九孔鲍性腺发育过程中消化酶活力的变化

用酶学方法研究了性腺发育过程中九孔鲍肝胰腺和消化道中蛋白酶、淀粉酶和纤维素酶活力的变化。试验结果表明,雌、雄九孔鲍各消化酶活力均随着性腺发育呈先升后降的变化趋势。在性腺发育早期和晚期酶活力较低,在性腺发育中期酶活力显著升高,且均在成熟前期达到最高值。九孔鲍繁殖期各消化酶的活力分布存在器官特异性和性别差异,九孔鲍的淀粉酶和纤维素酶活力在各性腺发育期均表现为肝胰腺消化道,雌鲍雄鲍。同种消化器官内各消化酶的活力也存在差异,雌、雄九孔鲍繁殖期肝胰腺和消化道内各消化酶的最大活力均为:纤维素酶淀粉酶蛋白酶。     

杂色鲍人工育苗

杂色鲍(haliotis diverioclor)俗名九孔鲍,是名贵海产品,是我国南方沿海地区的一个主要贝类养殖品种.要发展鲍鱼的养殖,首先要解决种苗生产问题.鲍鱼的人工育苗技术是指在鲍鱼的性腺成熟季节以及水温适宜的情况下,利用人工的方法使亲鲍排精、产卵,以达到孵化大批量的鲍鱼苗来满足市场要求.在湛江,每年的4～6 月和8～12 月是鲍鱼的繁殖季节,这时鲍鱼的性腺成熟度好且水温合适,是进行人工育苗的好季节.     

九孔鲍苗“脱板症”病原的初步研究

本文研究近年来在九孔鲍人工育苗中出现的大量死亡现象“脱板症”的病原。采用了组织病理学研究方法，通过电子显微镜观察，发现九孔鲍苗组织细胞中发生内质网膨大现象、具纤毛结构细胞层下的细胞质中有大量的球形病毒存在。鉴于九孔鲍育苗生产现场已使用多种抗菌性药物治疗无明显的效果，初步认为九孔鲍幼苗大量死亡的病原体为一种球型病毒。本文还探讨了九孔鲍苗脱板症的防治措施。     

九孔鲍苗脱板病防治的几点建议

近年来,我国南方地区九孔鲍育苗连续出现严重脱板和剥离后暴发性死亡等现象,致使九孔鲍苗育苗量大幅度减少,已严重制约我国南方地区鲍鱼养殖业的发展。为此,笔者根据近年对海南省九孔鲍育苗病害调查及鲍苗病害防治试验结果,对九孔鲍苗“脱板病”的病因进行浅析,并提出几点病害防治的建议,以供科研与生产人员参考。一、应注重亲鲍的培育工作亲鲍培育是繁育优质鲍苗的一项极为重要的前提性工作,没有培育出性腺成熟的亲鲍,就不能获得优质的受精卵,而劣质的受精卵孵化出的幼体容易出现发育不良、大量死亡的现象。培育优质亲鲍可采取如下措施:1.…     

太平洋牡蛎控温条件下的性腺发育、条件指数与积温的关系

本文在人工促熟条件下,通过肉眼解剖观察、石蜡切片光镜观察,描述了太平洋牡蛎性腺发育分期和发育周期。分析了性腺发育、条件指数与积温的关系。试验结果表明,当积温为６２８．８℃时,条件指数达７．７５,性腺发育完全成熟。     

九孔鲍精子发生的超微结构

利用透射电镜观察九孔鲍（Haliotis diversicolor aquatilis）精子的发生过程。结果表明,九孔鲍精子的发生历经精原细胞、初级精母细胞、次级精母细胞、精细胞和成熟精子5个阶段。其中精细胞的分化可分为5期,主要特点为：Ⅰ期,一些高电子致密颗粒参与顶体的形成;Ⅱ期,核形态由椭圆形到近圆形,再逐渐拉长为长圆柱状;Ⅲ期,核染色质以颗粒状形式凝集,最后向高电子密度均质状态转变;IV期,线粒体逐步融合、体积增大和嵴发达;Ⅴ期,中心体移动及鞭毛形成,胞质逐渐减少。成熟精子为原生型,由头部、中段和尾部组成。通过观察精子发生过程中细胞形态结构的变化,分析了其演变规律,同时与软体动物的其他种类作了比较研究。     

