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根据GenBank收录的微小牛蜱Bm91基因序列设计一对表达引物,以微小牛蜱幼蜱总RNA反转录合成的cDNA为模板,扩增获得了Bm91基因,其长度为1 908 bp,包含一个大小为1 833 bp的完整开放阅读框,编码611个氨基酸,该蛋白预期分子质量为83 ku。将Bm91基因片段亚克隆到原核表达载体pET-30a,构建重组原核表达载体pET-30a-Bm91,转化BL21宿主菌,经IPTG诱导,发现在0.8 mmol/LIPTG,诱导时间2 h,温度37℃条件下,目的重组蛋白表达量最大,约占蛋白总量的20%。SDS-PAGE检测表明,表达产物为分子质量为83 ku的融合蛋白,与预期大小一致;Western blot分析表明,表达产物能被兔抗微小牛蜱阳性血清所识别。 相似文献
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本研究基于非洲猪瘟病毒(African swine fever virus, ASFV)vp72基因设计引物,建立了能够快速检测非洲猪瘟病毒的环介导恒温扩增技术(loop-mediated isothermal amplification, LAMP)。将LAMP与OIE参考的PCR检测方法进行比较,并且应用LAMP对非洲猪瘟参考实验室提供的非洲猪瘟病毒17个毒株的基因组以及国内收集的50份猪的基因组、30份蜱的基因组进行检测。结果显示,本研究设计的引物具有良好的特异性和敏感性,所建立的LAMP能够成功扩增非洲猪瘟病毒17个毒株的基因组,而野外收集的猪和蜱的基因组检测均为阴性。因此,本研究所建立的方法能够用于非洲猪瘟的快速诊断以及防控。 相似文献
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一种用于非洲猪瘟病毒检测的PCR方法 总被引:2,自引:0,他引:2
基于非洲猪瘟病毒(ASFV)VP72基因设计引物,建立一种检测非洲猪瘟病毒的PCR方法。应用本研究所建立的方法与OIE参考的方法进行比较,并对参考实验室提供的非洲猪瘟病毒17个分离株的基因组以及本实验室收集的野外样品进行检测。结果显示:本研究设计的引物具有良好的特异性,与猪的其他病原没有交叉反应;其敏感性与OIE参考的方法相当;所建立的PCR方法能够成功扩增非洲猪瘟病毒17个分离株的基因组,野外样品检测均为阴性。根据上述研究结果,本研究所建立的方法具有很好的应用性,能够用于非洲猪瘟疫病的诊断以及防控。 相似文献
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芦笋属多年生宿根草本植物.一年种植,多年采收,3-15年为盛产期,平均每年亩产量1500公斤,亩收入6000元左右.近年来,我省种植面积逐年增加,是发展农村经济,增加农民收入的有效途径.为实现芦笋高产,现将其栽培技术介绍如下: 一、选用良种:玛丽、华盛顿500号、157、800等. 二、育苗:(1)播期:3-5月.(2)种子处理:先将种子放人冷水中漂去秕粒,再用1%多菌灵浸种24小时,然后加入30-35℃温水中浸泡3-4天(每天早、晚各换水一次),当种皮将破未破时,滤水拌细砂,置于20-25℃室内催芽,当有10%出芽时,即可播种.(3)播种:采用营养钵育苗. 相似文献
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[目的]对分离自湖北省大悟县的患病山羊体表脓包中的致病菌进行分析和鉴定,以确定脓包中细菌的分子分类学地位及药物敏感性。[方法]通过对分离株16SrRNA基因序列分析,结合细菌菌落形态和细菌生化特性分析进行细菌分离和鉴定,并对已鉴定的菌株进行药物敏感性试验,筛选出脓包细菌敏感性药物。[结果]从脓包分离的细菌分别为葡萄球菌属、大肠埃希氏杆菌属、不动杆菌属以及绿脓杆菌;药物敏感试验表明这些细菌对药物的敏感性不同,其中对头孢类、喹诺酮类、氨基糖苷类以及氯霉素等敏感。[结论]该研究可为该地区该病流行病学的研究与防治药物的研发提供参考。 相似文献
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子宫内膜异位症大鼠模型复制 总被引:3,自引:0,他引:3
取Wistar大鼠30只,用手术移植的 方法把自体子宫内膜组织2块分别移植到壁 腹膜与子宫系膜处,建立子宫内膜异位症大 鼠模型。术后4周,再次开腹,观察异位内膜 的存活情况、与周围组织的粘连程度及病理 学变化。结果发现腹膜和子宫系膜处移植内 膜的成活率及病灶的体积差异无显著性(P >0.05),腹膜处病灶与周围组织的粘连程度 显著轻于子宫系膜处病灶(P<0.01),移植 物外观呈囊状,表面有血管,光镜下观察见子 宫内膜细胞、间质细胞、腺体和血管,与正常 在位内膜相比腺体减少。该模型复制方法简 便,成功率高,是研究子宫内膜异位症较理想 的动物模型。 相似文献
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