甜樱桃离体叶片再生的研究

利用甜樱桃的无菌苗叶片做外植体,进行离体叶片再生不定芽研究。结果表明:培养基中添加的激素浓度、种类和配比均影响不定芽再生,6-BA和NAA组合诱导甜樱桃离体叶片再生的活性较强;在MS 6-BA3mg/L NAA0.2mg/L GA30.5mg/L AgNO35.0-10.0mg/L培养基上,通过3次继代培养的不定梢的叶片,再生不定芽的频率达6.4%,确定良好的生根培养基为1/2MS IBA 0.7mg/L NAA0.2mg/L 蔗糖20g/L 琼脂7g/L,生根率可达75.1%。     

喀什哈尔葡萄组织培养及再生体系的建立

以喀什哈尔葡萄单芽茎段为材料,进行了离体组织培养并以实验获得的喀什哈尔葡萄组培苗进行了外植体器官直接再生研究.结果表明:喀什哈尔葡萄单芽茎段最适初始培养基是:MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.01 mg/L,侧芽萌芽率达100;;最适继代培养基是:MS+KT 0.1 mg/L+IBA 0.4 mg/L,同时伸长生长与生根生长,生根率达100;.探讨了喀什哈尔葡萄器官再生的影响因素,并以叶片为试材,建立了植株再生体系.叶片不定芽再生的最佳培养基是MS+6-BA 2.0 mg/L+IBA 0.2 mg/L ,再生率为14.3;;最佳生根培养基是MS+KT 0.1 mg/L+IBA 0.4 mg/L,生根效果良好,生根率为92;.     

软籽石榴(Punica granatum L. cv. Yushizi)叶片再生体系的研究

为建立软籽石榴的离体高效再生体系,试验以新梢为材料建立了软籽石榴的无菌体系,并试验了不同激素组合对软籽石榴增殖效果的影响;以叶片为外植体研究了不同培养基组合对不定芽再生频率和伸长的影响。结果表明,茎段增殖培养的最适培养基为MS+6-BA 0.3 mg/L+KT 0.3～0.4 mg/L+NAA 0.1 mg/L;叶片不定芽诱导的最适培养基为MS+TDZ 0.6 mg/L+NAA 0.2 mg/L,在不定芽诱导培养基中添加0.6 mg/L的GA3对不定芽的伸长效果较好。在1/2MS+NAA 0.2 mg/L+IBA 0.2 mg/L+AC0.5 g/L培养基增殖培养所得芽苗生根效果最优。     

吴屯杨再生体系的建立

以吴屯杨叶片为材料,探讨了不同消毒时间、不同激素以及不同部位叶片对吴屯杨叶片再生的影响,建立了吴屯杨叶片再生体系.试验表明:外植体最佳消毒时间为7 min,叶片分化不定芽的最佳培养基为MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.15mg/L,抽茎培养基以MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.15mg/L+GA(3)1.0 mg/L为最佳,最佳生根培养基为1/2MS+IBA 0.2mg/L+NAA 0.03mg/L.     

京玉1号甜瓜高效再生体系的建立

以京玉1号甜瓜为材料,研究了外植体不同部位、苗龄、激素组合等因素对植株离体再生的影响,建立了以子叶为外植体的高效再生体系.结果表明:甜瓜子叶生长6 d时最佳,用Ms+6-BA 2.0 mg/L诱导分化培养基,不定芽诱导率可达88.67%;诱导不定芽伸长生长以MS+GA32 mg/L+KT 2 mg/L为最佳,伸长率达83.33%;伸长的不定芽在MS+IBA 0.5 mg/L上生根良好,外植体生根率达91.67%.     

‘秦美’猕猴桃叶片高频直接再生体系的建立

以‘秦美’猕猴桃无菌苗叶片为外植体,通过不定芽诱导、继代增殖和生根培养基的筛选,建立高频直接再生体系.结果表明,叶片出芽最佳培养基为MS+5.0mg/L 6-BA+0.2mg/L NAA,40d出芽率达100%,每个叶盘平均出芽7.4个;不定芽继代增殖最佳培养基为MS+5.0mg/L 6-BA+0.2mg/L NAA+0.1mg/L GA3,每30d继代1次,1~5代平均繁殖系数达6.43;不定芽生根最佳培养基为1/2 MS+0.7 mg/L IBA,30d生根率为91.11%.在土壤营养钵中,试管苗30d移栽成活率达92.47%.本试验成功建立了‘秦美’猕猴桃的叶片高频直接再生体系,为其遗传转化奠定了基础.     

