PKC、PKA和TPK在血小板激活中的作用

目的：研究蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）,蛋白激酶Ａ（ＰＫＡ）,酪氨酸蛋白激酶（ＴＰＫ）在血小板聚集激活中的作用。方法：本实验是在阿斯匹林阻断花生四烯酸代谢,Ａｐｙｒａｓｅ去除ＡＤＰ情况下,利用３２Ｐ－ＮａＨ２ＰＯ４标记猪血小板,然后以ＰＭＡ、凝血酶、ＰＧＦ１、腺苷等处理。以血小板聚集仪测定血小板聚集;ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分离血小板蛋白;并进行放射自显影;碱处理电泳凝胶检测酪氨酸蛋白激酶（ＴＰＫ）底物;ＴＬＣ进行磷酸氨基酸分离。结果：（１）随着ＰＭＡ激活ＰＫＣ,血小板发生聚集;（２）３５μｍｏｌ／ＬＰＧＦ１或１ｍｍｏｌ／Ｌｄｂ－ｃＡＭＰ不能抑制５０ｎｍｏｌ／ＬＰＭＡ诱导的血小板聚集,腺苷却能抑制ＰＭＡ诱导的血小板聚集（ＥＣ５０＝０．１ｍｍｏｌ／Ｌ）．（３）ｄｂ－ｃＡＭＰ、腺苷都不能抑制１００ｎｍｏｌ／ＬＰＭＡ诱导的４０ｋＤ蛋白磷酸化,ＰＫＡ激活不能抑制ＰＭＡ激活的ＰＫＣ。（４）在ＰＭＡ、凝血酶激活的血小板中,ＰＫＣ、ＴＰＫ都发生激活,４０ｋＤ底物既是ＰＫＣ的底物又是ＴＰＫ的底物。结论：ＰＫＣ和ＴＰＫ在血小板聚集中起着重要的调节作用。     

腺苷对猪血小板膜上磷脂酰肌醇激酶和磷脂酰肌醇-4-磷酸激酶的抑制作用

用差速离心法分离猪血小板膜，在适当条件下，用［ γ－３２ Ｐ） ＡＴＰ与其保温，观察３２Ｐ掺入磷脂情况。结果表明：（１）无外源性磷脂酰肌醇－４－磷酸（ＰＩＰ）时，３２Ｐ主要掺入ＰＩＰ；补充外源性ＰＩＰ后，３２Ｐ也可掺入磷脂酰肌醇－ ４， ５－二磷酸（ ＰＩＰ２） ９（ ２）腺苷及类似物 ５’－氧－ ５’－脱氧腺苷对３２ Ｐ掺入这两种磷脂均有强烈的抑制作用；（３）这种抑制作用呈剂量—效应关系（ＩＣ５０分别为８０μｍｏｌ／Ｌ和７０μｍｏｌ／ Ｌ），并与ＡＴＰ里竞争性。提示腺苷及类似物５’－氯－５’－脱氧腺苷这种抑制作用可能与其抑制血小板聚集作用有关。     

