＩＯＮＯＦＩＭＰＡＣＴＳＴＲＥＳＳＡＮＤＤＹＮＡＭＩＣＬＯＡＤＦＡＣＴＯＲＯＮＴＯＲＳＩＯＮＳＨＡＦＴＡＣＴＥＤＢＹＩＭＰＵＬＳＩＶＥＬ...     

用直接荧光抗体法和细菌培养法对中华鳖体内的嗜水气单胞菌的检测

用直接荧光抗体法和细菌培养法对中华鳖体内的嗜水气单胞菌的检测陈昌福（华中农业大学水产学院,武汉４３００７０）ＦＬＵＯＲＥＳＣＥＮＴＡＮＴＩＢＯＤＹＴＥＣＨＮＩＱＵＥＣＯＭＰＡＲＥＤＴＯＰＬＡＴＥＣＵＬＴＵＲＥＭＥＴＨＯＤＦＯＲＣＯＵＮＴＯＦＡｅｒｏ...     

CD58对猪PBMC分泌IL-2的作用

应用ＭＴＴ比色法,以Ｃ５７ＢＬ／６系小鼠脾细胞作为测定细胞,检测了ＳＲＢＣ和ＰＲＢＣ及自其表面提取的ＣＤ５８对猪ＰＢＭＣ分泌ＩＬ－２的作用,结果表明,上述ＲＢＣ和ＣＤ５８对ＰＨＡ－Ｐ诱导的猪ＰＢＭＣ分泌ＩＬ－２具有显著或极显著的协同作用（Ｐ＜０．０５或Ｐ＜０．０１）,单独作用也可引起猪ＲＢＭＣ分泌ＩＬ－２,其协同或单独诱导作用均具有剂量依赖性。同时证明来自猪和绵羊的ＲＢＣ及ＣＤ５８的上述作用间无显著差异（Ｐ＞０．０５）。提出ＣＤ５８对猪ＰＢＭＣ的活化与特异性活化机制相似,依赖于ＩＬ－２基因点的激活。     

猪LPL基因多态性及其部分DNA片段的测序

脂蛋白脂肪酶是影响动物脂肪沉积的关键酶之一。本利用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ法,对猪的ＬＰＬ基因进行了多态性分析,发现其５端区域存在ＤＮＡ多态性。脂肪型猪种梅山猪和通城猪表现出３种等位基因型（ＡＡ、ＡＢ、ＢＢ）,其等位基因Ａ和Ｂ的频率分别为０．７６、０．２４和０．７７、０．２３;而瘦肉型猪种长白猪和大白猪表现出另外不同的３种等侠基因型（ＣＣ、ＣＤ、ＤＤ）,其等位基因Ｃ和Ｄ的频率分别为０．７６、０．２４和７