苹果M_7砧木组织培养与抗性筛选

以M7组培苗为试验材料,进行继代扩繁和卡那霉素抗性筛选研究。结果表明,M7芽苗在MS+4.0 mg/L6-BA+0.3 mg/L IBA(3%蔗糖)固体培养基中继代时,出现严重的玻璃化,而MS+1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA(3%蔗糖)固体培养基可大大改善其玻璃化程度,使其恢复健康生长;卡那霉素对M7叶片再生、新梢增殖、新梢生根均有抑制作用,并且随卡那霉素浓度增加,M7叶片再生率、新梢增殖率、新梢生根率不断下降;M7叶片愈伤组织形成、愈伤组织生根、新梢增殖及新梢生根对卡那霉素的敏感浓度分别为20、5、40、10 mg/L。     

鄂梨2号叶片高效再生体系的建立

以早熟砂梨品种鄂梨2号组培苗叶片为外植体,建立叶片再生体系。结果表明,鄂梨2号叶片再生不定芽最佳培养基为NN69+1.0 mg/L TDZ+0.1 mg/L IBA,愈伤组织再生率达到100%,不定芽再生率为36.67%;不定芽增殖最佳培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L IBA,增殖系数为2.19;不定芽在1 000mg/L ABT中浸蘸5 s后接种在添加500 mg/L活性炭的1/2MS培养基上,生根率最高,为66.67%;试管苗移栽成活率为84.44%。     

红掌组织培养再生体系建立的研究

以红掌"骄阳"幼嫩叶片为材料,筛选出红掌愈伤组织诱导、不定芽分化、生根的最佳培养基及激素配比。结果表明:红掌愈伤组织诱导的最佳培养基为改良MS+6-BA 1.0 mg/L+2.4-D0.5 mg/L,不定芽分化培养基为改良MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L,生根培养基为改良MS+IBA 0.6 mg/L+IBA 0.3 mg/L,生根率达到100%。     

武隆猪腰枣的组织培养研究

以武隆猪腰枣为试材,以茎尖、带芽茎段、节间和叶片为外植体,开展了组织培养研究.结果表明,外植体以带芽茎段最好;适宜的初代培养基以1/2MS+1mg/L 6-BA+0.2mg/L NAA,接种的带芽茎段萌芽快,其愈伤组织的不定芽再生率达53.3%;最佳不定芽继代培养基为MS+1mg/L 6-BA+0.2mg/L IBA,增殖系数达3.77;不定芽在1/2MS+0.3mg/L IBA和1/2MS+0.3mg/L IBA+10g/L AC培养基上生根效果较好,生根率达90%~96.67%.     

苹果属植物再生体系优化及长富6号遗传转化体系的建立

以苹果栽培品种长富6号和砧木湖北海棠、八棱海棠3种苹果属植物的无菌生根苗和继代苗叶片为材料,研究不同苹果属植物生根苗与继代苗叶片间的再生差异和暗培养时间对苹果属植物生根苗叶片再生的影响;以长富6号生根苗叶片为受体材料,对影响长富6号遗传转化的因素进行优化,对获得的抗性芽进行PCR和RT-PCR检测。结果表明:3种苹果属植物生根苗叶片的再生能力优于继代苗,暗培养21 d时,3种苹果属植物生根苗叶片的再生状况最佳;在菌液OD600为0.5、浸染时间9 min、共培养时间3 d和潮霉素选择压1.0 mg/L体系中抗性芽诱导率最高。用PCR和RT-PCR对所获得的抗性芽检测,结果初步证实外源基因已成功导入长富6号并在转录水平上表达。     