丹酚酸B对Cu~(2+)介导的LDL氧化修饰的抑制作用

目的：动脉粥样硬化（Ａｓ）是心脑血管病的主要病理基础。近年的研究表明,氧化修饰的低密度脂蛋白（ＯＸ－ＬＤＬ）是ＬＤＬ致Ａｓ的重要因素。因此,寻找和筛选有效的抑制ＬＤＬ氧化修饰的抗氧化剂是当前防治Ａｓ的热点。丹酚酸Ｂ（Ｓａｌｖｉａｎｏｌｉｃａｃｉｄ,Ｓａ１Ｂ）是从丹参中提取出的水溶性单体,具抗氧化性。本文采用无细胞氧化修饰系统（Ｃｕ２＋）对ＬＤＬ进行氧化修饰,研究Ｓａ１Ｂ对血浆ＬＤＬ氧化修饰的影响。方法：超速离心分离健康成人新鲜血中ＬＤＬ,分别与终浓度为０、１、５、１０、１５μｍｏｌ／ＬＳａ１Ｂ温育,然后加入Ｃｕ２＋（终浓度３μｍｏｌ／Ｌ）氧化修饰,于３７Ｃｏ共同温育２、４、６、８、１２ｈ。在每个时间点测定ＬＤＬ中ＴＢＡＲＳ生成量、ＬＤＬ中ＶｉｔＥ含量变化和荧光物质扫描。选择已知抗氧化剂ＶｉｔＥ、ＶｉｔＣ浓度均为５μｍｏｌ／Ｌ,与Ｓａ１Ｂ（５μｍｏｌ／Ｌ）重复上述实验操作。结果：Ｓａ１Ｂ可使ＬＤＬ中ＴＢＡＲＳ和荧光物质生成量明显减少,ＶｉｔＥ含量消失明显减缓,三项指标均与Ｓａ１Ｂ呈良好的效量关系。比较Ｓａ１Ｂ、ＶｉｔＥ和ＶｉｔＣ的抗氧化修饰的能力,当终浓度为５μｍｏｌ／Ｌ时,三者抑制氧化修饰的强度依次为：Ｓａ     

健康鸵鸟(1～6月龄)38项血清生化参数的测定

建立健康鸵鸟（Ｓｔｒｕｔｈｉｏｃａｍｅｌｕｓ）的血清全套生化参数,采用日本岛津ＣＬ ７２００型全自动生化分析仪,对３０只１～６月龄健康鸵鸟３８项血清生化参数进行测定．结果如下：（１）血清蛋白参数／ｇ·Ｌ－１：ＴＰ３１．８２,ＡＬＢ１５．４１,ＧＬＯ１６．１８（ＡＬＢ／ＧＬＯ０．９５）,Ａｐｏ Ａ１０．１２,Ａｐｏ Ｂ０．１４（Ａｐｏ Ａ１／Ａｐｏ Ｂ０．８０）;（２）血清酶参数／ｕ·Ｌ－１：ＡＬＴ１４．３,ＡＳＴ４５６．８（ＡＬＴ／ＡＳＴ０．３８）,ＧＧＴ３．４,ＬＤＨ１６０３．１,ＣＫ３９３６．８,ＣＫ ＭＢ１４３０．８,ＡＭＹ３４１５．１,ＡＫＰ５７１．７,ＨＢＤＨ３７３．３;（３）血清糖、蛋白质、脂类及其代谢产物参数／ｍｍｏｌ·Ｌ－１：ＧＬＵ９．４１,ＴＲＩ１．９７,ＢＵＮ０．９４,ＬＤＬ２．１９,ＨＤＬ１．５４,ＣＨＯ３．５８（ＨＤＬ／ＣＨＯ０．４１）;ＣＲＥ１２．６５μｍｏｌ·Ｌ－１（ＢＵＮ／ＣＲＥ０．０６３）,ＵＡ５０５．２４μｍｏｌ·Ｌ－１,ＴＢＡ３７．１μｍｏｌ·Ｌ－１,ＴＢＩＬ５．３２μｍｏｌ·Ｌ－１,ＤＢＩＬ３．２１μｍｏｌ·Ｌ－１,ＩＢＩＬ２．０８μｍｏｌ·Ｌ－１,ＴＴＴ４．１２ｕ;（?     

