精原干细胞更新分化的影响因素*

 精原干细胞可以体外培养、冷冻保存、遗传操作及移植，因而在医学、生物学及动物科学方面均有广泛应用前景。根据现有资料阐述一些因素，包括c-Kit受体及其配体SCF、白血病抑制因子（LIF）、维生素A（V_A）、表皮生长因子（EGF）、胶质细胞源神经营养因子（GDNF）、激素和温度，对精原干细胞更新分化的影响。     

成年小鼠雄性生殖细胞的冷冻保存

在含10％小牛血清（NBS）的DMEM培养基中，分别各添加5％，10％，15％，20％和25％的二甲基亚砜（DMSO）,丙二醇（PG），乙二醇（EG）和甘油（G），对成年小鼠睾丸生殖细胞冷冻保存；复苏后台盼蓝染色测定细胞复苏率。结果显示，5％－25％DMSO冻存液组的细胞复苏率分别为88.5%,88.0%,65.6%及51.3%;5%-25%PG冻存液组的细胞复苏率分别为87.2%,86.4%,79.0%,73.4%及40.1%.;5%-25%EG冻存液组的细胞复苏率分别为6.6%,80.9%,60.8%,51.3%及30.0%;5%-25%G冻存液组的细胞复苏率分别为86．5％，86．3％，65．3％，36．0％及31．4％。其中各抗冻剂5％和10％组的细胞复苏率最高，与15％组相比均存在显著或极显著差异。4种抗冻剂的最高细胞复苏率之间无显著差异。DMSO，PG，EG和G分别冷冻保存成年小鼠睾丸生殖细胞对的最小损失率分别为4．8％，6．1％，6．7％，6．8％。结果表明，采用慢速冷冻时，DMSO，PG，EG及G均适宜用作成年小鼠睾丸生殖细胞的抗冷冻剂，最佳使用含量均为5％－10％。成年小鼠睾丸生殖细胞分别在含5％－10％的DMSO，PG，EG和G的DMEM（含10％NBS）冻存液中，2步慢速降温，液氮储存，37℃水浴复苏，是一种具有较高复苏率的冷冻保存方法。     

哺乳类精原干细胞体外培养影响因素

精原干细胞为体内天然干细胞，如能体外培养建系或建立其长期培养系统，将会极大地促进精原干细胞移植，转基因等技术的实际应用，也会给体外研究细胞的发育分化提供很好的材料，影响精原干细胞外存活，增殖的因素很多，该文主要综述了基本培养基的选择、血清和添加剂，激素和维生素的应用及SCF、LIF、bFGF等生长因子的作用等，以期促进精原干细胞的研究。     

山羊子宫内肽能神经分布及妊娠时的变化

采用免疫组化方法，研究了山羊子宫内含P物质（SP）和含血管活性肠肽（VIP）神经的分布。结果，妊娠及未妊娠山羊子宫颈内有粗细不等的神经束行经于外膜和肌层中，神经分支形成丛状分布于血管壁，子宫颈部未见SP神经元胞体及VIP神经元胞体；未妊娠山羊子宫角内SP神经和VIP神经均呈丛状围绕血管并分布于血管壁；妊娠中期的孕角和非孕角均有胎盘形成，除胎盘内无神经分布外，SP神经及VIP神经同样分支形成丛状分布于血管壁。结果提示，山羊子宫内SP神经和VIP神经主要支配子宫内血管，妊娠时除胎盘内无神经分布外，SP神经及VIP神经的分布无明显变化。     

仔猪小肠肌间神经丛NDP阳性神经元形态的定量研究

采用小肠铺片NADPH黄递酶组化染色和细胞影像分析的方法对0、5、28日龄的仔猪小肠肌间神经丛神经元群体的形态参数进行定量测定。结果表明:随日龄增长,小肠肌间神经元胞体面积增大,出生后的头几天尤为明显。NDP阳性肌间神经元胞核面积平均值与胞体面积平均值呈正相关。胞体面积平均值在0日龄为234.98±23.48μm2,5日龄为346.30±33.07μm2,28日龄为364.17μm2;胞核面积平均值在0日龄为69.85±6.27μm2,5日龄为88.25±2.39μm2,28日龄为84.15μm2。核质比随日龄呈下降趋势,核质比在0日龄为0.298±0.003,5日龄为0.257±0.027,28日龄为0.231。上述测量值不仅表现出日龄差异,而且在同一日龄小肠的前后段亦有所不同。NDP阳性神经元胞体和胞核大小都以十二指肠最大,空肠前段次之,回肠最小。0日龄仔猪神经元胞体面积分布在100～300μm2之间的占70.79%,5日龄和28日龄胞体面积分布在100～400μm2之间的分别占64.81%和63.22%。肌间神经丛NDP阳性神经元主要为Dogiel 型神经元。     

哺乳动物精原干细胞研究进展

自Brinster等人异体（种）移植小鼠和大鼠精原干细胞取得成功以来，精原干细胞已成为干细胞领域内的一个新的研究热点，由于它在人类医学，畜牧业，濒危动物保护及转基因动物生产等方面的潜在用途，精原干细胞很可能成为一种极为有用的生物工具，本文不其生物学特性，分离、鉴定及应用前景等综述如下。     

家鸡感染乔治赖利绦虫

家鸡感染乔治赖利绦虫■李树荣罗富成李莲军（云南省农业大学动科院６５０２０１）■李东旭（云南省泸西县畜牧兽医站６５２４００）１９９６年１月，我们在由泸西县送检的一当地家鸡病料中，获得一条长３７０毫米，宽８．０毫米的大型绦虫，经制片观察。头节长０．２４５...     

水牛PGC和前精原细胞的体外培养

分别对取自50~95日龄水牛胎儿的原生殖细胞和前精原细胞进行体外培养,观察其生物学行为,并检测其碱性磷酸酶(AP)活性和Oct-4蛋白特性,探讨利用这些生殖细胞建立干细胞系的可行性和检测方法。结果表明水牛原生殖细胞及前精原细胞分别在体外培养时,均能形成细胞克隆;克隆与周围细胞分界明显,但克隆中细胞相互间界限不清;部分克隆有分隔现象,形如多个克隆共同组成一个大克隆;细胞克隆均至少能培养4代以上;原生殖细胞和前精原细胞及其来源的细胞克隆均呈AP阴性和Oct-4蛋白阴性,其中部分克隆表现为AP假阳性。研究结果显示水牛原生殖细胞和前精原细胞均可用于建立干细胞系;体外培养时,AP活性和Oct-4蛋白不适宜用来检测这些细胞及其来源的细胞克隆。     

从鸡血中快速提取高质量基因组DNA方法的研究

介绍了一种经改进建立的从鸡血中快速提取高纯度基因组DNA的方法。该方法提取DNA耗时较短,只需2.5~3 h即可拿到DNA样品。提取的DNA样品经紫外分光光度计检测,DNA样品的A260/A280达1.782 2±0.009 3;经琼脂糖凝胶电泳检测,DNA样品的带型清晰、整齐,无拖尾现象;微卫星PCR扩增效果理想。结果表明,该方法所提DNA纯度较高,质量好,分子片段完整,完全能满足分子生物学实验的要求。     

鱼类免疫系统的研究进展

免疫系统是指机体识别自身和非自身物质以抵御病害生物入侵和感染的一个防御系统,它的主要功能是防御和维护自身的稳定。鱼类的免疫系统主要包括：免疫组织和器官、细胞免疫、体液免疫因子三大类。本文就鱼类免疫系统的三个方面及与免疫系统有关的黏膜免疫、营养免疫等方面作一概述。