水分胁迫对桃、草莓、板栗和平邑甜茶叶片、茎及根中甜菜碱含量的影响

以桃、草莓、板栗和平邑甜茶4个树种为试材,对水分胁迫下其叶片、茎以及根中甜菜碱含量的变化进行了初步探讨,结果表明:在正常供水条件下,各树种的叶片、茎和根中都有一定量的甜菜碱,不同树种、同一树种的不同器官甜菜碱的含量均不同;板栗的甜菜碱含量最高,平邑甜茶的含量最低;叶片的甜菜碱含量最高,根部的含量最低。水分胁迫下,各树种的甜菜碱含量都显著增加,不同树种变化幅度不一。胁迫程度不同,甜菜碱含量的变化趋势也不同。轻度水分胁迫下,平邑甜茶增幅最大,其次是桃和草莓,板栗增幅最小;中度水分胁迫下,平邑甜茶的增幅最大,其次是板栗、桃、草莓。     

平邑甜茶子叶和下胚轴离体再生不定芽的研究

为了建立高效的平邑甜茶离体再生体系,以平邑甜茶子叶和下胚轴为外植体,研究了不同外植体部位、暗培养时间、基本培养基、激素种类和浓度对不定芽再生的影响.结果表明,近轴端子叶的再生频率是远轴端子叶的3.1倍、下胚轴的3.7倍.在附加不同浓度的NAA、IBA与TDZ的SC培养基上,近轴端子叶的不定芽再生率达90％以上.在附加1...     

部分湖北海棠种质的鉴定及亲缘关系分析

用17对SSR引物对来自鄂西地区的兴山、房县、竹溪、宣恩、鹤峰、建始以及山东临沂等地33份湖北海棠种质和2个苹果属近缘种进行了种质鉴定和亲缘关系分析.在33份湖北海棠中共扩增出121个等位基因,平均每个位点7.12个,平均多态性比率为98.3%;除GD15、GD162和Z71981外的14对引物中任意一对均可区分所有供试材料,在17个SSR位点上共检出供试33份湖北海棠试材分属6个基因型,表明湖北海棠种下存在较高的遗传多样性.此外,倍性检测结果表明所有供试材料均为三倍体基因型.     

平邑甜茶新根扩展蛋白基因MhEXP1的cDNA全序列克隆及表达

【目的】对平邑甜茶[Malus hupehensis（Pamp）Rehd. var pinyiensis Jiang]新根扩展蛋白基因进行克隆和表达分析,为揭示扩展蛋白在平邑甜茶根系生长发育中的功能打下基础。【方法】利用RT-PCR结合RACE技术克隆扩展蛋白同源基因,并通过Northern杂交研究其在不同器官中的表达情况及吲哚丁酸（IBA）的处理效应。【结果】成功地从平邑甜茶白色新根中获得了一个全长的扩展蛋白基因,命名为MhEXP1,GenBank登录号为DQ538346。MhEXP1 cDNA全长1 111 bp,含有771 bp的完整开放阅读框,编码257个氨基酸,预测分子量和等电点分别为27.8kD和8.9。序列分析表明,MhEXP1具有扩展蛋白的典型结构,即氨基酸序列N端有８个半胱氨酸残基,1个组氨酸（His-Phe-Asp,HFD）域,C末端存在4个保守的色氨酸残基。Northern杂交表明,该基因在平邑甜茶叶片中表达量很低,但在新根中大量表达并受IBA诱导,且随着IBA处理时间的延长表达量逐渐增加。【结论】成功地从平邑甜茶中克隆了一个全长的扩展蛋白基因MhEXP1,该基因在叶片中表达量很低但在新根中大量表达,并受IBA诱导;MhEXP1参与IBA调节的平邑甜茶根系生长发育。     

