瘤胃微生物定量方法的研究进展

当前人们对瘤胃中微生物的认识只有10%～20%,不断改进研究技术和手段,才能大大推动瘤胃微生态领域的研究。作者阐述了瘤胃微生物传统定量方法（滚管计数法和最大或然数法）和分子生物学定量方法,如探针杂交技术、荧光原位杂交、DGGE、定量PCR和流式细胞计量术（flow cytometry )等的应用状况及其各自的优缺点。     

瘤胃微生物定量方法研究进展

瘤胃微生物的定量有传统计数和现代分子定量2大类方法。其中，传统方法包括经典的亨氏滚管法和最大可能法，但它们测定瘤胃微生物总数的结果可能偏低。运用分子方法定量一些重要的微生物不仅能很好地解释它们在瘤胃代谢中的作用，而且有助于描述更多的微生物特性。因此，作者综述了瘤胃微生物定量方法的发展历程及研究进展，重点描述了运用分子定量方法的研究情况。     

传统技术与现代分子生物学技术在瘤胃微生物多样性方面的研究进展

为了提高反刍动物利用瘤胃微生物的效率,微生物学家和动物营养学家都致力于瘤胃微生物的培养分离纯化和生理生化特性研究.但是由于瘤胃微生物大多是厌氧性的,很难培养成功,传统技术在瘤胃微生物的研究上受到很多限制.随着科学技术的进步,现代分子技术也开始逐渐渗透到瘤胃微生物的研究中来.文章将瘤胃微生物多样性研究的方法简要划分为纯培养技术,现代分子生物学技术和上述两种方法的联合使用,并重点阐述了不同方法的优缺点,展望了瘤胃微生物多样性研究方法的发展前景.     

牛瘤胃微生物定量测定方法研究进展

瘤胃微生物数量测定一直是反刍动物营养的难点之一.传统的定量方法有亨氏滚管法和最大可能计数法(MPN)两种,方法简单,但工作量大,测定结果与实际存在偏差.现代分子定量技术的出现和发展,为瘤胃微生物数量的测定提供了一种新的思路和方法.如核算分子杂交技术、变性梯度凝胶电泳(DGGE)或温度梯度凝胶电泳(TGGE)、定量PCR...     

瘤胃微生物的多样性及其研究技术

瘤胃微生物群落具有丰富的多样性,主要包括瘤胃原虫、瘤胃细菌和厌氧真菌,它们各自有其独特的功能,同时又相互联系,共同与宿主之间构成了复杂的微生态系统。为了探明瘤胃微生态系统,一方面要完善传统的微生物分离技术,另一方面要大力发展分子生物学技术,将二者结合起来进行研究。     

瘤胃微生物的多样性及定量方法的研究进展

瘤胃微生态系统作为生物界最复杂的生态系统,受日粮成分、饲养方式及季节等因素的影响。通过对瘤胃微生态的研究有助于操控瘤胃发酵,提高饲料转化率。综述瘤胃微生物的多样性及瘤胃微生物主要的定量方法。     

实时定量PCR技术在瘤胃微生物定量分析中的研究应用

随着对瘤胃微生物研究的逐步深入,一些以分子生物学技术为基础的定量分析方法对瘤胃微生物的研究方兴未艾。本文简要介绍了实时定量PCR技术的原理、操作程序以及该技术在反刍动物瘤胃微生物定量分析中的应用现状、取得的成果和前景展望。     

瘤胃微生物多样性与分析技术的研究进展

瘤胃微生物区系是一个组成和功能极其复杂的体系,微生物的多样性决定着动物机体健康和生产性能。本文就瘤胃微生物多样性的研究进展和瘤胃微生物分类定量的技术手段以及益生菌对瘤胃微生物的作用作一综述。     

中国农业科学院畜牧研究所：反刍动物营养研究室简介

反刍动物营养研究室成立于1993年，建立了分子生物学实验室、瘤胃微生物实验室、细胞培养实验室、生理生化实验室、畜产品品质和饲料营养价值评定实验室。“十五”期间研究建立了瘤胃微生物定量法，实现了目标瘤胃微生物定量调控；建立了牛奶中微量脂肪酸（CLA）批量检测方法，研发了提高牛奶天然CLA含量的成套技术。     

