苯乙醇胺A单克隆抗体的研制及ELISA检测方法的建立

为制备苯乙醇胺A(phenylethanolamine A,PA)单克隆抗体,建立一种针对苯乙醇胺A的快速、简便、灵敏度高的检测方法,本试验采用重氮化法将制备的苯乙醇胺A衍生物分别与牛血清白蛋白(BSA)和卵清白蛋白(OVA)进行偶联作为免疫原和包被原。利用弗氏佐剂充分乳化免疫原(PA-BSA),按常规免疫程序免疫6～8周龄的雌性BALB/c小鼠,选择血清抗体效价较高的小鼠,取其脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞以PEG法进行细胞融合。结果显示,经3次细胞亚克隆筛选后,最终筛选出一株可稳定分泌抗苯乙醇胺A单克隆抗体的杂交瘤细胞株,命名为D6H8,利用此细胞以小鼠体内诱生法制备抗体。经鉴定,D6H8腹水抗体亚型为IgG1,轻链为κ链;纯化后的抗体与沙丁胺醇、盐酸克伦特罗、盐酸异丙肾上腺素和盐酸去氧肾上腺素均无明显的交叉反应(CR0.18%),表明该抗体特异性良好。利用此抗体建立针对苯乙醇胺A药物残留检测的间接竞争ELISA方法,结果表明,腹水抗体效价为1∶12 800,猪肉中苯乙醇胺A添加浓度在5～1 000 ng/mL时线性关系良好,标准工作曲线为y=0.3861x-0.1845 (R~2=0.990),其IC_(50)为58.88 ng/mL,LOD为3.83 ng/mL,回收率在85.96%～104.32%之间。综上所述,本试验成功建立了检测苯乙醇胺A药物残留的间接竞争ELISA方法,该方法灵敏度高、稳定性较好。     

厉以宁教授担纲 农垦改革发展重大战略问题课题研究正式启动

<正>1月31日,农业部农垦局与北京大学管理科学研究中心联合启动农垦改革发展重大战略问题课题研究,课题组由北大教授厉以宁担任顾问。此次课题研究将聚焦垦区和国有农场改革、农垦经济发展方式转变以及农垦的新型城镇化建设。在研究启动发布会上,厉以宁表示,农垦改革的总目标应该是把国有资源或者资产,包括土地、资本和人力等三方面搞活,更好地发挥效益。     

乐果对大鼠原代培养肝细胞的毒性试验

通过给大鼠肝细胞培养液中加入乐果(染毒终浓度分别为0,3,30和300μmol/L)染毒,MTT法测定乐果对肝细胞增殖的影响,同时测定肝细胞培养液中乳酸脱氢酶(LDH)及细胞内谷胱甘肽(GSH)的含量,研究了乐果对原代培养大鼠肝细胞的毒性作用。结果显示,与对照组相比,乐果对原代培养肝细胞增殖有明显的抑制作用,且呈剂量-时间效应关系。染毒后48 h细胞生长达高峰时,细胞活率分别为对照组的97%、82%和75%;300μmol/L染毒组细胞染毒后24 h、36 h、48 h、60 h和72 h细胞活率分别为对照组的67%、82%、75%、71%和63%。同时,乐果染毒12 h和24 h后各染毒组培养液上清中LDH含量均极显著升高(P<0.01),尤其是300μmol/L染毒组12 h和24 h培养液上清中LDH含量分别为对照组的7.35倍和8.75倍;同一剂量组随着染毒时间延长,LDH含量呈上升趋势。染毒12 h和24 h后30μmol/L及300μmol/L组细胞内GSH含量均存在极显著差异(P<0.01);同一剂量组随着染毒时间延长,GSH含量呈下降趋势。表明乐果对肝细胞有直接的毒性作用,能够抑制其增殖,引起细胞膜脂质过氧化损伤。     

不同剂量氟苯尼考对猪血液生化指标及猪瘟抗体的影响

40头70日龄健康猪随机分为高、中、低剂量组和对照组,每组10头,各试验组注射猪瘟弱毒疫苗(2头份/猪),同时高、中、低剂量组分别按每千克体质量于饲料中加入120、60、30 mg氟苯尼考,连续给药7 d,停药后1、8、15、22、29 d,对相关的血液生化指标以及猪瘟抗体水平进行检测分析.结果表明,停药后1、8 d,所有氟苯尼考添加组的猪瘟抗体滴度下降,仅120 mg/kg组差异显著(P<0.05),停药15 d后抗体水平恢复至正常水平;60和120mg/kg给药组TP含量在停药后1、8 d均显著下降(P<0.05);所有给药组的ALT活性在所有检测时间内均显著上升(P<0.05或P<0.01);所有给药组的γGT活性在停药后1 d均显著上升(P<0.05),而60和120 mg/kg组γGT在第8天仍显著上升(P<0.05);所有给药组的BUN含量在停药后1 d均显著升高(P<0.05或P<0.01);AST、LDH、CHE活性和ALB、CRE含量与对照组相比无显著差异(P>0.05);表明每千克体质量60 mg以上氟苯尼考在饲料中饲喂7 d后,对部分生化指标有一定的影响,应引起重视.     

