红三叶草提取物中四种异黄酮的HPLC检测方法

本研究的目的是建立一种可以同时测定红三叶草提取物中大豆苷元、染料木素、刺芒柄花素和鹰嘴豆素A含量的高效液相色谱检测方法。采用χBridge C18（250 mm×4.6 mm，5 μm，Waters）色谱柱，以甲醇（A）和10 mmoL磷酸氢二钠溶液（B）为流动相，流速为1 mL/min，进样量为10 μL，在不同的洗脱梯度、检测波长和柱温下检测四种异黄酮的含量。确定了最佳色谱条件：柱温为40 ℃，检测波长为270 nm，洗脱梯度为：0 ～ 5 min，20% ～ 40% A|5 ～ 20 min，40% ～ 75% A|20 ～ 23 min，75% ～ 100% A|23 ～ 26 min，100% A|26 ～ 26.5 min，100% ～ 20% A|26.5 ～ 35 min，20% A。结果表明：四种异黄酮在浓度为1 ～ 50 μg/mL时具有良好的线性关系（R2>0.999），保留时间稳定，精密度和稳定性的相对标准偏差（RSD）均小于2%，加标回收率为96% ～ 100.10%。建立的检测方法符合分析方法学评价的要求，可用于同时检测红三叶草提取物中的鹰嘴豆素A等四种异黄酮。 [关键词] 红三叶草提取物|鹰嘴豆素A|HPLC|异黄酮     

光化学衍生法测定玉米及玉米制品中的黄曲霉毒素B1

为研究玉米及玉米制品被黄曲霉毒素B1污染的情况,确保市场上玉米及玉米制品的食用安全,本文旨在建立免疫亲和柱净化-高效液相色谱-柱后光化学衍生-荧光法测定玉米和玉米制品中黄曲霉毒素B1含量的方法。将玉米和玉米制品试样粉碎后,试样粉末在甲醇-水溶液（体积比为55:45）条件下提取,经免疫亲和柱富集和净化后,以甲醇-水溶液（体积比45:55）为流动相,采用XDB-C18色谱柱（5 μm×4.6 mm×250 mm）,由光化学柱后衍生,荧光检测器检测（Ex：360 nm,Em：440 nm）。结果表明：黄曲霉毒素B1的最低检出限和定量检出限分别为0.009 μg/kg和0.03 μg/kg,标准曲线的线性范围为0.1 ~ 0.5 mg/L（R=0.9990）,2个不同水平的加标平均回收率为88.4% ～ 90.1%,RSD值为0.47% ～ 1.07%。该方法具有操作简便、灵敏度高、重现性佳等特点,适用于玉米和玉米制品中黄曲霉毒素B1的检测。 [关键词] 免疫亲和柱|高效液相色谱|柱后光化学衍生|黄曲霉毒素B1     

高效液相色谱－串联质谱法检测猪肝组织中氯霉素残留的研究

建立了猪肝组织中氯霉素残留检测的高效液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)法.液相色谱条件为色谱柱为Alltech Altima C18柱(150 mm×3.2 mm,5 μm);流动相为甲醇-水(1∶ 1,V/V);柱温为30 ℃;流速为0.3 mL/min;进样量为20 μL.质谱条件为电喷雾离子源(ESI-),多反应离子监测(MRM)方式进行采集;监测离子质荷比为320.60＞52.20,320.60＞194.15.以氯霉素的同分异构体间位氯霉素作内标,内标法定量.结果表明,氯霉素的线性范围为0.5～10 ng/mL,相关系数R2＝0.999 9;方法检测限为0.1 μg/kg,定量限为0.2 μg/kg;从0.1、0.2、0.4和1.0 μg/kg四个添加浓度检测结果可以看出,方法的平均回收率为96.6%～116.6%(n＝6),批内批间RSD均小于20%.     

高效液相色谱法测定酵素中γ-氨基丁酸

本实验旨在通过对衍生时间、衍生温度、检测波长、流动相比例与柱温条件的选择，建立一种灵敏检测酵素中γ-氨基丁酸的方法。以邻苯二甲醛为衍生化试剂，衍生时间2 min，衍生温度为室温，色谱条件为：检测波长334 nm，流动相为乙腈-20 mmol/L结晶乙酸钠溶液（体积比20:80），柱温25 ℃，流速0.8 mL/min。结果表明：在浓度为0.3 μg/mL ～ 1 mg/mL时线性关系良好（R2=0.9997），平均加标回收率为92.17% ～ 104.29%，相对标准偏差为0.51% ～ 3.99%（n=5），检出限为0.1 μg/mL，并采用建立的方法测定了不同酵素样品中γ-氨基丁酸的含量。该方法操作简单、灵敏、准确可靠，适用于酵素中γ-氨基丁酸含量的检测。 [关键词] γ-氨基丁酸|酵素|高效液相色谱法|检测|含量     

