鸭肉中组织蛋白酶B的特性研究

从樱桃谷肉鸭腿肌中提取组织蛋白酶B,研究了pH值、温度、蛋白酶激活剂和抑制剂对其酶活的影响。结果表明:组织蛋白酶B的最适反应pH值为5.5,最适反应温度为40℃,在30℃下和pH 5.0～5.5范围内有较好的稳定性。激活剂二硫苏糖醇(DTT)和L-半胱氨酸(L-cys-teine)对组织蛋白酶B有一定的激活作用;抑制剂E-64对组织蛋白酶B有明显抑制作用;金属蛋白酶抑制剂已二胺四乙酸(EDTA)和丝氨酸蛋白酶抑制剂苯甲基磺酸氟(PMSF)对组织蛋白酶B无抑制作用。     

前组织蛋白酶原K调节骨吸收的研究进展

前组织蛋白酶原K(cathepsin K)属于溶酶体半胱氨酸蛋白酶中的番木瓜蛋白酶超家族成员,在骨吸收过程中起到相当重要的作用.它可以降解包括I型胶原蛋白、骨桥蛋白、骨结合素等在内的骨基质蛋白.细胞核因子κB受体活化因子配基(RAN-KL)等一系列因子通过不同的途径调节前组织蛋白酶原K的表达.本文将对前组织蛋白酶原K的结构特征、在骨吸收过程中所起的作用、基因表达调控及相关疾病做一综述.     

家蚕半胱氨酸蛋白酶的研究进展

家蚕(Bombyx mori)作为鳞翅目模式昆虫,较早开展了组织蛋白酶研究,其中以对家蚕半胱氨酸蛋白酶(cysteine protease)的研究居多。半胱氨酸蛋白酶参与了家蚕生长发育、蜕皮变态和免疫调节等生命活动过程。本文重点综述近几年国内外学者在家蚕半胱氨酸蛋白酶分类、基因表达特征、生物学功能研究方面取得的新进展,并简要阐述对家蚕半胱氨酸蛋白酶研究的主要方面。     

跨膜丝氨酸蛋白酶-4对2009甲型H1N1流感病毒HA的切割及其融合活性研究

流感病毒血凝素(HA)被宿主蛋白酶切割活化是流感病毒复制和扩散的关键步骤.2009甲型H1N1流感病毒HA的裂解位点为单碱性氨基酸,只能被宿主特定组织部位表达的某些蛋白酶所切割活化.本研究构建了主要存在于人呼吸道和肺脏的跨膜丝氨酸蛋白酶4 (TMPRSS4)的真核表达重组质粒pCA-TMPRSS4-Flag与表达2009甲型H1N1流感病毒中国四川分离株HA的真核重组表达质粒pCA-SCHA共转染293T细胞,利用westernblot证明2009甲型H1N1流感病毒的HA蛋白能够被TMPRSS4切割;通过激光共聚焦确定TMPRSS4和HA在293T细胞膜上共定位;并进一步通过细胞融合试验证明经正确切割的HA具有在低pH条件下介导细胞膜发生融合的生物学功能.本实验为研究自然感染情况下参与活化流感病毒的宿主胰蛋白酶提供了实验依据.     

不同猪种腿肌中Cst B基因的表达研究

为了研究半胱氨酸蛋白酶抑制剂B(Cst B)基因在大白猪、野猪及野家杂交猪腿肌组织中的表达情况,试验采用RT-PCR方法对试验猪只进行检测。结果表明:在1日龄大白猪、360日龄野猪和各日龄的野家杂交猪中腿肌组织Cst B基因均有较高表达,总体上来说野猪和野家杂交猪腿肌组织中Cst B基因的表达高于纯种大白猪。     