美人蕉的栽培与应用

美人蕉又名红蕉昙花，为美人蕉科美人蕉属，原产于南美及亚洲的印度等地，为多年生草本，具肉质粗壮根茎。叶椭圆披针形，绿色或浆红色，羽状平行脉，叶柄鞘状，茎肉质不分枝。总状花序着生于茎顶，蒴果，外部有刺状突起，种子黑色坚硬。美人蕉品种繁多，花色有黄、粉、大红、红黄相间等色，并具有各种条纹和斑点。花期6～10月，种芽经处理，可调控花期。     

葛根素缓解镉对大鼠股骨胫骨中成骨细胞分化的抑制作用

旨在探究葛根素对镉（cadmium,Cd）抑制大鼠股骨胫骨中成骨细胞（osteoblast,OB）分化的缓解效应。选取40只3周龄SD雄性大鼠,随机分为4组,分别为对照组（CON）、镉组（Cd）、葛根素组（Pur）和镉+葛根素组（Cd+Pur）,每组10只。其中,对照组和镉组大鼠灌服超纯水,连续5周;含葛根素组（葛根素组和镉+葛根素组）大鼠每日灌服葛根素溶液（200 mg·kg^-1BW）,连续5周;从第5周开始,对照组与葛根素组大鼠每日腹腔注射生理盐水,含镉组（镉组和镉+葛根素组）大鼠每日腹腔注射醋酸镉（2.5 mg·kg^-1BW）,连续1周。通过原子吸收光谱法检测大鼠股骨胫骨中Cd、钙（Ca）与磷（P）的含量,qRT-PCR方法检测OB标志基因（RUNX2、OCN、ALP和OSX）的水平,Western blot检测Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白（β-catenin、Wnt3A、LEF1和TCF1）的表达。结果显示,与对照组相比,镉组股骨和胫骨中镉含量极显著上调（P<0.01）,OB标志基因均下调,Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白极显著下调（P<0.01）,但Ca和P含量无显著变化（P>0.05）;葛根素组股骨胫骨中镉、Ca与P含量无显著变化（P>0.05）,OB标志基因（RUNX2、ALP和OCN）极显著上调（P<0.01）,Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白极显著上调（P<0.01）;与镉组相比,镉+葛根素组股骨胫骨中镉含量极显著下调（P<0.01）,OB标志基因极显著上调（P<0.01）,Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白极显著上调（P<0.01）,但骨中Ca与P含量无显著变化（P>0.05）。结果表明,葛根素对镉抑制大鼠OB分化具有一定的缓解效应,该过程涉及Wnt/β-catenin信号通路。     

万年青牌绿茶和龙牌红茶荣获1985年国际最优质量服务奖

1985年7月18日, 中国土畜产进出口公司上海茶叶分公司正式收到了由西班牙马德里《国际商业评论》出版社寄来的万年青牌绿茶9371(特級珍眉)和龙牌红茶荣获1985年国际最优质量、服务奖的奖品和证书。由上海茶叶分公司经营的万年青牌绿茶9371(特级珍眉)是采用上等原料拼制而成的,     

Fas对镉激活PC12细胞线粒体凋亡通路的影响

旨在探究死亡受体Fas在镉致大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞（PC12）凋亡中的作用及其对线粒体通路的调控机制,用10 μmol·L^-1镉处理Fas基因沉默的PC12细胞株12 h,通过Western blot检测BH3相互作用域死亡激动剂（BID）、半胱氨酸蛋白酶-9（caspase-9）、半胱氨酸蛋白酶-3（caspase-3）、多聚二磷酸腺苷核糖聚合酶（PARP）的活化情况,Bcl-2相关X蛋白（Bax）、B细胞淋巴瘤/白血病-2基因（Bcl-2）、凋亡诱导因子（AIF）、核酸内切酶G（Endo G）的表达情况,以及细胞色素C（Cyt C）在细胞内的分布情况,免疫荧光染色检测AIF核转位。结果显示,镉极显著上调tBID/BID比值和Bax/Bcl-2比值,诱导Cyt C从线粒体释放到细胞质,激活caspase-9、caspase-3和PARP,增加AIF和Endo G蛋白表达水平（P<0.01）,并诱导AIF核转位;沉默Fas极显著抑制镉引起的tBID/BID比值和Bax/Bcl-2比值升高,Cyt C从线粒体释放到胞浆,caspase-3、PARP蛋白活化和AIF、Endo G蛋白表达水平极显著升高（P<0.01）,显著抑制镉激活的caspase-9（P<0.05）,并抑制AIF核转位。综上表明,Fas通过调控线粒体通路参与镉致PC12细胞凋亡。     

牛胰腺核糖核酸酶A的基因克隆、表达及初步鉴定

【目的】为了避免在制备基因治疗或基因免疫的质粒时使用动物源性的核糖核酸酶A（RNase A）。【方法】提取牛胰腺总RNA，利用RT-PCR扩增出牛核糖核酸酶A cDNA，RT-PCR产物克隆到pGEM-T载体测序验证后，将此cDNA亚克隆到大肠杆菌分泌型表达载体pEZZ18中。【结果】SDS-PAGE电泳显示其转化菌经温度诱导后能表达预计的大小为28 kD重组蛋白。用渗透法释放出表达产物，将其加入到经碱裂解粗提的质粒DNA中并孵育0.5 h，琼脂糖凝胶结果表明表达产物能很好地去除细菌的RNA并且不降解超螺旋质粒DNA。【结论】在质粒的纯化过程中，重组牛核糖核酸酶可以替代动物源性的RNase A。     

牛布氏杆菌二抗苗应用安全性实验研究（Ⅱ）──实验性豚鼠兔抗体的研究（GpARA）

用牛布氏杆菌抗独特型兔源抗体（简称二抗）苗免疫实验动物豚鼠１～３次后，采用琼脂扩散的方法检测抗兔抗体的产生。初步实验结果表明：免疫一次未检出抗兔抗体，免疫２次后检出了抗兔抗体。