| 鸡破骨细胞分离和培养方法的改进 |
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| 引用本文： | 宋瑞龙,仝锡帅,程来洋,高倩,张家铭,王东,顾建红,朱家桥,袁燕,刘学忠,刘宗平,顾建红,朱家桥,袁燕,刘学忠,刘宗平.鸡破骨细胞分离和培养方法的改进[J].中国家禽,2014(9):16-19. |
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| 作者姓名： | 宋瑞龙 仝锡帅 程来洋 高倩 张家铭 王东 顾建红 朱家桥 袁燕 刘学忠 刘宗平 顾建红 朱家桥 袁燕 刘学忠 刘宗平 |
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| 作者单位： | 扬州大学兽医学院;江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心; |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(31172373、31372495、31302154);高等学校博士学科点专项科研基金(20113250110003、20133250120002);江苏省研究生科研创新计划(CXZZ12_0917) |
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| 摘 要： | 为获得大量有活力的鸡破骨细胞(Osteoclast,OC),本试验选取18日龄鸡胚,从长骨中提取骨髓细胞,用胰酶消化,40%和70%的percoll梯度离心分离骨髓间质细胞。在此基础上,用60 ng/mL核因子κB受体活化因子配体(RANKL)、50 ng/mL巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)诱导培养。采用抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色、骨吸收陷窝以及标志性蛋白TRAP、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、组织蛋白酶K检测鉴定破骨细胞。结果显示,诱导后的TRAP阳性细胞剧增,TRAP、MMP-9和组织蛋白酶K蛋白表达极显著上调,可在牛骨上形成大量的骨吸收陷窝。研究表明,该方法是一种快速、实用、高效的鸡破骨细胞分离培养技术。
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| 关 键 词： | 破骨细胞 鸡 纯化 培养 |
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