亚硒酸钠和维甲酸联合对HL-60细胞生长、分化的影响

目的：观察亚硒酸钠和维甲酸联合作用对ＨＬ－６０细胞生长、分化的影响,探讨两者的联合效应和作用机制。方法：以人早幼粒白血病细胞（ＨＬ－６０）为实验对象,设立对照、５．８μｍｏｌ／Ｌ亚硒酸钠、０．０１μｍｏｌ／Ｌ、０．１μｍｏｌ／Ｌ和１μｍｏｌ／Ｌ维甲酸（ＲＡ）以及５．８μｍｏｌ／Ｌ亚硒酸钠和０．１μｍｏｌ／ＬＲＡ两者联合６个实验组,分别在加药处理后１～５ｄ,每日收获细胞,利用台盼蓝排除法确定活细胞数并进行统计学处理,以观察加药后对ＨＬ－６０细胞生长的影响;收获的细胞做细胞涂片,用Ｗｒｉｇｈｔ－Ｇｉｅｍｓａ染色液染色,观察硒和ＲＡ对细胞形态分化的作用。与此同时,利用硝基四唑蓝（ＮＢＴ）还原实验,观察药物对ＨＬ－６０细胞功能分化的影响。结果：５．８μｍｏｌ／Ｌ亚硒酸钠和０．１μｍｏｌ／ＬＲＡ联合可显著抑制ＨＬ－６０细胞生长,且对细胞的毒性并无增加,强于两者的单独作用。两者联合可明显诱导该细胞向粒系细胞分化,处理５ｄ后有７２％的细胞分化成熟,联合对细胞的分化作用与１μｍｏｌ／ＬＲＡ（１０倍）的效果基本相同。而单用０．１μｍｏｌ／Ｌ维甲酸只有３９％的细胞分化成熟。ＮＢＴ还原实验表现出类似结果。文中讨论了硒与ＲＡ联合作     

Genistein抑制鸟嘌呤碱基氧化损伤的CGC/MS研究

目的：Ｇｅｎｉｓｔｅｉｎ具有很强的抗肿瘤活性,对生物膜的氧化损伤也具有保护作用。８－羟基鸟嘌呤是一种反映ＤＮＡ氧化损伤程度的既灵敏又稳定的指标,又是一种与肿瘤的发生发展有关的生物标记物。本文旨在研究Ｇｅｎｉｓｔｅｉｎ对鸟嘌呤氧化损伤形成８－羟基鸟嘌呤的过程的影响,探讨其抗肿瘤与抗氧化之间的联系。方法：对照组：鸟嘌呤＋ＤＭＳＯ＋Ｈ２Ｏ２＋Ｆｅ２＋;加药组：鸟嘌呤＋药物（Ｇｅｎｏｓｔｅｉｎ或槲皮素,ＤＭＳＯ为溶剂）＋Ｈ２Ｏ２＋Ｆｅ２＋。每一组ｎ＝４,各管总体积均为１ｍＬ,鸟嘌呤、Ｆｅ２＋、Ｈ２Ｏ２Ｇｅｎｉｓｔｅｉｎ及槲皮素终浓度分别为２ｍｍｏｌ／Ｌ、２５ｍｏｌ／Ｌ、４．５μｍｏｌ／Ｌ、６０μｍｏｌ／Ｌ、６０μｍｏｌ／Ｌ,ＤＭＳＯ终浓度在Ｇｅｎｉｓｔｅｉｎ药效实验中均为１４１ｍｍｏｌ／Ｌ（０．１％）。以ＣＧＣ／ＭＳ分析各样品中８－羟基鸟嘌呤含量。其差异采用成组设计的两样本均数比较的ｔ检验。结果：在槲皮素药效实验中,加药组与对照组中８－羟基鸟嘌呤含量的差别在统计学上没有显著性意义（Ｐ＞０．０５）。而在Ｇｅｎｉｓｔｅｉｎ药效实验中,加药组的８－羟基鸟嘌呤含量低于对照组（Ｐ＜０．０１）。结论：Ｇｅｎｉｓｔｅｉｎ可能通过     

蛋白激酶C在鼻咽癌细胞生长中的作用

通过耗竭蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ），用ＰＫＣ抑制剂和激活剂等方法，观察ＰＫＣ在鼻咽癌细胞系ＣＮＥ－２Ｚ生长中的作用。发现：随ＴＰＡ浓度增大，细胞ＰＫＣ含量降低，生长指数也逐渐减少；作用于ＰＫＣ蛋白催化区的ＰＫＣ抑制剂Ｓｔａｕｒｏｓｐｏｒｉｎｅ（ＳＴ）与作用于调节区的抑制剂Ｓｐｈｉｎｇｏｓｉｎｅ（ＳＳ）均抑制ＣＮＥ－２Ｚ细胞的生长，最低有效浓度分别为２×１０－７ｍｏｌ／Ｌ与１０－５ｍｏｌ／Ｌ，随浓度增大而作用增强；ＰＫＣ刺激剂ＯＡＧ（０．１～１００μｇ／ｍｌ）单独作用时对ＣＮＥ－２Ｚ的生长无明显影响，但４μｇ／ｍｌ可基本阻断ＳＴ或ＳＳ最低有效浓度的抑制效应。提示：ＰＫＣ在鼻咽癌细胞ＣＮＥ－２Ｚ生长中起重要作用，阻断ＰＫＣ的作用将为鼻咽癌的防治提供新的途径。     