持续动态瘤胃发酵系统的结构功能比较研究进展

持续动态瘤胃发酵系统是在体外模拟瘤胃内发酵环境,用于瘤胃微生物代谢以及评定日粮营养价值等方面研究的机械装置。该装置是由一系列具有不同功能的设备组成。目前较新的人工瘤胃模拟系统主要能实现发酵环境中各发酵参数的实时监控并对发酵产物如产气量等进行准确计量,但与实体瘤胃内环境还存在一定差距。本文通过对国内外几种典型的持续动态瘤胃发酵系统的各部分结构和功能进行对比分析,比较各自的优缺点,提出了较为合理的设计方法。总之,持续动态瘤胃发酵系统的设计向着自动化方向发展,但在食糜样品的采集方法等方面还需改进。     

犬第三眼睑增生切除法与包埋法治疗效果的比较

犬第三眼睑增生是由于腺体肥大等原因与瞬膜一起从眼内向外翻转而发生炎症的一种眼病,多采用切除法与包埋法进行治疗。为研究犬第三眼睑增生切除法与包埋法的利弊,本试验将20只双眼患第三眼睑增生且不患其他疾病的犬分为切除组和包埋组,进行手术并跟踪观察比较治疗效果。结果显示,切除法具有手术简便、恢复时间短等优势,但患犬治愈后会有干眼病等后遗症发生,对犬的健康有极大危害;而包埋法虽然手术复杂,恢复时间较长,但只要能熟练的操作也能达到治愈效果,且对患犬不会产生其他不良影响。结果表明,虽然2种手法各有利弊,但切除法的弊大于利,后遗症会带给犬更多的不便;而包埋法的利大于弊,只要能熟练掌握手术方法,做好术后的护理,就可以克服弊端。建议在今后的临床中应尽量的建议前来就诊的畜主使用包埋法对第三眼睑增生进行治疗。     

培养组学在动物肠道微生物应用的研究进展

肠道微生物被称为动物的"隐藏免疫器官",不仅能参与宿主代谢还能影响宿主的免疫系统,对维持机体健康至关重要。作者主要介绍了培养组学的发展历程及其对动物肠道微生物研究的重要意义、传统微生物培养方法和分子生物学方法在研究微生物时各自的优、缺点。培养组学是基于传统微生物培养方法同时采用多种培养条件进行微生物培养,再辅以基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)和16S rRNA基因测序技术建立的一种新型微生物分离、鉴定方法,该方法将传统微生物培养技术与分子生物学技术的优点融为一体。该方法在挖掘"新微生物"的研究中,具有发现、找到并获得的优势;在微生物的研究中可定制分离目标菌株进行验证,并能通过丰富注释清楚地了解肠道微生物组。此外,分析了培养组学分别在家禽肠道、猪肠道、反刍动物肠道等动物肠道的研究应用现状,提出了环境条件对肠道微生物的影响,如人类接触对肠道菌群的影响、同物种不同性别肠道菌群的差异,以期为培养组学在动物肠道微生物的研究运用中提供参考。     

Methods to reduce pathogen microorganisms in manure

Manure always contains microorganisms originating from faeces, bedding material, feed residues, etc. A small percentage of the enteric microorganisms are pathogens, some of them being obligate parasites so that they can no more multiply outside of their hosts. If these pathogen microorganisms gain access to other sensitive host, water or vegetation, there will be health risks for animals or human. Some microorganisms in manure can increase the risks for deterioration of fodder if manure should contaminate fodder and these microorganisms can be secreted into raw milk. In particular, the cheese industry can encounter difficulties from butyric acid producing clostridia present in manure.

The reduction and controlling of microorganisms can be done by microbiological, chemical or physical methods. The efficiency as well as the advantages and disadvantages of these methods will be discussed. Some methods may give other beneficial products, thus providing novel opportunities for new sources of farm income. All methods do require investments and have operational costs thus the selection becomes dependent f. i. how long animal breeding will be practised. Some methods fit better for seasonal or temporal use. The method selected depends also on the form of the manure as well as on the size of the animal unit.