九孔鲍MSTN基因cDNA克隆及表达

肌肉生长抑制素(MSTN)是转化生长因子β超家族(TGF-β)中参与动物肌肉生长的重要调控因子。为了解MSTN基因在九孔鲍中的功能,本研究采用c DNA末端快速扩增(RACE)技术从九孔鲍右侧壳肌中获得了MSTN基因c DNA全长,并运用实时荧光定量PCR(q RT-PCR)技术检测了MSTN在各组织和发育时期的表达水平。结果显示,九孔鲍c DNA全长3 755 bp,其中5′非编码区(5′UTR)324 bp,3′非编码区(3′UTR)1 985 bp,开放阅读框(ORF)1 446 bp,编码481个氨基酸,分子质量为54.96 ku,理论等电点p I为9.41;具有N端信号肽(1~17 aa)、TGF-β前肽区域(157~367 aa)和成熟肽区域(379~481 aa),以及蛋白酶水解位点RRPR(364~368 aa)和C端生物活性区9个保守的半胱氨酸残基,符合TGF-β超家族蛋白典型结构特征,且预测到2个新的蛋白酶水解位点RQRR(120~124 aa)、RYRR(235~239 aa)。系统进化树结果显示,九孔鲍MSTN基因和红鲍MSTN基因聚为一支。q RT-PCR结果表明,九孔鲍MSTN基因在检测的6个组织中均表达,且在足、右侧壳肌、外套膜中高表达,在鳃、性腺、肝脏中低表达;在检测的7个发育时期均表达且在受精卵、原肠胚、稚鲍时期高表达,在卵、4细胞期、8细胞期、幼鲍时期表达量较低。研究表明MSTN基因可能在九孔鲍肌肉生长中具有重要作用。     

不同类群九孔鲍免疫防御机能的比较

对不同类群的九孔鲍细胞与体液免疫机能进行比较,结果表明,不同类群的九孔鲍免疫机能具有显著的差异性,复壮鲍(养殖10个月,个体大小为51.8～59.2mm)细胞与体液免疫机能都明显高于退化鲍(养殖20个月,个体大小为37.4～43.1mm)(P<0.01),与野生九孔鲍(个体大小为67.7～76.7mm)相比,复壮鲍细胞免疫机能略高于野生鲍,体液免疫机能则明显低于野生鲍。九孔鲍血细胞在吞噬活动中具有呼吸爆发产生活性氧的功能与特点,活性氧的产生与九孔鲍自身生理、环境温度以及异物数量等因素有显著的相关性(P<0.01)。环境温度由25℃下降至18℃,九孔鲍的细胞与体液免疫机能都有明显的下降。退化鲍在25℃和18℃条件下血淋巴液的抗菌活力水平差异性不明显。酚氧化酶存在于九孔鲍血淋巴液中,但其活性水平不高,在各类九孔鲍之间的差异性也不明显,不能确认为九孔鲍的主要体液免疫因子。     

九孔鲍北方青苗及生长的探讨

探讨了九孔鲍(Haliotisdiversicolorsuertexta)在北方自然繁殖季节育苗的条件、发育时间和生长速度。2004年8月1日,用紫外线照射海水诱导产卵和人工授精的九孔鲍受精卵,经过60天培育,获6～12mm的幼鲍50万只。     

九孔鲍苗种健康培育技术之探讨

针对当前九孔鲍苗种生产存在的问题,改变以往的思路和方法,提出九孔鲍育苗和养成分别集中在不同海区,并采取种质优化,提供苗种培育的适宜的生态环境条件等措施,即通过采用选择育种、多倍体育种、杂交育种和亲鲍优化培育等方法改良和优化种质;通过采用温和催产、理想藻种预先培养、控制光照强度和使用微生态制剂等方法满足其生理生态条件要求,以期达到九孔鲍苗种健康培育之目的。     

芙蓉鲤鲫(芙蓉鲤♀×红鲫♂)的性腺组织学及繁殖性能研究

采用解剖观察、组织切片及人工催情等方法,研究芙蓉鲤鲫(Cyprinus capiofurong.♀×Carassius auratus red var.♂)的性腺发育及繁殖性能。结果显示:解剖观察,芙蓉鲤鲫性腺发育异常的个体占83.64%,性腺外观基本正常的个体占16.36%。组织学观察,芙蓉鲤鲫性腺可分三类:两性嵌合体占21.13%,其中以精巢为主的16.90%,以卵巢为主的4.23%,它们性腺发育迟缓,在繁殖季节成熟系数也没有明显变化,性腺多为一侧发育或两侧不对称,两种性腺细胞均不能成熟;雌性个体占40.84%,在生殖季节卵巢可发育到第IV时相,但未见其细胞核发生偏移;雄性个体,占38.03%,在生殖季节只能发育到精子细胞阶段,不能产生成熟的精子。经人工催产,芙蓉鲤鲫少部分个体有发情产卵行为但不能正常受精。结果表明芙蓉鲤鲫为两性败育类型。     

