黄芩甙对断奶仔猪生产性能和免疫机能的影响研究

将96头杜×长×大三元杂交断奶仔猪随机分为4组,每组设3个重复。第1组为对照组,饲喂基础日粮;第2组在基础日粮中添加0.006%的喹乙醇;第3组在基础日粮中添加0.05%的黄芩甙;第4组在基础日粮中添加0.006%的喹乙醇和0.05%的黄芩甙,探讨黄芩甙与仔猪免疫机能的关系。结果表明:第2、3、4组血清中总蛋白I、gG水平与第1组相比有升高的趋势(P>0.05);第2、4组的白球比值显著低于第1组(P<0.05),3组白球比值也低于1组(P>0.05);第2、3、4组T3、C4、GH水平显著高于第1组(P<0.05),而C3、T4水平有升高的趋势,但差异不显著(P>0.05),皮质醇含量显著低于第1组(P<0.05)。试验结果表明,在早期断奶仔猪日粮中添加黄芩甙具有改善免疫机能的作用,有助于提高仔猪抗病力。     

刚地弓形虫GRA3基因的克隆与表达

采用PCR方法扩增弓形虫GRA3基因,将扩增产物与pMD18-T Simple载体连接,重组质粒经PCR、双酶切鉴定后测序;构建pGEX-4T-1／GRA3表达载体,经IPTG诱导表达后,进行SDS-PAGE、Western blot分析。结果显示,克隆的GRA3基因片段长687bp,含有1个669bp的开放阅读框,编码222个氨基酸,与GenBank中UK株（AF414079）的同源性为99．8％;表达的融合蛋白为50Ku,能被弓形虫阳性血清识别;表明该融合蛋白具有较好的免疫反应活性。     

伪狂犬病病毒Ea株UL18基因的克隆、序列分析及表达

本研究以伪狂犬病病毒Ea株基因组DNA为模板,PCR扩增含ULl8全长基因的片段并克隆至pMDl8-T载体,采用双脱氧末端终止法测序.序列分析显示ULl8全长891 bp,可编码297个氨基酸.将该基因亚克隆到原核表达栽体pQE.82L的6×His标签下游,获得原核表达质粒pQE-UL18,转化大肠杆菌DH5α,经IPTG诱导在大肠杆菌中成功表达,表达的融合蛋白6 × His-UL18的分子量约为33 ku.Western blot证实,表达的融合蛋白能与抗6×His的单抗发生特异性反应.进一步将UL18基因插入真核表达栽体pEGFP-N1中EGFP基因的5'端,获得与EGFP融合表达的真核表达质粒pEGFP-UL18,转染HeLa细胞,通过激光共聚焦显微镜观察发现,转染后24 h融合蛋白EGFP-UL18主要定位于细胞浆,仅有部分定位于细胞核,而48 h时则主要定位在细胞核.但对照载体pEGFP.N1转染细胞的荧光一直呈弥散型分布于整个细胞中.     

畜禽饲粮豆粕减量营养调控技术研究进展

XUE Junjing;LI Siyuan;FANG Rejun(College of Animal Science and Technology,Hunan Agricultural University,Changsha 410128,China;Hunan Co-Innovation Center of Animal Production Safety,Changsha 410128,China)     

饲粮蛋白质水平对空怀期云南半细毛羊氮沉积和养分排放的影响

本试验旨在研究饲粮蛋白质水平对空怀期云南半细毛羊氮沉积和养分排放的影响,以期为空怀期云南半细毛羊饲粮配比和减少环境负荷研究提供理论参考。试验选用50只体况良好、体重相近、38月龄的空怀期云南半细毛羊,随机分成5个组(每组10只),分别饲喂蛋白质水平为7.60%(组1)、9.49%(组2)、11.29%(组3)、11.56%(组4)和14.96%(组5)的饲粮,饲粮其他营养水平保持一致。试验羊进行19d的饲养试验,其中预试期14d,正试期5d。正试期从每组选择5只试验羊进行消化代谢试验,试验羊在代谢笼中单笼饲养,采用全收粪尿法连续收集5d粪便,并采集饲粮样品。结果表明:1)饲粮蛋白质水平对空怀期云南半细毛羊的干物质采食量和粪干物质排放量无显著影响(P>0.05)。2)随着饲粮蛋白质水平的升高,氮摄入量呈显著或极显著增加(P<0.05或P<0.01);组3的氮沉积率极显著高于组1(P<0.01),其他组间差异不显著(P>0.05)。3)粪氮排放量随饲粮蛋白质水平的升高逐渐增加,组2与组1、组3差异不显著(P>0.05),其他组间差异极显著(P<0.01);粪钙排放量以组3最低(5.04g/d),且极显著低于组5(P<0.01);粪磷排放量随饲粮蛋白质水平的升高逐渐增加,组1、组2、组3极显著低于组5(P<0.01),组4显著低于组5(P<0.05)。4)尿氮排放量随着饲粮蛋白质水平的升高逐渐增加,组2与组1、组3差异不显著(P>0.05),其他组间差异极显著(P<0.01);尿钙排放量以组3最低,为1.18g/d,比组1、组5分别降低0.53和0.78g/d;尿磷排放量组1显著低于组5(P<0.05),其他各组间差异不显著(P>0.05)。5)粪尿氮排放总量组5极显著高于其他组(P<0.01),粪尿钙排放总量组3极显著低于其他组(P<0.01),粪尿磷排放总量组1、组2极显著低于组5(P<0.01)。6)粪氮占比为72.44%~42.06%,随着饲粮蛋白质水平的升高逐渐降低,尿氮占比为27.56%~57.94%,随着饲粮蛋白质水平的升高逐渐升高;粪、尿钙和磷占比各组间差异不显著(P>0.05)。综合各项指标,在本试验条件下,当饲粮蛋白质水平为11.29%时,空怀期云南半细毛羊的氮沉积最佳,粪尿钙排放总量最低;饲粮蛋白质水平在一定范围(7.06%~11.56%)时对空怀期云南半细毛羊粪尿磷排放总量无显著影响;空怀期云南半细毛羊对钙、磷的排放以从粪中排放为主,多余的氮则主要从尿中以尿氮的形式排出。     