蛋白激酶C抑制剂对CNE—2Z细胞周期的影响

目的：蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）抑制剂诱导ＣＮＥ－２Ｚ细胞凋亡时细胞周期的观察。方法：ＰＫＣ催化区抑制剂Ｓｔａｕｒｏｓｐｏｉｎｅ（ＳＴ）和调节区抑制剂Ｓｐｈｉｎｇｏｓｉｎｅ（ＳＳ），终浓度分别为１×１０＾－６ｍｏｌ／Ｌ和４×１０＾－５ｍｏｌ／Ｌ，诱导ＣＮＥ－２Ｚ细胞２４ｈ，用流式细胞仪（ＲＣＭ）分析。结果：诱导组细胞周期与对照组比较，ＳＴ使细胞Ｇ１和Ｓ期明显减少及Ｇ２期明显增加，（Ｐ〈０．０１），ＳＳ使     

催化光度法测定痕量α-萘酚

研究了α－萘酚对碘催化硫酸铈与亚砷酸氧化还原反应的抑制作用及其动力学条件。在此基础上建立了催化动力学光度法测定α－萘酚的新方法。研究结果表明,在０．３６ｍｏｌ／L　Ｈ２ＳＯ４,０．００１ｍｏｌ／ＬＣｅ（ＳＯ４）２,０．００１２５ｍｏｌ／ＬＡｓ２Ｏ３,０．０２５ｇ／ＬＮａＣｌ和０．０１ｍｇ／ＬＩ－溶液中测定α－萘酚,其线性范围为０．２０～２．３ｍｇ／Ｌ,表观摩尔吸光系数为２．５０×１０4Ｌ·ｍｏｌ(－１)·ｃｍ(－１),灵敏度Ｓａｎｄｅｌｌ为５．７７μｇ／ｃｍ２。     

家兔RAPD分析反应体系的优化

以家兔的基因组ＤＮＡ 为模板,研究影响家兔ＲＡＰＤ 扩增的因素。实验结果表明,Ｔａｑ酶、随机引物和Ｍｇ２ ＋ 浓度及模板ＤＮＡ 的纯度对ＲＡＰＤ 扩增影响较大。本实验建立了适于家兔ＲＡＰＤ 分析的反应体系：反应体积为２０μｌ,其中含有１ ×扩增缓冲液,２ ．０ｍ ｍｏｌ／Ｌ ＭｇＣｌ２ ,０ ．１ｍ ｍｏｌ／ＬｄＮＴＰ,０－２μｍｏｌ／Ｌ 随机引物,１ ．５ＵＴａｑ 酶,９０ｎｇ 模板ＤＮＡ     