平邑甜茶叶片光合速率及叶绿素荧光参数对氯化镉处理的响应

 【目的】研究氯化镉处理对平邑甜茶叶片光系统Ⅱ(PSⅡ)活性、光合速率影响及其相互关系,为进一步揭示镉伤害机理提供理论依据。【方法】平邑甜茶在含不同浓度氯化镉1/2 Hoagland营养液中培养30 d后,测定其叶片光合速率(Pn)、气孔导度、胞间CO2浓度和荧光参数等,分析氯化镉处理后这些参数间的关系。【结果】在氯化镉处理下,平邑甜茶叶片光合速率和气孔导度显著降低,胞间CO2浓度增加,300 μs时的叶绿素荧光强度(Fk)提高,PSⅡ最大光化学效率(Fv/Fm,φPo)、用于电子传递的量子产额(φEo)、光化学性能指数(PIABS)以及有活性的反应中心的密度(RC/CS)明显下降,并且这些参数的变化幅度随着氯化镉浓度的增加而提高;通径分析显示,300 μs时的相对可变荧光强度(VK)及其可变荧光Fv占(J相的荧光强度Fj-O相的荧光强度Fo)振幅的比例(WK)对Pn的直接作用高于其它荧光参数。【结论】氯化镉使平邑甜茶叶片PSⅡ供体侧、受体侧和反应中心受到显著伤害,从而降低了PSⅡ活性和光合速率;在氯化镉处理下,VK和WK对Pn的直接作用比较大。     

明水梨叶片不定芽再生体系的建立

以‘明水’梨(Akemizu)叶片为外植体,研究了不同基本培养基,不同浓度噻重氮苯基脲(TDZ)和吲哚丁酸(IBA)的组合,不同暗培养时间以及不同浓度的硝酸银(AgNO3)对梨叶片不定芽再生的影响。试验结果表明,在NN69+TDZ 1.5mg/L+IBA0.2 mg/L+AgNO31.0 mg/L中暗培养25 d后,叶片不定芽再生率最高,达到71.8%。     

β-氨基丁酸对湖北海棠防御酶系活性和超微弱发光的诱导作用

经1000μg/mlβ-氨基丁酸(-βABA)喷雾处理后,湖北海棠叶片中POD、SOD、PAL、PPO活性均升高,并在处理后第5~7天内,活性达到最高,在处理后11天内仍高于对照。-βABA处理也促进湖北海棠叶片的超微弱发光,其变化趋势与抗性酶系活性类似。     

缺锌苹果树有机酸与锌吸收分配的关系

【目的】研究缺锌大田富士苹果树、苹果幼树和苹果树常用砧木平邑甜茶[Malus hupehensis(Pamp.)Rehd.]幼苗有机酸与锌吸收分配的关系,探讨有机酸影响锌吸收分配的作用机理。【方法】采用盛果期苹果树大田栽培、两年生幼树砂培和平邑甜茶幼苗溶液培养法进行试验。【结果】萌芽期小叶病树根系R0-1.5、R1.5-3、R3-5和R5-15锌和有机酸浓度呈现高于正常树的趋势,盛花期二者的浓度呈现低于正常树的趋势,生理落果期小叶病树根系R0-1.5、R1.5-3、R3-5和R5-15锌浓度显著大于正常树。与正常树相比,有机酸浓度小叶病树R0-1.5和R1.5-3中下降,R3-5和R5-15呈现升高的趋势,小叶病树根系锌吸收利用和有机酸代谢运输节奏发生改变,大田和水培试验发现,苹果树根系有机酸的水平与锌水平有关。缺锌导致盆栽幼树吸收根有机酸含量的升高。与pZn2+10.7相比,水培平邑甜茶pZn2+11.3处理1d,根中锌浓度显著下降,根和茎中草酸和苹果酸的浓度升高了1.09-1.35倍,有机酸向根系的分配比例增加,根系锌吸收速率显著增加;处理20d,平邑甜茶植株中的锌浓度和有机酸浓度及叶中有机酸的分配比例均显著下降。【结论】缺锌改变了苹果根系锌吸收和有机酸的代谢运输节奏,促进了有机酸向地下部的分配,有机酸在促进锌吸收分配方面起重要作用。     

苹果属植物无融合生殖特性研究

本文用去雄套袋，不去雄套袋和去雄授粉套袋法。研究了湖北海棠等７个苹果属种或生物型的无融衙生殖特性。结果表明，毛山定子Ｍａｌｕｓ ｍａｎｄｓｈｕｒｉｃａｋｏｍｏｒｏｖ。株眉海棠Ｍ．ｚｕｍｉ Ｒｅｈｄ不具无融合生殖特性。湖北海堂Ｍ．ｈｕｐｅｈｅｎｓｉｓ，Ｒｅｈｄ。不同生物型间无融合生殖特性差异很大，其特性与其倍性有明显相关性。