液相色谱串联四极杆线性离子阱质谱测定秸秆发酵饲料中米酵菌酸和毒黄素

本研究旨在建立利用液相色谱串联四极杆线性离子阱质谱（LC-MS/MS-QTRAP）测定秸秆发酵饲料中米酵菌酸和毒黄素的方法。秸秆发酵饲料样品用1%甲酸溶液+乙腈溶液（15+85）提取，经多重机制杂质吸附技术净化后，上LC-MS/MS-QTRAP测定，基质匹配外标法定量。结果表明：米酵菌酸和毒黄素在1 ~ 100 μg/mL内线性关系良好，其相关系数＞0.9950|方法检出限为0.7 μg/kg和1.5 μg/kg，定量限为2 μg/kg和5 μg/kg|在5、10 μg/kg和100 μg/kg 3个标准浓度添加水平下，平均回收率为82.8% ~ 102%，相对标准偏差为1.8% ~ 14.7%。应用此方法对50份不同来源的秸秆发酵饲料样品进行了检测，其中6份样品中检出米酵菌酸或毒黄素，其含量为3.5 ~ 56.7 μg/kg，本研究建立的方法可用于秸秆发酵饲料中米酵菌酸和毒黄素含量的检测分析。 [关键词] 秸秆发酵饲料|米酵菌酸|毒黄素|多重机制杂质吸附|液相色谱串联四极杆线性离子阱质谱     

饲料中安定的残留分析

本实验建立了饲料中安定的液相色谱-质谱联用(LC-MS)检测方法。液相色谱条件为分析柱WatersSunfireTMC18150mm×2.1mm,3.5μm,流动相为乙腈-0.2%甲酸(体积比55∶45),流速:0.2mL/min。质谱条件为电喷雾离子源(ESI ),选择离子监测(SIR)质荷比(m/z)为285,228,154带正电荷的准分子离子和碎片离子。在此条件下安定的线性范围为1～1000μg/L,方法最低定量检测限为1.0μg/kg,安定的回收率为75%±10%。     

超高效液相色谱-串联质谱法测定原料乳和奶粉中三聚氰胺的含量

该试验建立了使用超高效液相色谱-串联四极杆质谱测定原料乳和奶粉中三聚氰胺含量的检测方法.用三氯乙酸溶液和乙酸铅提取,提取液经MCX固相萃取柱净化后用UPLC-MS-MS进行检测.色谱条件:CAPCELL PAK CR1:4柱(2.0 mm×100 mmi.d.,5 μm),流动相:乙腈-0.01 mol/L乙酸铵溶液,梯度洗脱流速0.3ml/min.采用正离子模式的电喷雾质谱检测,以一级质谱得到的准分子离子m/z 126.8作为母离子,进行碰撞诱导解离(CID)二级质谱(MS2)分析,选择母离子和MS2的碎片离子m/z 84.9、67.8定性确证.提取m/z 84.9离子质量色谱峰面积定量.基质标准线性范围为0.01～1.00 μg/ml,检出限10 μg/kg(S/N=10),原料乳回收率为82.4%～97.8%,奶粉回收率为80.7%～95.7%.     

猪肉组织中四环素类药物残留检测——高效液相色谱-串联质谱法研究

建立了猪肉组织中四环素类药物残留检测的高效液相色谱-串联质谱方法.色谱条件为色谱柱为XBridge C18柱(150 mm×2.1 mm,5 μm),流动相为0.3%甲酸乙腈溶液 0.3%甲酸水溶液;柱温 20 ℃,流速0.2 mL/min;进样量20 μL.质谱条件为电喷雾离子源(ESI );多反应监测(MRM)方式采集.外标法定量.结果表明,四环素、土霉素和金霉素在10～400 ng/mL浓度范围内呈现良好线性,相关指数R2均大于0.999;方法检测限为5 ng/g,定量限为10 ng/g.50、100和200 ng/g三个添加浓度的平均回收率为72.3%～94.6%,批内批间RSD均小于20%.     

甜菜碱

甜菜碱许烈（江西民星企业集团公司甜菜碱分厂南昌３３０２００）１甜菜碱的来源甜菜碱（ＢＥＴＡＦＩＮ－ＢＦ）系最近研制的新型饲料添加剂，它是一种能为动物提供高效活性甲基的生物营养素，起源于甜菜和仙人掌制成糖蜜后用色谱分离工艺提取的（故此得名）。但甜菜局限...     

