沙门菌LAMP可视化检测方法的建立与应用

建立沙门菌病原体的一种可目视化环介导等温扩增技术(LAMP),实现对沙门菌的高效快捷检测。针对沙门菌的invA基因的高度保守区域,设计一套特异性引物,优化LAMP扩增反应体系和条件,并对该方法的特异性、灵敏性和人工污染样品以及临床样品分别进行检测。与传统的细菌分离与鉴定、PCR和real-time PCR方法进行敏感性比较。该方法优化后的最佳反应体系为内外引物浓度比例为3∶1,dNTPs为2.5μL,MgSO_4为1.5μL,2.5μL甜菜碱(10mol/L),1μL Bst 2.0DNA聚合酶,在62℃恒温条件下反应50min,可以特异性检出沙门菌,而对其他非沙门菌病原的检测结果为阴性。该方法的最低检测线为1.0×10~2 CFU/mL,灵敏度是常规PCR检测方法的1 000倍,与real-time PCR方法的灵敏度基本接近;针对人工污染沙门菌的鱼粉其检测灵敏度为5.0×10~2 CFU/mL;对临床样品的检出率为65.4%,与传统检测方法的检出率一致。本研究建立的LAMP检测沙门菌的方法特异性强、灵敏度高、操作简便、效能高和可视化,为基层监管部门和畜牧兽医工作者对于沙门菌病原的监控和初步筛选提供了技术保障。     

一例犊牛磺胺药中毒症状的观察与分析

因磺胺类药物在使用时药量过大或趋于频繁,常常引起动物发生一些不良反应,引起中毒。为了更进一步了解本病,笔者对磺胺药治疗过的一头死亡的牛和一头濒临死亡的犊牛的症状进行了深入的观察与分析,结果发现,此犊牛为磺胺中毒。本试验意在为磺胺药在基层单位的合理临床应用及当前存在的问题提供一定的理论基础和相应的对策。     

鸡白痢沙门菌套式PCR检测方法的建立及初步应用

为了建立一种快速、高效和简便的鸡白痢沙门菌套式PCR检测方法,根据沙门菌侵袭蛋白基因invA的高度保守区域,利用Primmer 5.0软件设计2对特异性的套式引物,以提取的沙门菌DNA为模板克隆invA基因,将其连入T载体并计算拷贝数作为套式PCR的模板,在对反应条件进行优化的基础上,建立最佳的套式PCR反应条件,确定其上、下游引物用量分别为0.3μL,套式PCR的第1次退火温度为57.4℃,第2次为53.5℃。应用该方法对已构建好的不同浓度的标准阳性质粒作为模板进行检测,其灵敏度为102拷贝数/20μL,远高于常规PCR的106拷贝数/20μL。用建立的套式PCR方法对从新疆石河子某鸡场采集的25样品进行检测,与传统的诊断方法比较符合率达95.00%。建立的鸡白痢沙门菌套式PCR检测方法具有快速、可行、特异性强、准确率高等特点,为鸡沙门菌病的早期诊断和研究提供了技术支撑。     

城市微型公共空间景观设计

随着城市的发展,城市公共空间对城市生活的重要性不断凸显,城市微型公共空间作为其层次结构中不可或缺的一环,在世界范围内也得到了长足发展。但对于我国城市微型公共空间景观设计领域而言,却一直未能得到足够的重视。以深圳市罗湖区嘉宾公园为研究对象,阐述城市微型公共景观设计对于城市公共空间层次结构的重要意义,并展现其为城市所带来的独特魅力。深圳市罗胡区嘉实公园的建成为我国城市微型公共空间提供了一个极佳的参考样本。     

历史名园保护前规划研究

历史名园具有多重价值,尤其是在城市化进程加快的背景下,如何保护和利用好它是一个重要课题;本文通过探讨历史名园保护前期的规划内容和方法,以期为历史名园的保护和恢复提供理论依据。     

豆状囊尾蚴的头节在相对静止与运动状态时的超微结构变化(英文)

[目的]观察豆状囊尾蚴的头节在相对静止与运动时超微结构的变化.[方法]本研究用扫描电镜对位于囊泡内的头节和经人工培养后从囊泡内翻出头节的超微结构变化进行了比较观察。[结果]处于相对静止状态的头节从正面观察时,带有皮肌柱和齿钩的顶突呈伞状,覆盖于头节的前端。从侧面观察,齿钩具有鹿角样的分支,覆盖头节的齿钩仅有一排。4个吸盘呈洞穴状,位于顶突之后,均等地分布在头节的四周。当头节处于运动状态时,顶突上的皮肌柱收缩,鹿角样的齿钩向周围伸展,吸盘也发生环形和纵行收缩。[结论]豆状囊尾蚴的头节在相对静止与运动时的超微结构有明显的改变,这种变化有利于豆状囊尾蚴对宿主的侵袭。     

阿苯达唑对种兔感染脑炎原虫的防治研究

为了有效地防治种兔的脑炎原虫病,本研究根据脑炎原虫的生物学特点和对组织损伤的特征选用阿苯达唑进行了防治试验.对115只种兔做了ELISA检测和尿沉渣检查,发现有18只种兔已感染脑性原虫,另97只并未感染.用阿苯达唑对感染种兔进行了治疗,对未感染种兔做了预防.结果18只感染种兔经三个疗程治疗后,虽然尿沉渣中均未检出脑炎原虫,但仍有两例种兔的OD值呈阳性.将2例OD值阳性种兔剖检后在其脑组织中检出脑炎原虫包囊和肉芽肿.用药物预防的97只未感染种兔,经两个预防期后血清学检查呈阴性,尿沉渣中也未检出脑炎原虫.试验证明,阿苯达唑对兔脑炎原虫病有良好防治作用,用药的时机以脑炎原虫还未进入脑组织时最合适,用药的剂量一定要保持有效的杀虫浓度.     

五种草坪草蒸散特性研究

以5种草坪草为试材,通过盆栽模拟大田试验,研究了充足灌水和限制灌水条件下草坪草的蒸发规律;测定了干旱胁迫下草坪草的叶片相对含水量、叶绿素含量、外观质量等指标,结果表明:草坪草蒸散量日变化与温度变化规律相一致,在午后12:00~14:00时达到最高值,65%~70%的蒸散量集中在10:00~16:00;充分灌水和限制灌水2种条件下,草坪草的月平均蒸散量均表现为:高羊茅多年生黑麦草草地早熟禾狗牙根日本结缕草,冷季型草坪草大于暖季型草坪草;干旱胁迫下,草坪草的叶片含水量和外观质量均呈下降趋势,而叶绿素含量先增后减,在第3天达到最大值,此时的土壤含水量为最适含水量,体积百分比约为25%~28%。     

高粱红火了村民生活

正在开化县,有一个小山村,靠种高粱成了有名的"网红"村,它就是大溪边乡上安村。只见路边层层梯田,种了连片的高粱,一串串高粱穗饱满、均匀,轻风吹过,空气里弥漫着阵阵清香,青黄的高粱穗就快成熟了。"这是留守村民的宝贝,现在,家家户户种高粱、酿高粱酒。"村支书余雄富一边介绍,一边带记者来到村综合办公楼。这幢气派、崭新的大楼,让记者眼前一亮。"原先的村办公房建于上世纪60年代,破旧低矮。"村