| 伪狂犬病病毒Ea株UL18基因的克隆、序列分析及表达 |
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| 引用本文： | 薛念波,肖少波,江云波,常天明,刘曼莉,赵骞,罗锐,陈焕春,方六荣.伪狂犬病病毒Ea株UL18基因的克隆、序列分析及表达[J].中国预防兽医学报,2008,30(4):255-259. |
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| 作者姓名： | 薛念波 肖少波 江云波 常天明 刘曼莉 赵骞 罗锐 陈焕春 方六荣 |
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| 作者单位： | 华中农业大学动物医学学院动物病毒实验室,湖北武汉,430070;华中农业大学农业微生物学国家重点实验室,湖北武汉,430070 |
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| 摘 要： | 本研究以伪狂犬病病毒Ea株基因组DNA为模板,PCR扩增含ULl8全长基因的片段并克隆至pMDl8-T载体,采用双脱氧末端终止法测序.序列分析显示ULl8全长891 bp,可编码297个氨基酸.将该基因亚克隆到原核表达栽体pQE.82L的6×His标签下游,获得原核表达质粒pQE-UL18,转化大肠杆菌DH5α,经IPTG诱导在大肠杆菌中成功表达,表达的融合蛋白6 × His-UL18的分子量约为33 ku.Western blot证实,表达的融合蛋白能与抗6×His的单抗发生特异性反应.进一步将UL18基因插入真核表达栽体pEGFP-N1中EGFP基因的5'端,获得与EGFP融合表达的真核表达质粒pEGFP-UL18,转染HeLa细胞,通过激光共聚焦显微镜观察发现,转染后24 h融合蛋白EGFP-UL18主要定位于细胞浆,仅有部分定位于细胞核,而48 h时则主要定位在细胞核.但对照载体pEGFP.N1转染细胞的荧光一直呈弥散型分布于整个细胞中.
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| 关 键 词： | 伪狂犬病病毒 UL18基因 序列分析 表达 伪狂犬病 病毒 基因插入 克隆 序列分析 真核表达质粒 strain pseudorabies virus gene 分布 荧光 转染细胞 细胞核 细胞浆 定位 发现 共聚焦显微镜 激光 HeLa 融合表达 |
| 文章编号： | 1008-0589(2008)04-0255-05 |
| 修稿时间： | 2007年8月23日 |
Expression of UL18 gene of pseudorabies virus strain Ea |
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| XUE Nian-bo,XIAO Shao-bo,JIANG Yun-bo,CHANG Tian-ming,LIU Man-li,ZHAO Qian,LUO Rui,CHEN Huan-chun,FANG Liu-rong.Expression of UL18 gene of pseudorabies virus strain Ea[J].Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine,2008,30(4):255-259. |
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| Authors: | XUE Nian-bo XIAO Shao-bo JIANG Yun-bo CHANG Tian-ming LIU Man-li ZHAO Qian LUO Rui CHEN Huan-chun FANG Liu-rong |
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