甲型肝炎病毒免疫控制研究进展

对甲型肝炎病毒(HAV)发病机理和免疫调控的研究近年来重新受到关注。在发展中国家感染者的平均年龄增加,导致机制尚不明确的更严重的肝炎。而且,从HAV和丙型肝炎病毒(HCV)的免疫对比来看,这两种正链RNA病毒感染结果完全不同。HCV比HAV复制效率低,导致HCV蛋白表达量低,因此对IFN信号传导的拮抗作用较低。有研究发现循环的HAV病毒颗粒隐藏在膜里,导致先天免疫和抗体介导中和作用的激活。同时还考虑到CD4^+辅助T细胞对CD8^+细胞毒性T细胞对抗病毒免疫和肝损伤的作用,提出了一种非细胞毒性的HAV感染免疫控制模型。     

病毒感染的抗体依赖性增强作用及其机制

病毒感染都是从黏附于细胞表面开始的,黏附是通过病毒表面蛋白与靶细胞上特异性受体和配体分子的相互作用来完成的.病毒表面蛋白的特异性抗体常常可以阻抑这一步骤,将病毒"中和",使其失去感染细胞的能力.     

牛传染性鼻气管炎病毒重组gD蛋白间接ELISA方法的建立及应用

用大肠杆菌表达的牛传染性鼻气管炎病毒（IBRV）重组gD蛋白纯化后作为包被抗原,建立了检测牛传染性鼻气管炎病毒抗体的间接ELISA方法。交叉反应试验表明,该重组抗原与其它常见的5种牛病阳性血清不发生交叉反应;阻断反应试验表明,IBRV病毒悬液能在很大程度上阻断重组抗原与阳性血清的反应,而对阴性血清没有明显影响。在重复性试验中,批内重复的变异系数小于5%,批间重复的变异系数小于15%。与中和试验相比较,符合率、敏感性和特异性分别为84.1%、85.0%和83.4%。应用该诊断方法和本实验室已建立的以IBRV全病毒作为包被抗原的ELISA诊断方法,同时检测了采集于国内11个省份的2012份血清样本,IBRVgD-ELISA检测的平均阳性率为46.0%（926/2012）,而且相对于IBRV全病毒ELISA诊断方法的符合率、敏感性和特异性分别为91.9%、94.2%和90.2%。本研究所建立的IBRVgD-ELISA具有良好的敏感性和特异性,为国内IBR流行病学调查提供了一种快速、简便的血清学诊断方法。     

肉牛屠宰线不同工序中沙门菌和大肠杆菌污染调查及分离鉴定

为了确定肉牛屠宰线沙门菌和大肠杆菌的污染情况,选取山西省2家屠宰厂(A、B),分别在屠宰线7道不同工序和屠宰刀具上进行采样,采用传统方法进行沙门菌和大肠杆菌的分离、培养,利用生化鉴定法和16SrDNA序列分析法对分离菌株进行鉴定。结果表明:A厂所有工序均未发现沙门菌和大肠杆菌污染情况;B厂所有工序均未检测出沙门菌,但在宰前皮毛和粪便中检测到8株疑似大肠杆菌,经生化鉴定法和16SrDNA序列分析法全部确定为大肠杆菌。综上表明,选取的2个肉牛屠宰加工企业屠宰线相关工序消毒、减菌措施到位,但应注重宰前动物的规范化管理,以减少宰前污染。     

影响奶牛乳尿素氮的主要因素研究进展

牛奶中乳尿素氮(MUN)作为反映奶牛蛋白质营养状态和评价蛋白质利用效率的生物学指标已经被国内外研究人员广泛认可。综述了乳尿素氮的定义、检测方法、产生机制,以及影响乳尿素氮的营养和非营养性因素,以期为奶牛养殖生产提供参考。