Flag-ALD融合载体构建及蛋白表达

维氏气单胞菌（Aeromonas veronii）是感染鱼类的最常见致病菌之一，为了解维氏气单胞菌中丙氨酸脱氢酶（alanine dehydrogenase，ALD，EC 1.4.1.1）的调控功能，笔者通过分子克隆获得 Flag-ALD 融合表达载体，并在大肠杆菌中大量表达该蛋白。即以维氏气单胞菌C4基因组DNA为模板，采用PCR方法扩增获得N端带有Flag标签的ald基因，将带有标签的目的基因与原核表达载体pACYCDuet连接，并将重组质粒pACYCDuet-Flag-ald 转化到大肠杆菌（E.coli）BL21中。添加异丙基?β?D?1?硫代半乳糖吡喃糖苷（Isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside，IPTG）诱导重组蛋白大量表达。SDS-PAGE分离与Western blot结果表明，来源于维氏气单胞菌的Flag-ALD重组蛋白在E.coli中以可溶性形式成功表达。本实验构建的Flag标记靶标蛋白可为研究丙氨酸脱氢酶在维氏气单胞菌中的功能以及在生物抑菌剂方面的应用提供技术支持。     

轮状病毒感染肠上皮细胞激活宿主先天免疫研究进展

轮状病毒(RV)是引起婴幼儿、幼畜禽急性肠胃炎的人畜共患病原,常与其他病原体混合感染,多以呕吐,严重水样腹泻,脱水为临床症状,感染后具有较高病死率,对人类公共卫生以及养殖业造成极大危害。RV病原相关分子模式(PAMP)可被肠上皮细胞(IECs)中一组可遗传的模式识别受体(PRR)识别,通过IECs、先天免疫细胞与RV互作,激活细胞内信号级联,从而迅速诱导炎症和多种抗病毒基因表达。论文就轮状病毒特性、肠道先天免疫等方面进行综述,探讨RV感染宿主IECs后诱导不同抗病毒信号通路,为利用先天免疫途径预防轮状病毒感染提供了一定的参考。     

基因枪法转化小麦幼胚瞬时表达

自Vasil et al．（1996）利用基因枪将获得小麦对除草剂Basta具有抗性的再生植株以来，基因枪介导的小麦遗传转化研究发展很快（Altpeter et al．，1996）。在小麦基因枪转化中，优化基因枪转化因素，提高转化效率仍然是基因转化的关键问题。本实验研究了不同金粉用量、质粒DNA浓度及轰击枪数对小麦幼胚瞬时表达的影响，通过GUS染色和细胞压片，分析了gus基因的瞬间表达。     

企业专利信息的利用及其检索

本文论述了专利信息的内涵、专利信息的作用及专利信息的分析工具,介绍了专利信息检索的途径。     

甲型肝炎病毒免疫控制研究进展

对甲型肝炎病毒(HAV)发病机理和免疫调控的研究近年来重新受到关注。在发展中国家感染者的平均年龄增加,导致机制尚不明确的更严重的肝炎。而且,从HAV和丙型肝炎病毒(HCV)的免疫对比来看,这两种正链RNA病毒感染结果完全不同。HCV比HAV复制效率低,导致HCV蛋白表达量低,因此对IFN信号传导的拮抗作用较低。有研究发现循环的HAV病毒颗粒隐藏在膜里,导致先天免疫和抗体介导中和作用的激活。同时还考虑到CD4^+辅助T细胞对CD8^+细胞毒性T细胞对抗病毒免疫和肝损伤的作用,提出了一种非细胞毒性的HAV感染免疫控制模型。     

无原花色素大麦突变体筛选研究初报

 用10#+(-3)mol/L叠氮化钠（NaN#-3）作为诱变剂处理大麦种子，收取M#-2世代籽粒用香草醛-盐酸试剂进行半粒分析，含原花色素者剖面出现红色反应，缺失者无反应，以此筛选获得一系列原花色素缺失的突变体。对M#-3和M#-4世代的分析结果表明，突变体的原花色素缺失性状是稳定的，但大多数突变体的抗逆性较弱，早衰较严重，使籽粒灌浆受到影响，粒重和饱满度下降，需要进一步改良。但也有个别突变体如甘ant90-5等具有较好的综合性状，接近对照品种。     

添加葡萄糖对绿狐尾藻与麦麸混合青贮品质的影响

以鲜质量比7∶3的绿狐尾藻和麦麸为原料混合青贮,分别添加0%、2%、4%、6%的葡萄糖,固定添加植物乳杆菌,测定混合青贮饲料的发酵品质、营养品质及有氧稳定性。结果表明：添加葡萄糖能显著(P<0.05)降低混合青贮饲料的pH值和氨态氮与总氮质量分数之比,显著(P<0.05)提高乳酸质量分数,降低丁酸质量分数,改善青贮发酵品质;显著(P<0.05)降低粗蛋白和粗纤维质量分数,且显著(P<0.05)提高相对饲用价值;当葡萄糖添加量为4%时显著(P<0.05)降低中性洗涤纤维和酸性洗涤纤维质量分数;添加0%、2%、4%、6%葡萄糖处理的有氧稳定性分别为>360、226、>360、62 h。综合评价结果显示,鲜质量比7∶3的绿狐尾藻和麦麸混合青贮中添加2%葡萄糖,混合青贮有更好的发酵品质和营养品质及有氧稳定性。     

小麦幼胚基因枪转化的影响因素研究

为了明确不同因素对小麦基因枪法转化效率的影响。用PDS-1000／He型基因棺将抑制叶片衰老基因Psag12-ipt转入小麦幼胚细胞，通过对报告基因GUS瞬时表达的检测，研究了金粉用量、质粒DNA用量及轰击次数对转化率的影响。结果表明，金粉用量在100-400μg范围内，时幼胚瞬时表达率影响不大，幼胚瞬时表达率在73．7%～85．0％之间，但随金粉用量的增加，细胞瞬时表迭率明显提高；质粒DNA用量以每枪2．0μg为最佳；轰击2枪幼胚和细胞瞬时表达率明显高于轰击1枪。     

DNP处理对巨峰葡萄浆果贮藏品质的影响

为了研究不同浓度解偶联剂2,4-二硝基苯酚(DNP)处理对巨峰葡萄浆果贮藏品质的影响,分别用0.05 mmol/L、0.10 mmol/L和0.20 mmol/L DNP浸泡葡萄果实30 min,以蒸馏水处理为对照,果实晾干后用0.015mm厚的聚乙烯薄膜袋密封包装,在4℃下贮藏。定期测定贮藏期间果实的硬度、可溶性固形物(TSS)含量、呼吸速率、丙二醛(MDA)含量、抗坏血酸过氧化物酶(APX)活性和抗坏血酸(AsA)含量的变化。结果表明:适宜浓度的DNP处理能够显著抑制葡萄果实贮藏过程中呼吸强度的上升;显著地抑制果实组织中MDA含量的增加;显著地抑制果实TSS含量的下降;延缓果肉中AsA含量的下降,抑制APX活性的降低。DNP处理对葡萄果实具有较好的保鲜效果,能维持较好的贮藏品质。