砂梨扩展蛋白基因cDNA克隆及全序列分析

设计植物EXP扩展蛋白简并引物,以砂梨果实cDNA为模板,克隆得到EXP基因cDNA片段,该片段长465 bp。根据该片段序列,分别设计2条5’和3’末端扩增的特异引物,利用RACE技术,获得了该片段的5’端和3’端序列。用DNAMAN5.22软件对3个序列进行拼接和分析,获得了该基因的cDNA全长,命名为Pyp-EXP。该cDNA全长为1 395 bp,5’端起始密码子ATG始于72 bp,3’端终止子TAG止于830 bp,Ploy+(A)从1 363～1 395 bp。该基因已在GenBank基因数据库注册,注册号为EF602031。Pyp-EXP核苷酸序列有一个759 bp完整的开放阅读框,编码区与西洋梨、苹果、湖北海棠、桃的同源性分别为96%,96%,94%和86%;该cDNA推导编码252个氨基酸,含有1个组氨酸(His_Phe_Asp,HFD)功能域,与西洋梨、苹果、湖北海棠、桃中相应序列同源性分别为98%,97%,95%和93%。该基因的克隆为研究扩展蛋白的时空表达及其在果实发育和成熟过程中的作用奠定了基础。     

叶面喷施不同铁肥对苹果叶片缺铁黄化的防治效果

为探究不同复配铁肥对苹果幼苗缺铁黄化的防治效果,本研究选用了二年生‘红星’品种苗木,设置7个处理：0.3% FeSO4(T1)、0.3% FeSO4+0.3%柠檬酸铁（T2）、0.3% FeSO4+0.3%尿素(T3)、0.3% FeSO4+0.3% SNP(T4)、0.3% FeSO4+0.5%乙氧基改性聚三硅氧烷(T5)、0.3% FeSO4+0.1%碧护可湿粉剂(T6),以清水处理为对照(CK),分析各处理苹果叶片的叶绿素含量、荧光参数、叶片活性铁及全铁含量等。结果表明,与对照相比较,叶面喷施铁肥可显著提高‘红星’叶片的叶绿素含量,增加叶片生长量,同时具有提高叶片最大光化学量子效率Fv/Fm、实际光化学量子效率ΦPSⅡ值、叶片活性铁及全铁含量等效果。综合分析各项指标,T6处理（0.3% FeSO4+0.1%碧护可湿粉剂）处理效果较好。     

转番茄铁载体基因（LeIRT2）八棱海棠株系的鉴定

 【目的】选育具有抗缺铁能力的苹果属植物新种质。【方法】通过半定量式RT-PCR检测、印迹杂交、营养液pH的变化和低铁(铁浓度为10-6 mol•L-1)水培条件下，根系和叶片的金属元素含量分析。【结果】在通过Southern杂交获得的9个转番茄铁载体蛋白基因八棱海棠（Malus robusta Rehd.）株系中，有6个转基因株系成功转录，目的基因在叶片和根系中都有表达。其中2个在缺铁情况下显著提高了根系总铁的含量和叶片中活性铁的含量，同时也大幅度提高了根系和叶片中锌的含量。【结论】转番茄铁载体蛋白基因八棱海棠株系表现出较强的抗缺铁胁迫能力。     

不同基质对红颊草莓生长发育及果实品质的影响

本研究以红颊草莓为试验材料,在温室立体阶梯式高架栽培模式下,通过对比国外专用基质和国内基质对“红颊”草莓的生长和果实品质的影响,从而筛选出适合“红颊”草莓的基质。结果表明上层国外专用基质红颊草莓在营养生长阶段比国内基质上层生长健壮;中层和下层国外专用基质和自己配制基质处理对草莓营养生长发育没有显著性差异;果实品质方面无论是上层、中层或下层,国外专用基质和国内基质处理也没有显著性差异。同一基质上、中、下三层之间果实品质也没有差异。综合这两种基质对草莓植株生长和果实品质等指标的影响,两种基质对草莓的生长发育差异不显著,国内基质完全可以代替国外专用基质使用。     

不同继代培养次数对苹果八棱海棠离体培养和遗传转化的影响

以苹果八棱海棠离体新梢和幼叶为外植体,研究不同继代次数对其离体繁殖、再生和遗传转化的影响。结果表明,随着继代培养次数的增加,继代10次和48次的八棱海棠离体增殖倍数、生根能力、不定芽的再生频率、每外植体再生芽数和GUS基因瞬时表达率均显著高于继代5次的;继代10次的增殖倍数和GUS阳性率明显多于继代48次的,其它指标相互间差异不显著;说明继代10次的芽苗较适合用于八棱海棠离体培养的外殖体材料,其幼叶较适于遗传转化研究。     