饲料中蛋白质与维生素B_6水平及其互作对乌鳢蛋白质代谢的影响

以乌鳢为研究对象,采用3×3双因子试验设计,在3个蛋白质水平(39.12%、43.57%和47.58%)的饲料中分别添加0、12mg/kg和24mg/kg维生素B6配制9种饲料,探讨不同蛋白质水平的饲料中添加维生素B6对乌鳢蛋白质代谢的影响。结果表明:(1)饲料蛋白质水平极显著影响胃、肠道和肝胰脏蛋白酶比活力(P0.01),在同一维生素B6水平下,随蛋白质水平的升高,各器官蛋白酶比活力显著提高。维生素B6极显著影响胃和肝胰脏蛋白酶比活力(P0.05),但对肠道蛋白酶比活力无显著影响(P0.05),饲料蛋白质和维生素B6的交互作用对各组织蛋白酶比活力无显著影响(P0.05)。(2)饲料蛋白水平极显著影响肝胰脏和肌肉中乳酸脱氢酶的活力(P0.01),显著影响肝胰脏和肌肉中谷丙转氨酶的活力(P0.05),在同一维生素B6水平下,随蛋白质水平的提高,各器官乳酸脱氢酶和谷丙转氨酶的活力都显著提高(P0.01)。维生素B6极显著影响肝胰脏和肌肉中谷丙转氨酶的活力和肌肉中乳酸脱氢酶的活力(P0.01),显著影响肝胰脏乳酸脱氢酶的活力(P0.05)。饲料蛋白质和维生素B6的交互作用对各器官乳酸脱氢酶和谷丙转氨酶的活力没有显著影响(P0.05)。在本试验条件下,高蛋白质饲料中适当添加维生素B6可促进乌鳢蛋白质代谢。     

大肠杆菌及脂多糖对奶牛乳腺上皮细胞基质金属蛋白酶表达的影响

为研究大肠杆菌(E.coli)及脂多糖(LPS)对奶牛乳腺上皮细胞(BMECs)基质金属蛋白酶(MMPs)表达的影响,以及MMPs与基质金属蛋白酶组织抑制因子(TIMPs)、尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)系统在调控细胞外基质(ECM)代谢中的作用,分别以106 CF U/mL热灭活E.coli菌液、7.5μg/mL ...     

鸡破骨细胞分离和培养方法的改进

为获得大量有活力的鸡破骨细胞(Osteoclast,OC),本试验选取18日龄鸡胚,从长骨中提取骨髓细胞,用胰酶消化,40%和70%的percoll梯度离心分离骨髓间质细胞。在此基础上,用60 ng/mL核因子κB受体活化因子配体(RANKL)、50 ng/mL巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)诱导培养。采用抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色、骨吸收陷窝以及标志性蛋白TRAP、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、组织蛋白酶K检测鉴定破骨细胞。结果显示,诱导后的TRAP阳性细胞剧增,TRAP、MMP-9和组织蛋白酶K蛋白表达极显著上调,可在牛骨上形成大量的骨吸收陷窝。研究表明,该方法是一种快速、实用、高效的鸡破骨细胞分离培养技术。     

人组织蛋白酶K在毕赤酵母中的表达、纯化及活性测定

在动物和人的骨代谢疾病中,组织蛋白酶K是木瓜蛋白酶家族中的一种半胱氨酸蛋白酶,是负责骨吸收过程中溶骨的主要关键酶,是新药物的分子作用靶点。通过毕赤酵母表达系统表达出重组组织蛋白酶K,进一步用离子交换和分子筛系统进行纯化得到高纯度有活性的重组组织蛋白酶K。运用FluStar荧光酶标仪测定390 nm(激发光)和460 nm(发射光)波长下荧光强度的变化并计算出组织蛋白酶K的酶活力为119.6 U,为进一步筛选骨质疏松等骨代谢疾病的新药提供参考。     

钙蛋白酶抑制蛋白可抑制屠宰后肌肉蛋白水解

钙蛋白酶蛋白系统在细胞内普遍存在,并参与机体生长与代谢过程,主要由钙蛋白酶(u-calpain和m-calpain)、钙蛋白酶抑制蛋白(calpastatin)及骨骼肌特异性钙蛋白酶(musclespecificcalpain,P94)组成。钙蛋白酶抑制蛋白(calpastatin)是钙蛋白酶的内源性抑制蛋白,对调控calpains的活性有重要意义。本文对钙蛋白酶蛋白系统的概况、钙蛋白酶抑制蛋白(calpastatin)基因的结构、特性、功能及其研究进展进行了综述,并对其研究前景进行了展望。     