鳗鱼饲料中呋南唑酮和呋喃西林测定方法研究

对鳗鱼饲料中呋喃唑酮和呋喃西林的高效液相色谱检测方法进行了研究.采用乙腈超声提取药物,正已烷去除杂质,用安捷伦Eclipse XDB-C18 5 μm (4.6 mm×250 mm)色谱柱进行分离,二极管阵列检测器检测,检测波长为365 nm.对鳗鱼饲料进行0.5～5 mg/kg 2种药物的加标回收试验.结果表明:呋喃西林的回收率在61.18%～99.34%,相对偏差为7.75%～9.98%,最低检测限为0.1 mg/kg.     

离子色谱法测定婴幼儿配方乳粉中的糖类

为建立操作简便、快速有效、同时分析婴幼儿配方乳粉中多种糖类的离子色谱分析方法,采用高效阴离子交换柱分离-脉冲安培检测法建立婴幼儿配方乳粉中葡萄糖、蔗糖、乳糖、低聚半乳糖三糖、蔗果三糖、低聚半乳糖五糖、蔗果四糖和蔗果五糖的分析方法。考察色谱柱、柱温、检测波形和淋洗液（NaOH、NaAc）浓度及流速对8 种糖分离效果的影响。结果表明：选用CarboPac PA20阴离子交换柱,包括分析柱（3 mm×150 mm）和保护柱（3 mm×30 mm）,流速0.30 mL/min,柱温30 ℃,在选定的流动相梯度洗脱程序条件下实现高效分离;本方法对葡萄糖、蔗糖、乳糖、低聚半乳糖三糖、蔗果三糖、低聚半乳糖五糖、蔗果四糖和蔗果五糖的检出限为3.0～12.0 μg/L,精密度实验相对标准偏差小于3%,豆浆样品中8 种糖类的加标回收率为78.0%～96.8%,表明该方法可行。     

超高效液相色谱-串联质谱法测定牛乳中21种β-兴奋剂

建立超高效液相色谱-串联质谱法同时测定牛乳中21 种β-兴奋剂残留量。样品经酶解、固相萃取柱净化，采用Acquity UPLC BEH C18色谱柱（50 mm×2.1 mm，1.7 μm）分离，以0.1%甲酸-10%甲醇水溶液为流动相梯度洗脱，在电喷雾离子源正离子模式下，采用多反应监测模式，对21 种β-兴奋剂进行定性和定量分析。结果表明：该方法的定量限为0.05 μg/kg，在0.05、0.10、0.50 μg/kg 3 个不同添加水平下，平均回收率为61.0%～124.3%，相对标准偏差为2.39%～10.66%；该方法稳定、准确、灵敏度高，可用于牛乳中21 种β-兴奋剂残留量检测。     

混合型饲料添加剂中硫酸黏杆菌素的液相色谱检测方法研究

本研究建立了混合型饲料添加剂中硫酸黏杆菌素含量的液相色谱检测方法。混合型饲料添加剂样品用5%草酸提取,经离心和HLB小柱净化,用丹磺酰氯柱前衍生,以C_8柱(150 mm×4.6 mm×5μm)为分离柱,荧光检测器在激发波长344 nm,发射波长518 nm下进行检测。结果表明:在所选择的色谱条件和衍生条件下,硫酸黏杆菌素A在0.025～10.0μg/mL时线性关系良好,最低定量限为2 mg/kg;添加回收率为85.1%～108%,变异系数为0.84%～5.52%。本方法样品前处理简便、可靠,可用于混合型饲料添加剂中硫酸黏杆菌素的检测。     

甜菜碱的营养生理功能与应用

甜菜碱(C5H11NO2)是从甜菜及糖蜜中提取的一类季铵羧酸内酯类化合物，分子量为1175。甜菜碱最早在欧洲被发现，目前欧洲和美国甜菜碱用作饲料添加剂的年需求量为1万吨，日本为600 t。我国饲养业甜菜碱的用量也逐年提高，而且越来越得到重视。1 甜菜碱的来源、化学结构、理化特性甜菜碱广泛存在于动植物体内，谷物含量较少，在大多数植物体和海生无脊椎动物以及微生物体内含量较高。甜菜及一些中草药如地骨皮、枸杞子、黄芪、连翘等也含有较多的甜菜碱。甜菜是甜菜碱含量最高的植物之一，甜菜的糖蜜是甜菜碱的主要来源。其化学名称为三甲…     