团头鲂性腺发育不同时期组织学观察及Kiss2／Kiss2r基因表达分析

Kiss基因（Kisspeptin）及其受体Kissr基因（Kiss receptor）组成的系统参与下丘脑-垂体-性腺轴功能的调节,在脊椎动物青春期启动的过程中发挥重要作用。该研究通过组织切片技术观察了团头鲂（Megalobrama amblycephala）卵巢和精巢的不同分期,进一步采用荧光定量PCR技术分析比较了团头鲂Kiss2和Kiss2r基因在雌、雄性腺不同时期对应的脑、垂体、性腺组织中的表达量。组织切片观察明确鉴别出团头鲂卵巢和精巢发育Ⅰ期至Ⅵ期的性腺组织结构,基因荧光定量PCR分析结果表明Kiss2/Kiss2r系统主要是通过增加团头鲂卵巢发育Ⅱ期时脑和垂体的表达量以及Ⅲ期精巢的表达量来发挥生殖启动作用。     

Molecular cloning and expression of caspase-3 in the protandrous cinnamon clownfish, Amphiprion melanopus, during sex change

The caspase-3 appears to be a key protease in the apoptotic pathway. We identified caspase-3 complementary DNAs from the ovaries of the protandrous cinnamon clownfish (Amphiprion melanopus), and investigated its mRNA and proteins, and activity levels during the sex change (I, mature male; II, male at 90 days after removing of the female; and III, mature female). The nucleotide sequence of the caspase-3 cDNA was 969 base pairs in length with open reading frames encoding peptides of 282 amino acids. The caspase-3 mRNA and protein, and activity levels in stages of the mature gonad are higher than those of the development gonad stage. To understand the effect of gonadotropin-releasing hormone (GnRH) on gonad apoptosis, we examined expression of genes caspase-3 mRNA and activity level in immature cinnamon clownfish gonads after GnRH analogue (GnRHa). The findings support the hypothesis that caspase-3 expression is associated with both testicular and ovarian development, and suggests that it may play a role in the control of ovarian development in cinnamon clownfish. Also, we demonstrate that GnRH agonists stimulate caspase-3 production which can in turn stimulate apoptosis. The present study provides a framework for better understanding of the role of caspase-3 during sex change processes in fish.     

三倍体僧帽牡蛎生殖腺发育观察

在僧帽牡蛎繁殖盛期,详细观察了二倍体,三倍体僧帽牡蛎生殖腺外部形态特征,比较了成熟卵母细胞卵径和核径。结果表明,外观上三倍体生殖腺发育较二倍体差,三倍本成熟卵母细胞卵径和核径分别比地倍体大１９．６％和１７．６％,体积分别比二倍体增加７０．３％和６４．２％,组织切片检查结果,二倍体生殖腺发育正常,三倍体生殖腺发育受阻,大都在增殖期和休止期,一部分个体可发育至生长期和成熟期,并能产生成熟的卵子和精子,     

Reproductive biology of the commercial sea cucumber <Emphasis Type="Italic">Holothuria spinifera</Emphasis> (Echinodermata: Holothuroidea) from Tuticorin,Tamil Nadu,India

The annual reproductive cycle of the commercial sea cucumber Holothuria spinifera was studied in Tuticorin, Tamil Nadu, India, from September 2000 to October 2001, by macroscopic and microscopic examination of gonad tubule, gonad index and histology of gametogenic stages, to determine the spawning pattern. The gonad consists of long tubules with uniform development. It does not confirm the progressive tubule recruitment model described for other holothurians. The maximum percentage of mature animals, gonad and fecundity indices, tubule length and diameter, with the observations on gonad histology, ascertained that H. spinifera had the peak gametogenic activity during September and October 2001 followed by a prolonged spawning period from November 2000–March 2001.     