钙蛋白酶系统与肌肉增长及嫩度的相关性研究

钙蛋白酶(calpain)系统主要包括钙蛋白酶、钙蛋白酶抑制蛋白(calpastatin)和钙蛋白酶激活蛋白(calpain activator)。近年的研究表明,calpain是细胞质中主要的蛋白水解酶,此系统参与了调控肌原纤维蛋白的降解并在其中发挥了关键性的作用,肌肉增长和宰后嫩度的变化与蛋白质的周转代谢密切相关。同时阐述了钙蛋白酶系统的结构、功能及活性调节与肉质的关系等。     

一例泰迪犬胰腺炎的诊断与治疗

正犬胰腺炎是指多种病因导致胰酶(胰蛋白酶原、胰凝乳蛋白酶原、弹性蛋白酶原、前磷脂酶A、前辅脂肪酶等)被激活后对自身及其它组织器官的消化,引起水肿、出血甚至坏死的炎症反应。该病的各个阶段所表现出的临床症状和检查结果各不相同,容易与其他胃肠道疾病混淆造成误诊并延误治疗的最佳时机。临床上主要表现为呕吐、厌食、腹     

寄生虫半胱氨酸蛋白酶研究进展

半胱氨酸蛋白酶(Cysteine protease,CP)是一类在酶的活性中心含有半胱氨酸残基的蛋白水解酶.CP属于木瓜蛋白酶家族,广泛分布于从病毒至脊椎动物的生物体中.对人体半胱氨酸蛋白酶的研究主要集中在细胞凋亡分子机制和恶性肿瘤的基因诊断与治疗等方面.而对寄生虫半胱氨酸蛋白酶研究的内容则更为广泛,其中包含半胱氨酸蛋...     

钙蛋白酶I(CAPN1)基因在不同鸡品系中的遗传多态性分析

钙蛋白酶I(CAPNl)广泛存在于各组织,是细胞质中主要的蛋白水解酶,在肌原纤维蛋白降解中起着重要的作用.肌肉增长和宰后嫩度的变化与蛋白质水解程度密切相关,肌肉蛋白质的增加取决于肌肉蛋白合成速度和降解速度,因此,钙蛋白酶系统有可能在肌肉发育中起着调控作用.     

新型功能性饲料添加剂——酪蛋白磷酸肽

由于分离技术和结构鉴定等研究方法的发展,研究者从牛奶蛋白质中分离提取出大量的小分子生物活性肽。研究表明这些生物活性肽有着重要的生理功能,具有潜在的开发应用前景,极受人们瞩目。酪蛋白磷酸肽(CaseinPhosphopeptides,简写为CPPs)就是其中的一种。它是一种由牛乳酪蛋白经蛋白酶酶解作用而得到的含有成簇磷酸丝氨酰基的多肽。在上世纪五六十年代CPPs被英国科学家发现,我国上世纪九十年代初开始研究。研究证明CPPs在促进钙、铁、锌离子的吸收和利用方面具有特效。另外,对动物免疫和繁殖等方面也有着重要的作用。本文将就CPPs的来…     

浅谈不同免疫程序和方法对IBD疫苗免疫效果的影响

鸡传染性法氏囊病(IBD)是由传染性法氏囊病病毒(IBDV)引起的一种高度接触性传染病,主要侵害雏鸡和青年鸡的法氏囊等器官,破坏法氏囊中的B淋巴细胞,导致免疫抑制,使病鸡更易感染其它疾病.上世纪80年代末,欧洲、亚洲等国家开始逐渐有超强毒IBDV(vvlBDV)的流行.致使IBD的流行出现发病鸡群的死亡率可达到90%,发病年龄增高的新特点,使IBD成为严重影响养鸡业发展的主要的烈性传染病.     

