萌发期干旱胁迫下棉花转录因子的表达

[目的]检测所筛选的转录因子GhNAC 1-6、GhMYB、GhDREB、GhWRKY在新疆主栽品种新陆早17号中是否响应干旱胁迫。[方法]通过实时荧光定量PCR检测萌发不同时期,在子叶和胚根中转录因子的表达变化。[结果]所有筛选的转录因子都响应PEG模拟干旱胁迫,在胚根中,转录因子集中在4d响应PEG胁迫。[结论]在棉花种子萌发期干旱胁迫下,所筛选的转录因子都响应干旱胁迫,且在胚根中NAC 1、MYB、WRKY倍数较大。     

茉莉酸甲酯对棉花抗旱效果的影响

为探讨茉莉酸甲酯(Methyl Jasmonate,MeJA)对棉花抗旱作用的影响,采用质量分数为2.5%聚乙二醇(PEG6000)模拟干旱胁迫处理,检测MeJA对干旱胁迫下棉花的含水量、光合作用、渗透胁迫和抗氧化损伤的生理生化指标。结果表明:2.5μmol·L-1 MeJA处理能够使干旱胁迫下棉花的相对含水量和总叶绿素质量分数分别增加22.11%和40.58%,渗透调节性物质甜菜碱、可溶性糖和脯氨酸的质量分数均显著增加,但渗透势降低20.29%,抗坏血酸质量分数增加38.19%,超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活性分别升高28.54%和46.19%,但O~-·2、H_2O_2则分别降低43.71%和84.85%,显著降低丙二醛(MDA)质量摩尔浓度和相对电导率。而加入MeJA的抑制剂水杨苷异羟肟酸(SHAM)后,消除了MeJA对棉花抗旱性的促进效应。说明MeJA通过调节渗透胁迫和氧化损伤提高棉花的抗旱性。MeJA能够在生产实践中用于提高棉花的抗旱性。     

花花柴组织培养与植株再生体系的优化

【目的】探讨植物生长调节剂、外植体及NaCl等因子对花花柴愈伤组织诱导、分化与植株再生的影响,并优化花花柴的再生植株体系,建立直接从茎端诱导丛生芽的植株再生体系。【方法】对生长约为2个月的花花柴植株进行不同的处理。采用不同浓度组合的细胞分裂素6-BA(6-Benzylaminopurine)和生长素NAA(α-Naphthaleneacetic acid)的MS(Murashige and Skoog)培养基(0.8%(w/v)琼脂粉)。【结果】最佳的愈伤组织诱导培养基为MS+6-BA 1.2 mg/L+NAA 0.6 mg/L;愈伤组织分化的最佳培养基为MS+6-BA3.0 mg/L+NAA2.0 mg/L;从外植体直接诱导不定芽的最佳培养基是MS培养基;诱导根的最佳培养基是1/2MS+NAA mg/L。【结论】花花柴叶片是愈伤组织形成的最佳材料,NaCl胁迫对愈伤组织的诱导有一定的抑制作用。     

不同萌发率胡杨种子萌发前后同工酶动态变化分析

对不同萌发率的胡杨种子萌发前后酯酶同工酶、过氧化物酶同工酶和超氧化物歧化酶同工酶电泳谱带的动态变化进行分析.研究表明:对于吸胀的种子,过氧化物酶同工酶没有表达;酯酶同工酶得到表达,且萌发率中等的种子表达最高;超氧化物歧化酶同工酶也得到表达,但萌发率高的种子几乎没有表达;对于干种子,酯酶同工酶没有表达,过氧化物酶同工酶得到表达,且萌发率中等的种子表达最高;超氧化物歧化酶同工酶得到充分的表达.     

