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建立沙门菌病原体的一种可目视化环介导等温扩增技术(LAMP),实现对沙门菌的高效快捷检测。针对沙门菌的invA基因的高度保守区域,设计一套特异性引物,优化LAMP扩增反应体系和条件,并对该方法的特异性、灵敏性和人工污染样品以及临床样品分别进行检测。与传统的细菌分离与鉴定、PCR和real-time PCR方法进行敏感性比较。该方法优化后的最佳反应体系为内外引物浓度比例为3∶1,dNTPs为2.5μL,MgSO_4为1.5μL,2.5μL甜菜碱(10mol/L),1μL Bst 2.0DNA聚合酶,在62℃恒温条件下反应50min,可以特异性检出沙门菌,而对其他非沙门菌病原的检测结果为阴性。该方法的最低检测线为1.0×10~2 CFU/mL,灵敏度是常规PCR检测方法的1 000倍,与real-time PCR方法的灵敏度基本接近;针对人工污染沙门菌的鱼粉其检测灵敏度为5.0×10~2 CFU/mL;对临床样品的检出率为65.4%,与传统检测方法的检出率一致。本研究建立的LAMP检测沙门菌的方法特异性强、灵敏度高、操作简便、效能高和可视化,为基层监管部门和畜牧兽医工作者对于沙门菌病原的监控和初步筛选提供了技术保障。 相似文献
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玉米秸、麦秸和稻草等作物秸秆是农业生产中重要的副产品,但是因为作物秸秆的营养特性,使其在动物生产中的转化利用率较低,导致大量作物资源不能被高效利用。提高农作物秸秆的利用率,解决反刍动物饲草来源问题,是国内外草业专家研究及关注的焦点。综述作物秸秆作为反刍动物饲草资源的利用进展,以期为它们的合理、有效利用提供参考。 相似文献
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为了研究发酵条件对诺丽内生真菌M2抑菌性的影响,笔者采用传统方法和ITS rDNA测序方法相结合,将本实验室筛选出的抑菌效果突出的诺丽内生真菌M2初步鉴定为棘孢曲霉(Aspergillus aculeatus),在NCBI数据库中登录号为MK560191。通过单因素试验和正交设计对内生真菌M2进行发酵优化,筛选出最优发酵条件:(1)内生真菌M2优化后的培养基方案为200 g土豆煮沸30 min浸出液、葡萄糖20 g、硝酸钠5 g、磷酸二氢钾0.2 g、七水合硫酸镁0.2 g、1 000 mL双蒸水;(2)发酵条件为150 mL锥形瓶装液50 mL、温度25 ℃、培养基初始pH8、转速170 r·min?1。 相似文献
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汉中地区推广黄茶品种情况调研及发展思路 总被引:1,自引:0,他引:1
陕西省汉中市茶园面积逾8万hm~2,属江北茶区。茶产业是汉中七县一区的脱贫主导产业之一,也是乡村振兴战略的载体之一。汉中以绿茶为主,茶产业发展也面临着稳定面积,提质增效高质量发展的问题。生产调研显示,茶树优良品种在提质增效中贡献率达40%以上。黄茶品种是适宜汉中适度规模发展的优异茶树品种之一,它抗逆性强,开采期早,产值高。加之所制干茶氨基酸含量高,滋味鲜醇有明显的"三黄"特性而深受追求时尚、健康、清爽、简便的年青一代消费者喜好,市场前景广阔,汉中适宜适度规模种植发展。 相似文献