芽孢杆菌B4对刺参肠道免疫酶及消化酶的影响

在大连湾地区健康的刺参养殖池塘沉积物中分离出的一株芽孢杆菌B4,经检测,发现该菌株具备产淀粉酶和蛋白酶能力。试验采用1亿CFU/m L质量浓度的B4菌液投喂刺参,并于投喂后第0天、第7天、第14天、第21天和第28天取刺参体肠道,检测刺参肠道内的碱性磷酸酶(AKP)、酸性磷酸酶(ACP)、脂肪酶(LPS)、淀粉酶(AMS)和蛋白酶(Protease)的活性。结果表明:第14天和第28天,添加B4组的刺参肠道AKP活性显著高于对照组(P0.05);B4组的ACP活性与对照组相比无显著差异(P0.05)。用添加芽孢杆菌B4的饲料饲喂刺参,肠道内淀粉酶活性在第14天、第21天和第28天时显著高于对照组(P0.05);第7天时,B4组的肠道脂肪酶活性显著高于对照组(P0.05);第28天时,B4组的肠道内蛋白酶活性与对照组相比显著升高(P0.05)。研究表明,芽孢杆菌B4具有良好的产酶特性,且对刺参肠道免疫酶具有良好的刺激效果,可作为刺参饲料添加剂使用。     

水产动物与B族维生素

B族维生素是一类具有辅酶功能的水溶性维生素,主要包括硫胺素(维生素B1)、泛酸(维生素B3)、尼克酸和尼克酰胺(维生素B5)、吡哆醇(维生素B6),生物素(维生素B7)、叶酸(维生素B11)及钴胺素(维生素B12)。它们在水生动物机体内不能大量贮存,当组织内含量趋于饱和时,多余部分随即排出。其结构和生理功用各异,其中绝大多数都是通过组成酶的辅酶而在水产动物营养中发挥作用。尽管动物体及其肠道微生物可合成一些维生素,但大多数维生素仍然必须依靠饲料经常提供。1B族维生素营养研究方法营养学中研究维生素的方法的有很多种,但根据研究目的的不同…     

钙蛋白酶1与动物雄性生殖

钙蛋白酶1(calpain1,CAPN1)在动物各组织中普遍表达,广泛参与机体的信号传导、细胞凋亡和细胞周期调控等生理过程。钙蛋白酶1存在于精子的头部,参与精子发生和顶体反应等生理过程,对精子发挥正常功能具有重要的作用。本文主要阐述了钙蛋白酶1的结构、功能以及与雄性生殖相关性研究进展,为人们进一步研究该基因奠定基础。     

饲料中添加果寡糖和糖萜素对中华鳖消化酶活力的影响

试验选用2龄平均体重150 g左右的中华幼鳖,共54只,按2因素3水平的正交试验设计,随机分成9组,每组各接受一种处理.果寡糖(FOS)和糖萜素(SHP)对胃、胰脏、前肠组织蛋白酶活性影响显著(P＜0.05),而对中、后肠组织蛋白酶活性影响不显著(P＞0.05).在胃、前肠和胰脏组织中第9处理组(FOS=1000 mg/kg,SHP=1000 mg/kg)蛋白酶活力最高,第1处理组(FOS=200 mg/kg,SHP=200 mg/kg)最低,第9处理组比第1处理组分别提高4.51%、6.53%和4.37%.FOS和SHP对胰脏、前肠组织脂肪酶活性影响显著(P＜0.05),而对胃、中肠和后肠组织中脂肪酶活性影响不显著(P＞0.05),但随着添加剂水平的增加,中肠、后肠组织脂肪酶活力也在提高.FOS和SHP对胰脏、后肠组织淀粉酶活性影响显著(P＜0.05),而对前、中肠组织蛋白酶活性影响不显著(P＞0.05).FOS和SHP在第3水平时中华鳖的各项指标最好,FOS和SHP适宜添加量为1000 mg/kg.