亚硒酸钠和维甲酸联合对HL-60细胞DNA与蛋白质合成和细胞周期的影响

目的：观察亚硒酸钠和维甲酸联合作用对ＨＬ－６０细胞ＤＮＡ与蛋白质合成和细胞周期的影响,探讨两者的联合效应和作用机制。方法：以人早幼粒白血病细胞（ＨＬ－６０）为实验对象,设立对照、５．８μｍｏｌ／Ｌ亚硒酸钠和０．１μｍｏｌ／Ｌ维甲酸（ＲＡ）以及两者联合四个实验组,分别在加药处理后１～４ｄ收获细胞。利用３Ｈ－脱氧胸苷（３Ｈ－ＴｄＲ）和３Ｈ－亮氨酸（３Ｈ－Ｌｅｕ）参入实验以及流式细胞仪式进行分析。结果：５．８μｍｏｌ／Ｌ亚硒酸钠和０．１μｍｏｌ／ＬＲＡ联合可显著抑制ＨＬ－６０细胞的ＤＮＡ和蛋白质等生物大分子的合成,联合作用强于两者单独作用。流式细胞仪分析的细胞周期结果表明：单独硒组的ＨＬ－６０细胞在Ｇ２＋Ｍ期和Ｓ期有一定的阻滞;维甲酸的作用主要是阻滞Ｇ１期向Ｓ期移行,使Ｇ１期细胞蓄积,但该剂量单独作用较小;联合组主要表现在Ｇ１阻滞作用要大于单独ＲＡ组的作用,而对细胞的毒性作用并未增加。结论：生物大分子的合成和细胞周期分析方面的实验初步阐明了亚硒酸钠和维甲酸抑制ＨＬ－６０细胞增殖和诱导分化以及联合效应强于各自的单独应用机制。硒与维甲酸的联合具有潜在的临床应用价值。     

Cu2+、Ag+在水稻种子萌发及幼苗生长中的作用

水稻种子以１０μｍｏｌ／Ｌ ＣｕＳＯ４或１０μｍｏｌ／Ｌ ＡｇＮＯ３溶液浸种均显著促进种子萌发。幼苗在含２μｍｏｌ／Ｌ Ｃｕ＾２＋或者Ａｇ＾＋的水稻液中生长一天,叶绿素ｂ的含量降低,其叶片的过氧化物酶（ＰＯＤ）的活力增强,而当Ｃｕ＾２＋或Ａｇ＾＋浓度达到２０μｍｏｌ／Ｌ时,过氧化物同工酶（ＰＯＤ）明显降低。     

松罗铁兰的离体培养和快速繁殖技术研究

以顶芽和侧芽为外植体研究了松罗铁兰的离体培养和快速繁殖技术。结果表明,在附加ＢＡ４．１５μｍｏｌ．Ｌ＾－１和ＮＡＡ１．６１μｍｏｌ．Ｌ＾－１的ＭＳ培养基中可诱导外植外产生愈伤组织,将带有愈伤组织的外植体转移到ＭＳ＋ＢＡ４．１５－８．３０μＭＯＬ．Ｌ＾－１＋ＮＡＡ０．５４－１．６１αＭＯＬ．ｌ＾－１增减基中以后分化了大量的细芽。     

催化光度法测定痕量8—羟基喹啉

研究了在硫酸环境中８－羟基喹啉对碘催化亚砷酸与硫酸铈氧化还原反应的抑制作用及其动力学条件。据此建立了动力学的直接光度法测定痕量８－羟基喹啉的新方法。结果表明,在０２２５ｍｏｌ／ＬＨ２ＳＯ４,０００１２５ｍｏｌ／ＬＡｓ２Ｏ３,０００１ｍｏｌ／ＬＣｅ（ＳＯ４）２,００１ｍｇ／ＬＩ,０５ｇ／ＬＮａＣｌ环境中测定８－羟基喹啉,其线性范围为００２０～０２７ｍｇ／Ｌ,表观摩尔吸光系数为２７×１０５Ｌ·ｍｏｌ１·ｃｍ１,Ｓａｎｄｅｌ灵敏度为０５３８μｇ／ｃｍ２。用本法对药物硫酸羟基喹啉钾中的８－羟基喹啉含量的测定,结果满意。     

砷化镓和其它砷化物对大豆种子萌发和异柠檬酸裂解酶（ICL）及超氧物歧化酶（SOD）活性的影响

以砷化物为污染源，研究砷对大豆种子萌发及生理活性物质的影响，结果表明：砷化镓（ＧａＡｓ）和砷酸钠（Ｎａ＿３ＡｓＯ＿３三价砷和Ｎａ＿２ＨＡｓＯ＿４五价砷）对大豆种子萌发的影响，在五价砷（ＧａＡｓ和Ｎａ＿２ＨＡｓＯ＿４）１－５ｍｇ／Ｌ，三价砷０．１－１ｍｇ／Ｌ对大豆萌发有促进作用，随着浓度提高，发芽率有所下降；五价砷５０ｍｇ／Ｌ和三价砷１０ｍｇ／Ｌ显著受抑制；五价砷５００ｍｇ／Ｌ和三价砷１００ｍｇ／Ｌ种子萌发完全受抑制，砷化镓与五价砷相类同，砷对异柠檬酸裂解酶（ＩＣＬ）和超氧物岐化酶（ＳＯＤ）活性的影响与发芽能力呈正相关，三价砷对ＩＣＬ和ＳＯＤ的致钝作用大于五价砷２．５倍，五价砷Ｎａ＿２ＨＡｓＯ＿４大于ＧａＡｓ。     