The hygiene control claims of EU will be critically discussed.     

非损伤性取样提取动物DNA方法探讨

近年来,随着分子生物学技术的发展,非损伤性取样逐渐成为野生动物分子生物学研究中获取试验材料的主要方法.文章主要通过介绍当前非损伤取样提取动物DNA的方法,比较各种方法的优缺点和局限性,并分析了各种方法的研究特点和应用前景,以期对下一步研究提供有价值的参考.     

流行性出血热主要检测方法比较

流行性出血热(epizootic haemorrhagic disease,EHD)被世界动物卫生组织(OIE)列为须通报的跨境传播动物疫病。目前,世界范围该病病原已发现9种血清型,其中有5种在我国流行,并表现出高度多样性。为了在实践中选择合适的检测方法,从抗原及抗体检测两方面,总结了各种检测方法的优缺点。经比较,各种检测方法在经济性、时效性、灵敏度、准确度、操作难易度以及对操作人员和仪器环境的要求各有不同。因此,在实际检测时应根据具体的检测条件和检测要求选择最合适的检测方法。未来还将不断尝试应用新技术,从而进一步丰富EHD的检测方法。     

家畜早期胚胎性别鉴定方法在畜牧业中的应用

家畜早期胚胎性别鉴定对畜牧业生产具有重要意义。目前，应用于家畜早期胚胎性别鉴定的方法主要有：细胞遗传学方法，生物化学方法、免疫学方法和分子生物学方法等。本文对这几种方法的研究现状、主要优缺点及在畜牧业中的应用作一综述。     

哺乳动物胎儿肺成熟检测方法的研究概况

兽医产科临床中经常会遇到动物无法维持足月妊娠的情况，对这些胎儿进行肺成熟度检测，对提高胎儿成活率极为重要。临床上多采用羊膜腔穿刺法采取羊水，测定羊水中生化指标和生物物理指标，用以判断胎肺成熟度，此法有一定的创伤性，近年来人医兽有报道，以无创伤性的超声检查判胎肺成熟度。本文对胎儿肺成熟的一些检测方法及其优缺点作了简要综述。     

粗饲料营养价值指数及评定方法

粗饲料是反刍动物瘤胃微生物和宿主主要的营养来源,科学有效地评价粗饲料营养和饲喂价值,对于开发饲料资源、合理利用粗饲料和提高其利用效率至关重要。本文简述了国内外对动物粗饲料营养价值的评定指数和方法,介绍了粗饲料营养价值评定方法的发展以及各方法的优缺点,指出实际研究中可根据不同的科研需求,选择适合的评定指数和方法,根据实际情况完善评定指数和评定方法,对粗饲料营养价值的科学评定和合理利用起到一定借鉴作用。     

材料处理与切片方法对柑橘叶脉荧光显微观察的影响

植物组织结构与细胞形态学观察是植物系统分类、遗传演化、抗逆反应等的主要研究方法之一。为了简便、有效的进行植物组织细胞的显微观察，本文研究了不同材料处理和不同切片方法对柑橘叶脉组织细胞荧光显微观察的影响。结果表明：利用荧光显微技术可以简便、有效的观测柑橘叶脉的组织结构和细胞形态；新鲜样品徒手切片和冷冻切片、FAA固定样品冷冻切片在荧光显微镜下都可以得到较佳的观测效果；几种样品处理方法各有优缺点，研究中可以根据具体情况灵活选用。     

牛奶中褪黑素含量的检测方法

褪黑素作为一种多功能活性因子,在畜牧生产中具有十分重要的作用。近年来,有关天然高褪黑素奶的研究大规模开展,对奶中褪黑素含量测定需求也有所增加。目前比较常见的褪黑素检测方法有气相色谱法（GC）、气相色谱-质谱联用法（GC-MS）、高效液相色谱法（HPLC）、高效液相色谱-质谱联用法（LC-MS）、放射免疫测定法（RIA）、酶联免疫吸附测定法（ELISA）、紫外分光光度法（UV）。本文从原理、特点及优缺点等方面对这几种方法展开介绍,并对各方法的应用进行简单的比较,为后续相关研究与应用提供一定参考。