双T-DNA表达载体转化大豆的研究

利用含有筛选标记基因和目的基因△6-脂肪酸脱氢酶基因的双T-DNA共转化表达载体pLIN61,经农杆菌EHA101介导,采用子叶节转化法转化大豆,使用除草剂Glufosinate作为筛选剂,获得了一批携带有玻璃苣△6-脂肪酸脱氢酶基因的转基因大豆,转化效率为2.0%,共转化频率及实际转化率分别为56.25%、1.12%.PCR检测和Southern杂交结果证明,玻璃苣D6D已经整合到大豆的基因组上.RT-PCR检测结果显示,玻璃苣△6-脂肪酸脱氢酶基因在转基因大豆的转录水平上得到了表达.     

宏基因组漆酶基因片段的克隆与分析

漆酶(Laccase,EC1.10.3.2)是一种含铜的多酚氧化酶,能够有效降解木质素物质,在环境碳素循环中占有重要的地位。近年来以环境宏基因组DNA为模板,设计简并引物及PCR扩增方法研究环境微生物基因来监测环境微生物已成为土壤微生物多样性研究的新方法[1]。如Luis等[2]通过对森林土壤微生物中漆酶基因的研究来监测该地区的微生物多样性;Lyons等[3]通过对高盐度沼泽地土壤微生物中漆酶基因的研究来监测该地区的微生物多样性;张桂敏等[4]通过对土壤微生物中木聚糖酶基因的研究来监测该地区的微生物多样性。但是,国内尚无研究环境微生物漆酶基因多样性及监测环境微生物功能的报道。同时漆酶在化工染料     

燕窝蛋白质样品制备方法的比较及其双向电泳分析

燕窝水提及丙酮沉淀蛋白质经液相等电聚焦电泳纯化后,再经双向电泳分离获得了质量较佳的2-DE图谱,由此可见液相等电聚焦电泳是对燕窝蛋白质进行纯化的有效手段。对纯化后的2个白燕窝和1个血燕窝水提及丙酮沉淀蛋白质进行了双向电泳分析,结果显示两种方法制备蛋白质获得的2-DE图谱非常相似。燕窝水提蛋白质经丙酮沉淀制备样品时间较透析、冻干所需的时间短,这对于成分更为复杂且蛋白质提取率较低的血燕窝则更为适用。     

草菇gpd启动子的克隆及表达载体的构建

从草菇基因组中克隆内源强启动子,为草菇基因工程育种提供启动子元件材料。［方法］采用PCR技术从草菇基因组DNA中克隆gpd启动子片段,利用生物信息学手段对其序列特征和调控元件进行分析,并构建表达载体。［结果］从草菇基因组中克隆出2条特异gpd启动子片段,大小分别为1056和614bp;成功构建了分别以这2条启动子片段驱动的、以gfp基因为报告基因的2个表达载体。［结论］该研究为进一步利用基因工程手段培育品质优良的草菇新菌株奠定了基础。     

青花菜β-1,4-木糖基转移酶IRX9H基因的克隆及在模拟酸雨胁迫下的表达分析

由糖基转移酶催化产生的次生代谢物质对植物抵御和适应环境的变化起着重要作用。为探讨青花菜在酸雨胁迫下糖基转移酶的表达变化,对青花菜β-1,4-木糖基转移酶IRX9H基因的cDNA序列全长进行克隆,并对其进行生物信息学和表达分析。结果表明:青花菜β-1,4-木糖基转移酶IRX9H基因的cDNA全长为1 550 bp,开放阅读框为1 155 bp,编码384个氨基酸,推测分子式为C1964H3044N558O567S11,分子量为43 897.8,没有信号肽。系统进化树分析结果表明,该青花菜基因与拟南芥聚类关系最近。利用实时荧光定量PCR研究模拟酸雨胁迫下β-1,4-木糖基转移酶IRX9H基因的表达量,结果显示该基因的表达量在模拟酸雨胁迫初期显著增大,随着时间的延长,又开始下降,这表明其在青花菜抗酸雨胁迫中发挥了作用。     