柿蒂去除萼片和激素处理对甜柿果实生长发育及品质的影响

以甜柿品种"阳丰"为试验材料,在果实迅速生长期人工去除柿蒂萼片,并在萼片剪口处涂抹不同激素.通过测定不同处理果实纵横径、单果质量、可溶性固形物含量、可溶性糖含量、可滴定酸含量等果实品质,来探究柿蒂对果实生长发育及品质的影响.结果表明,去除柿蒂后,柿果的生长发育受到明显的抑制,使用100 mg/L浓度的CA3处理能有效地减缓去除1个和4个柿蒂对柿果生长发育的影响,使柿果的生长恢复到正常水平;使用100 mg/L的ABA处理则可以促进去除1个柿蒂的柿果生长发育.去除柿蒂会影响柿果的单果质量以及可溶性糖含量,涂抹100 mg/L ABA可以促进柿果可溶性糖的积累.     

江苏丰县地区丰县“富士”苹果生产园叶片矿质营养元素适宜值的研究

通过对江苏丰县地区"富士"苹果果实品质与叶片矿质元素的关系分析,筛选出叶片矿质元素的适宜含量,为江苏黄河故道高效优质苹果园建设、叶片营养分析和施肥提供理论依据。研究以"富士"苹果为材料,测定了叶片中9种矿质元素含量及果实7种品质指标,同时,应用相关分析与主成分分析,研究了江苏丰县地区"富士"苹果叶片矿质元素和果实品质的关系。结果表明:前4个主成分累计贡献率达到了85.12%,其中第一个主成分主要是硬度、可溶性固形物、可溶性糖、维生素C的信息;第二个主成分主要是单果重、果形指数、可滴定酸的信息;第三个主成分主要是可滴定酸、维生素C的信息;第四个主成分主要是单果重和维生素C的信息。单果重、可滴定酸和维生素C是果实品质评价的重要指标,并获得了江苏丰县地区"富士"苹果园叶片矿质元素含量适宜值,分别为:N(14.93~17.74 g/kg)、P(0.77~1.02 g/kg)、K(10.29~13.43 g/kg)、Ca(12.45~17.88 g/kg)、Mg(2.52~4.00 g/kg)、Fe(274.15~493.68 mg/kg)、Mn(40.82~98.85 mg/kg)、Cu(85.36~354.26 mg/kg)、Zn(39.55~83.76 mg/kg)。     

转基因八棱海棠与苹果品种亲和性的微嫁接早期鉴定

用微嫁接法鉴定嫁接亲和性的结果表明,不同培养基和培养方法对嫁接成活率和生根率有较大影响,生根 愈伤同步的方法可以同时获得较高的嫁接成活率和生根率。转番茄铁载体蛋白基因八棱海棠(Malus micromalus)与 苹果(Malus pumila)品种富士,嘎拉以及新红星嫁接成活率分别为93.33％,92.86％,73.34％。嫁接后15 d左右,接穗 新叶开始生长;嫁接后2个月,嫁接苗移栽成活率分别为73.07％,73.91％和55％;移栽后3个月,3种嫁接苗的茎杆 粗度均匀,无大小脚现象。初步结果显示,转基因八棱海棠与富士、嘎拉均具良好的嫁接亲和性,而与新红星的嫁接 亲和性稍差。     

通过玻璃化超低温处理脱除草莓轻型黄边病毒(SMYEV)研究

以草莓品种明宝为材料,取茎尖做初代培养,继代扩繁5次后,取2mm左右的茎尖,利用玻璃化超低温技术对SMYEV进行脱除,并利用结合内标的多重RT-PCR技术对再生植株进行病毒检测。结果表明,在病毒脱除过程中,预培养蔗糖浓度为0.5mol/L,处理3d;装载处理为25℃,60min;玻璃化处理为0℃,120min;液氮处理60min后,进行40℃水浴2min,草莓茎尖的存活率为76%,而草莓轻型黄边病毒的脱除率为95%。只有通过液氮处理才可以脱除该病毒,液氮处理前的玻璃化处理脱毒率为0。利用超低温脱毒法可以简便有效地脱除SMYEV。     

拉枝对苹果幼树生长发育的影响

研究了刻芽和拉枝处理对苹果幼树生长发育的影响。结果表明:当刻芽伤口到芽体的距离为6 mm时,萌芽率达到最高(90.5%)。当拉枝角度为45°时,枝条的加长生长量最大;在70°时加粗生长量最大;在90°时萌芽率最高(74.0%)。当拉枝角度为110°时叶片含水量最高(63.9%)。叶片总叶绿素含量在拉枝角度为70°时达到最高(3.190 mg/g)。拉枝角度为45°时,叶片含氮量极显著高于其它处理;在110°时叶片中磷、钾、铜、锰的含量均最高;当拉枝角度为70°时,叶片中镁、铁、锌含量均达到最高。叶片中总碳含量随着拉枝角度的增大而减少。新梢中碳和氮含量均在90°时最高,但C/N在110°时最大。