甜菜碱——新型饲料添加剂

甜菜碱是近年来研制成功的新型饲料添加剂,它是一种能为动物提供高效活性甲基的生物营养素,它起源于甜菜和仙人掌中,利用甜菜和仙人掌制成糖蜜后再用色谱分离工艺提取。但甜菜受季节及产量的限制,且从甜菜中提取的甜菜碱成本高,所得产品太少,远不能满足需要。科学家们根据甜菜碱的性质和分子结构等特点,进行研究,用化学方法合成甜菜碱,且得率比较高,成本较从甜菜中提取的低,原料充足且不受季节影响。     

反相高效液相色谱法测定预混合饲料中维生素A乙酸酯的含量

建立了反相高效液相色谱法测定预混合饲料中维生素A乙酸酯含量的方法.色谱柱为C18柱(150 mm×4.6 mm,5 μm);流动相为甲醇;检测波长326 nm.维生素A乙酸酯浓度在0.05～100 IU/mL范围内,峰面积与浓度呈现良好的线性关系,相关系数r=0.999 9.2个不同浓度的添加回收率分别为93.6%和98.3%.     

高效液相色谱-串联质谱法检测猪尿中四种β-受体激动剂残留的研究

建立了猪尿中克仑特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇和西马特罗残留检测的高效液相色谱-串联质谱方法(HPLC-MS/MS).液相色谱条件为色谱柱为XBridge C18柱(150 mm×2.1 mm,5 μm);流动相为0.1%甲酸甲醇溶液 0.1%甲酸水溶液,梯度洗脱;柱温为30 ℃;流速为0.2 mL/min;进样量为20 μL.质谱条件为电喷雾离子源(ESI ),多反应监测(MRM)方式进行采集;同位素内标法定量.结果表明,四种β-受体激动剂在1～50 ng/mL浓度范围内呈现良好的线性关系,相关指数R2均大于0.998;方法检测限为0.3 ng/mL,定量限为0.5 ng/mL;从0.5、1和2 ng/mL 3个添加浓度检测结果可以看出,方法平均回收率为86.6%～110%,批内RSD为1.1%～8.4%,批间RSD为2.0%～6.2%.     

高效液相色谱-示差折光法测定天然甜菜碱含量

用示差折光-高效液相色谱法测定天然甜菜碱含量。采用Na+形式阳离子交换柱(300mm×7.8mm),以1mmol/l硫酸钠溶液为流动相,流速为0.6ml/min,柱温为(75±2)℃,示差折光检测器内控温度为40℃,在此色谱条件下,甜菜碱在2.005～10.026mg/ml浓度范围内呈良好的线性关系(r=0.9998),方法平均回收率为98.8%(n=9,RSD=0.41%)。本法操作简便易行,系统适用性良好,适用于饲料添加剂天然甜菜碱含量测定。     

反相离子对色谱法测定蜂蜜中氟哌酸残留量

研究建立蜂蜜中氟哌酸残留量的反相离子对高效液相色谱测定方法.样品用水相提取,经C18固相萃取柱净化,在273 nm波长下用二极管矩阵检测器检测.色谱柱为Agilent ZORBOX SBC18柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为甲醇/磷酸盐缓冲液(0.05 mol/L磷酸二氢钾)/四丁基溴化胺(0.05 mol/L)=24/73/3(V/V/V),用磷酸调节pH=2.75.流速1.0 ml/min.氟哌酸浓度在0.3～4.0μg/ml范围内与峰面积呈良好的线性关系,平均回收率为81.3%～94.7%,变异系数为1.52%～3.31%,最低检测限为0.1μg/ml.本方法简便、快速、准确.     

饲料中孔雀石绿和隐性孔雀石绿含量的液相色谱-串联质谱测定方法

建立了超高效液相色谱-串联四级杆质谱法测定饲料中孔雀石绿和隐性孔雀石绿的含量.用乙腈提取,提取液经蒸干浓缩后用中性氧化铝和阳离子交换固相萃取柱净化,使用UPLC-MS/M进行检测.色谱条件: ACQUITY UPLCTM BEH C18柱(2.1 mm×100 mm i.d.,1.7 μm),流动相乙腈 0.1 %甲酸溶液,梯度洗脱流速0.3 mL/min.采用电喷雾串联四极杆质谱检测.结果表明,孔雀石绿和隐性孔雀石绿的浓度为1～500 ng/mL时线形良好,在1～100 μg/kg的添加水平条件下平均回收率为68.5 %～91.6 %,该方法的检测限为1.0 μg/kg.