福建沿海雨养型旱坡地新植甘蔗产量结构分析

分析了沿海雨养型旱坡地新植甘蔗的产量结构，结果表明：在构成蔗茎产量的四个因素中，茎长，有效茎数，单茎重与产量之间有显著或极显著的正相关，而茎径与蔗茎产量之间的相关未达到显著水平。在产量相对较低的情况下，有效茎数与蔗茎产量的关系的密切程度较高。通径分析结果表明：单茎重与有效茎数对蔗茎产量的直接效应，中下产量水平时以有效茎数为大，中上产量水平时以单茎数对茎重为大。在径长，茎径，有效茎数三者对蔗茎产量的     

基因枪法转化甘蔗胚性愈伤组织获得转基因甘蔗白化苗

采用ＪＱ－７００型高速基因枪，以ＮＰＴⅡ基因为选择标记基因，以抗菌肽Ｄ基因为目的基因，设２５ｍｍ和３５ｍｍ２种火药套管，长短２种容器室，一次和两次轰击共８种处理组合，对甘蔗胚性愈伤组织进行轰击转化。结果２５ｍｍ火药套管·短容器室·二次轰击和３５ｍｍ火药套管·短容器室·二次轰击的２种处理组合，胚性愈伤组织经过连续３代筛选后在选择分化培养基中共长出１２株转基因甘蔗白化苗。     

儿童食用菌功能饮料的研究

以金针菇FLA1(白色菌株)、金针菇FLA2(黄色菌株)、香菇(LEN1)、猴头菇(HER1)为发酵菌株,通过正交试验,确定四种菌株发酵液混合后的最佳营养成分含量,优化了食用菌功能饮料的制作工艺,并对成品进行了感官评定.结果表明,食用菌功能饮料的四种菌株发酵液的最佳配比为:FLA1∶FLA2∶LEN1∶HER1=1∶1∶2∶1,混合液中的辅料添加量为白砂糖6.5％、柠檬酸4.0％、草莓香精0.25％,所获得的食用菌功能饮料糖度为12°Bx、酸度为3°,色、香、味俱全,适合儿童口味.     

带鱼肠道中芽孢杆菌的分离鉴定及其发酵液抗菌性质研究

从带鱼肠道中分离筛选到1株具有广谱抗菌活性的菌株JFL15,其发酵液对嗜水气单胞菌、美人鱼发光杆菌、哈维氏弧菌、溶藻弧菌、大肠杆菌、迟钝爱德华氏菌、铜绿假单胞菌、副溶血弧菌、创伤弧菌、查氏弧菌均有较强抑菌作用。通过形态特征、生理生化特征、16S rDNA序列分析以及系统发育进化分析,菌株JFL15与暹罗芽孢杆菌的同源性最高,达98.05%,初步鉴定为暹罗芽孢杆菌。对暹罗芽孢杆菌JFL15的发酵液进行研究发现,暹罗芽孢杆菌JFL15的发酵液对酶、温度、酸碱度和紫外线均不敏感,且发酵产物储存较长时间后仍具有较强抑菌活性。     

基因型和聚乙二醇预处理对甘蔗胚性愈伤组织原生质体分离的影响

对福农８６／１７、桂糖１１号和粤糖５７／４２３等３个甘蔗基因型的胚性愈伤组织进行了原生质体分离，研究了聚乙二醇（ＰＥＧ）预处理对福农８６／１７胚性愈伤组织原生质体分离的影响．结果表明，桂糖１１号的原生质体活力较高，但得率较低，福农８６／１７的原生质体活力和得率都较低，粤糖５７／４２３的原生质体得率较高，但活力也较低．ＰＥＧ预处理可以提高胚性愈伤组织分离的原生质体活力．一定质量浓度和一定时间的ＰＥＧ预处理能够成倍地提高原生质体的得率，以质量浓度为０．５０ｍｇ·Ｌ－１的ＰＥＧ预处理１５ｍｉｎ，甘蔗福农８６／１７每克胚性愈伤组织可分离获得１×１０６个有活力的原生质体