一种快速提取盐桦叶片总RNA的方法建立

从植物组织中提取高质量的RNA是进行植物分子生物学研究的必要前提和关键。盐桦细胞中存在大量的胶质和多糖类物质，用Trizol试剂根本不能获得RNA。本研究采用CTAB-LiCl法，提出了一种适合盐桦叶片总RNA的简单快速提取方法。消除了蛋白质、DNA、多糖、多酚等污染。该方法提取的盐桦叶片总RNA，完整性好、纯度高，可用于RT-PCR等实验操作，此法无需特殊试剂和贵重仪器，实验结果稳定，重复性好，适合富含多糖和脂质的植物组织总RNA的提取。     

连续热裂解法大规模提取质粒DNA

选择质粒保有率高及最适合发酵的TOP10菌株,在传统的煮沸裂解法提取质粒的基础上进行了提取方法的改进,使用恒流泵和热交换螺旋管,使菌体在流动过程中完成热裂解,释放质粒DNA。改进后的方法裂解温度可降到70",提取工艺流程简单,缩短了提取时间,提高了质粒DNA的提取效率。利用本方法提取的质粒大小正确、纯度合格,每升发酵液得率平均为100mg质粒DNA。     

新牧一号苜蓿MvP5CS基因的克隆和功能分析

为研究苜蓿（Medicago sativa）耐盐分子机制，为抗逆分子育种提供依据，通过同源克隆和RT PCR技术克隆了新牧一号杂花苜蓿（M.varia Xinmu 1）的MvP5CS基因， MvP5CS全长2 148 bp，Genbank登录号为：EU371644。荧光定量PCR分析发现，在盐胁迫下MvP5CS基因表达明显上调，说明 MvP5CS与苜蓿的耐盐性相关。利用农杆菌介导的叶盘转化法，将MvP5CS基因成功转入烟草（Nicotiana tabacum），盐胁迫下转MvP5CS基因T1代烟草萌发率和根长均高于非转基因烟草。表明新牧一号苜蓿P5CS基因能够提高转基因烟草的耐盐性。     

永定六月红芋氮磷钾施肥效应和适宜用量研究

应用田间试验研究永定六月红芋的氮磷钾施肥效应和适宜用量。10个试验结果表明,土壤基础肥力对芋头产量的平均贡献率为58.7%,且产量与土壤肥力水平成正相关。施用氮磷钾平均分别增产23.7%、14.9%和14.6%,达到显著水平;氮磷钾肥的平均产投比分别为10.9、11.2和6.3。氮磷钾的平均推荐施肥量为N167 kg.hm-2、P2O574 kg.hm-2和K2O 179 kg.hm-2,三要素比例为1∶0.44∶1.07,但不同土壤肥力等级的适宜用量有明显差异,与土壤速效氮磷钾水平有关。研究结果可为六月红芋测土配方施肥示范推广和配方肥生产提供科学依据。     

C/EBPs与脂肪细胞的分化调控

C/EBPs(CCAAT/enhance binding proteins,C/EBPs)由于具有激活特定基因DNA增强子CCAAT重复序列的功能而得名。C/EBPs属于bzip(Basic-Region/Leucine-Zipper)类蛋白,该家族有C/EBPα、β、δ3个成员参与脂肪细胞的分化。它们的羧基端结构相同,其富含碱性亮氨酸的指状结构含有55~     

叶绿体型转昆虫抗冻蛋白基因烟草的耐寒性

根据已构建的大豆叶绿体表达载体pJY01，设计特异性引物，将昆虫抗冻蛋白基因MpAFP149插入此载体中构成叶绿体表达载体pJY01-MpAFP149，利用基因枪轰击法转化烟草，经壮观霉素筛选获得4株叶绿体型转抗冻蛋白基因烟草株系。PCR和PCR-Southern结果显示外源基因已整合至烟草叶绿体基因组中但同质化水平不高，RT-PCR结果也表明昆虫抗冻蛋白基因已发生了转录。将野生型烟草、叶绿体型转抗冻蛋白基因烟草及核转化T₁代转抗冻蛋白基因烟草(pCAMBIA1302- MpAFP149)于–1℃低温处理3 d，观察耐寒表型及测定相对电导率。结果表明, 叶绿体型转基因烟草的耐寒表型优于野生型烟草，但与核转化的T₁代转抗冻蛋白基因烟草无显著差异。处理3 d时，叶绿体型转基因烟草和T₁代转抗冻蛋白基因烟草的电导率分别为39.2%和38.2%，而野生型烟草已达73.7%。本实验获得的异质化转叶绿体抗冻蛋白基因烟草与转核基因烟草的耐寒力无差异。