四种槲皮素水溶性衍生物对凝血酶诱导兔上板聚集的影响

目的：研究四种人工半合成槲皮素水溶性衍生物,即乙氧基槲皮素、槲皮素磷酸酯（Ｂ）、槲皮素单硫酸酯和槲皮素二硫酸酯对凝血酶诱导兔血小板聚集的影响。方法：用比浊法检测血小板聚集。结果：乙氧基槲皮素对血小板聚集无影响;槲皮素磷酸酯（Ｂ）、槲皮素单硫酸酯和槲皮素二硫酸酯对血小板聚集有抑制作用,ＩＣ５０分别为８０μｍｏｌ／Ｌ、９５μｍｏｌ／Ｌ和１８５μｍｏｌ／Ｌ。结论：槲皮素磷酸酯（Ｂ）、槲皮素单硫酸酯和槲皮素二硫酸酯具有抗血小板活性。     

乳中环核苷酸提取方法研究

根据环核苷酸理化性质及乳的特点，采用酶法从乳汁中提取环核苷酸。研究表明，该方法条件温和、工艺合理、操作方便。经放射免疫测定提取浓缩液浓度为ｃＡＭＰ２０μｍｏｌ·Ｌ－１，ｃＧＭＰ０．２μｍｏｌ·Ｌ－１．     

植株叶片全钾简易快速测定方法研究

分别用１ｍｏｌ／ＬＮＨ４ＯＡＣ、１．０８０ｍｏｌ／ＬＨ２ＳＯ４和Ｈ２Ｏ浸提植株叶片中的钾,然后用火焰光度法测定,测定结果与Ｈ２ＳＯ４－Ｈ２Ｏ２消煮法作比较结果表明：１ｍｏｌ＝Ｌ ＮＨ４ＯＡＣ、１．０８０ｍｏｌ／Ｌ Ｈ２ＳＯ４作浸提剂的测定结果与Ｈ２ＳＯ４－Ｈ２Ｏ２消煮法测定结果差异不显著;１５、３０和４５ｍｉｎ３种浸提时间的测定结果差异不显著;以稀Ｈ２Ｓ巡提剂,硫酸浓度分别为０．９００、０．９７２     

山桃原生质体培养再生愈伤组织

以山桃县浮培养物为分离材料,在ＣＰＷ＋１．０％ＥＬＬＵＬＡＳｏＮＺＵＫＡｒ－１０＋０．５％ＭａｃｅｒｏｚｙｍｅＲ－１０＋０．７ｍｏｌ／Ｌ甘露醇＋１％ＰＶＰ的酶解液中酶解１２ｈ生质体产量和活力分别达到３．５＊１０＾７个／ｇ．ＦＷ和９６％。     

新显色剂meso—四（3—溴—4—羟基—5—甲氧基苯）卟啉分光光度法测定痕…

本研究了在混合表面活性剂ＳＤＢＳ和聚乙二醇辛基苯基醚（ＯＰ）共存下，ｍｅｓｏ－四（３－溴－４－羟基－５－甲氧基苯）卟啉Ｔ（ＢＨＭＯＰ）Ｐ与钯的湿色反应，并以该反应为基础建立了高灵敏度的痕量钯的光度分析法。钯与该显色剂形成１：２的配合物，其表观摩尔吸吸光系数在４２２ｎｍ处为１．２７×１０＾５Ｌ·ｍｏｌ＾－１·ｃｍ＾－１。钯量在０．０－１２μｇ／２５ｍｌ范围内服从比尔定律，本法用于合成样品中钯的测定