广西茅尾海的香港巨牡蛎(Crassostrea hongkongensis)在不同养殖区的性腺发育变化

为探究香港巨牡蛎(Crassostrea hongkongensis)的繁殖特性以及春季死亡原因,采用肉眼观察、活体镜检和组织切片方法研究了茅尾海沙井的香港巨牡蛎苗种吊养于大风江黄场的1龄牡蛎的性腺发育周年变化,并建立了快速判断香港巨牡蛎性腺发育程度的方法.对比分析了吊养在茅尾海沙井、大风江入海口内的黄场和入海口外的鑫丰场的2龄牡蛎性腺发育的启动和发展过程.结果显示,广西茅尾海的香港巨牡蛎每年只有1个繁殖周期,性腺发育过程可划分为未分化期(1-3月)、分化期(4月)、成熟排放期(5-10月)及休止期(11-12月)4个阶段;1龄和2龄牡蛎的性腺发育基本同步;大风江入海口外的牡蛎的性腺发育较入海口内的牡蛎提前约15d,而比茅尾海内海的牡蛎提前约30 d,入海口外的牡蛎的性腺4月即发育到成熟排放期,冬季饵料的丰富程度和温度、盐度等因素可能是造成这种差异的原因.研究还发现,高温少雨天气下,海水盐度高,抑制了牡蛎性细胞的排放,导致入海口外侧吊养牡蛎的大规模死亡,濒临死亡的牡蛎性腺处于退化和崩解状态.鉴于此,认为4月初即需密切监测吊养于入海口外的牡蛎性腺的发育状况和天气状况,及时收获性腺饱满的牡蛎,或将吊养牡蛎的蚝排放置在河流入海口内区域过冬.     

岩虫的性腺发育和生殖周期

根据性腺发育的组织切片观察，岩虫（Marphysa sanguinea）性腺发育可分为增生期、成熟期、排放期和休止期4个阶段。通过连续两年每月对岩虫性腺组织切片观察可以确定，在山东省乳山海区的岩虫性腺发育为1年1个周期。12月至翌年6月为增生期；7～8月为成熟期；7月下旬至8月为排放期；9～11月为休止期，其中7月下旬至8月中旬为繁殖盛期。岩虫的性腺起源于体腔腹面生殖上皮。生殖细胞发生时不出现滋养细胞。除休止期外，生殖细胞持续发生，成熟时多次排放。雄性生殖细胞形成合胞体（syncytium），精子为原始类型。雌性生殖细胞不形成合胞体，卵母细胞在发育的早期阶段，卵黄发生期问从卵巢（生殖上皮）排入体腔中，并在体腔中发育。卵细胞成熟时，有卵外膜，结构复杂。     

黄颡鱼性腺与体重比例关系随时间的变化

在7～11月间对2龄黄颡鱼的性腺变化进行研究，实验证明，黄颡鱼亲鱼的性腺在7月相对最发达，性成熟系数也最高，而后卵巢和精巢分别以不同速率退化吸收，雌鱼在10月左右性成熟系数达到1．2％左右越冬，而雄鱼在7～11月间性成熟系数持续下降。     

雌性克氏原螯虾性腺发育及相关系数的周年动态研究

建立了克氏原螯虾(Procam barus clarkii)生殖群体的平均体长、体重、性腺重及肝脏重的周年统计值,并利用怀卵量、抱卵量、相对繁殖力等生态学参数建立性腺发育数学模型。结果显示:雌性螯虾初始怀卵和抱卵的理论体长分别为5.6 cm和5.8 cm,理论最大怀卵量和抱卵量分别为1963粒和1136粒;通过模拟Logistic曲线,得到怀卵量随体重增长的3个关键点即始盛期、高峰期和盛末期,分别为16.87 g、36.53 g和56.18 g;雌性克氏原螯虾理论最大相对繁殖力的体长为9.22 cm,最大值为19.78粒/g;其理论最大体长为15.01 cm且当体长小于3.43 cm时性腺尚未发育。另外,本研究还分析了克氏原螯虾产卵群体的性成熟时间与结构。     

长薄鳅的精巢发育和精子发生

应用组织学和超微结构方法研究了长薄鳅(Leptobotia elongate Bleeker)精巢发育和精子发生。结果显示:长薄鳅精巢一对,其发育过程可划分为6个时期,Ⅰ期性腺肉眼无法分辨雌雄。组织学结构显示长薄鳅的精巢属于小叶型,根据发育过程中细胞的大小、核仁多少、细胞核和细胞质浓缩的程度将精子发生划分为6个时相。超微结构下精原细胞分为初级精原细胞和次级精原细胞,成熟精子分头部、中片和尾部3个部分,尾部有侧鳍,具"9+3"式微管结构。