鸡传染法氏囊病中和抗体动态水平监测及其应用的研究

用鸡胚成纤维细胞的微量血清中的（ＳＮ）试验跟踪抽检出了同群两种不同免疫程序的１２组次共１４２只鸡的传染性囊病（ＩＢＤ）中和抗体滴度。结果表明，该群日龄雏鸡的母源抗体水平高达８．３ｌｏｇ２并且较整齐，雏鸡母源体半衰期约为４．３－５．０天；用ＳＮ免疫监测不同的等距离及其实际效果，说明在中和抗体滴度降至６．０－６．５ｌｏｇ２（１５－１８日龄）时首免效果最好。该方法准确且繁感性高，可用于鸡群免疫监测，指导     

狐狸脑炎病毒细胞培养灭活疫苗的研究

采用分离到的狐狸脑炎病毒ＦＥＶ－Ｈ作种毒，经ＭＤＣＫ细胞培养，经最终含量为０．２％的甲醛灭活，制备狐狸脑炎病毒细胞培养灭活疫苗。皮下接种疫苗１０ｍｌ，试验狐，貉，犬均无临床特异反应，局部吸收良好。最小免疫剂量为１６倍稀释的疫苗原液１ｍｌ，使用剂量定为４倍稀释的疫苗原液１ｍｌ，试验狐狸免疫后３０天，血清中和抗体效价达到高峰值１：１４５，能耐受张毒攻击。免疫后６个月，抗体水平降至１：３２，但此时仍能耐     

嗜水气单胞菌疫苗的研制

取致病性嗜水气单胞菌（Ａｈ）Ｊ－１株接种改良肉汤，摇床培养１８０ｒｐｍ２８℃２４ｈ，用福尔马林灭活制得全菌苗。另将上述培养物离心，取上清经福尔马林灭活制得毒素苗。用全菌苗和毒素苗分别免疫小鼠，２周后强化免疫，而后用Ｊ－１株５０ＬＤ＿（５０）腹腔注射攻击，免疫组均保护，对照组全部死亡。在鲫鱼的免疫保护试验中，分别采用全菌苗及毒素亩作腹腔注射或浸泡免疫，４周后强化免疫。用ＡｈＪ－１株５０ＬＤ＿（５０）腹腔注射攻击。结果全菌苗注射组保护８７％（１３／１５）；毒素苗注射组保护４０％（８、２０）；全菌苗浸泡组保护４０％（６／１５）；毒素苗浸泡组保护６７％（１０／１５）；对照组全部死亡。免疫持续期试验表明，在两次免疫６个月后攻击，全菌苗或毒素苗均仍显示一定的保护力。在平均水温２７℃±２℃下，鲫鱼的抗体动态为：全菌苗注射免疫组在强化免疫后１周全菌凝集抗体达２￣６，此时可检测到鲫鱼体表粘液中有低滴度凝集抗体存在，较高滴度的血清凝集抗体至少可维持６个月。全菌苗浸泡组在强化免疫后约１０天血清中才出现凝集抗体，滴度较低。毒素苗注射免疫用的毒素溶血抑制抗体在初次免疫第２８天达２￣７，强化免疫后高滴度抗体可维持１７天；毒素苗浸泡组的?     

口蹄疫A型油佐剂和leo佐剂弱毒灭活疫苗免疫持续期的研究

用实验室配制的口蹄疫油佐剂和leo佐剂A型弱毒灭活疫苗各免疫6月龄健康敏感牛（乳鼠中和抗体滴度小于1：4）5头，免疫后每月采血一次，分离血清；采用固定病毒稀释血清的方法，通过乳鼠中和试验检测免疫牛血清中的口蹄疫A型中和抗体的产生与消长情况，用karber法计算中和效价，绘制动态曲线图。结果显示，口蹄疫弱毒灭活疫苗免疫牛，可以产生高滴度的血清中和抗体，免疫牛血清中和抗体效价均在免疫后1个月左右达到高峰。油佐剂疫苗免疫的牛，血清中和抗体效价比较高，但下降比较迅速；leo佐剂疫苗免疫的牛，血清中和抗体效价比较低，但下降比较平缓。     

犬瘟热弱毒疫苗免疫犬抗体消长规律及影响因素

应用犬瘟热病毒（ＣＤＶ）血清中和试验，对从日本引进的犬瘟热弱毒疫苗免疫犬的血清中和抗体效价进行了检测，探讨了免疫剂量、免疫程序和犬的年龄对抗体效价的影响。结果表明，试验犬于第１次免疫后１４ｄ左右产生１∶９以上的血清中和抗体，随后抗体水平迅速升高，３５ｄ时７８．３８％的免疫犬抗体效价超过１∶１００，６０ｄ达到高峰，６个月试验结束时，血清中和抗体效价仍维持在１∶１００以上。该犬瘟热弱毒疫苗的最低免疫剂量为１０３．０ＴＣＩＤ５０，以２周或３周间隔连续免疫３次均可使免疫犬获得完全保护。     

鸡传染性贫血病对雏鸡新城疫疫苗免疫的抑制机理──Ⅰ．细胞因子的变化

１日龄健康ＡＡ雏鸡感染ＣＩＡＶ后８天进行ＮＤ疫苗免疫，免疫后２９天用ｖＮＤＶ攻击，于免疫后７、１４、２８和攻毒后１０天取材检测．给果，感染ＣＩＡＶ雏鸡经ＮＤ免疫后７天，胸腺Ｔ细胞白细胞介素２（ＩＬ－２）诱生活性比未感染的免疫对照鸡明显降低（Ｐ＜０．０１）；脾脏Ｔ细胞ＩＬ－２诱生活性于７和２８天显著降低（Ｐ＜０．０５，Ｐ＜０．０１）．感染免疫鸡免疫后１４天脾脏淋巴细胞干扰素（ＩＦＮ）诱生活性明显降低（Ｐ＜０．０１）．结果表明感染ＣＩＡＶ鸡对ＮＤ疫苗免疫的分子免疫调节作用明显减弱，ＨＩ抗体效价于免疫后７～２８日明显降低（Ｐ＜０．０５）。ＮＤ强毒攻击后，ＣＩＡＶ感染ＮＤ免疫雏鸡的免疫保护率为６０％％，明显低于免疫对照鸡（１００％）．     

猪乙型脑炎病毒在Vero细胞上的繁殖特性及其灭活疫苗的免疫原性研究

试验旨在对猪乙型脑炎病毒（JEV,SA14-14-2株）在传代细胞上的繁殖培养特性及其制备的灭活疫苗免疫原性进行研究,确定猪JEV在细胞培养瓶中培养的关键技术参数及其灭活疫苗的免疫原性。以Vero细胞培养病毒,通过接种时间、接毒量、吸附时间、吸附温度、维持液pH、维持培养温度及培养时间7个条件的优化,将繁殖的病毒液冻融一次,采用病毒蚀斑数测定方法测定病毒滴度。按照优化好的条件繁殖一批毒液,经β-丙内酯灭活,与双相佐剂混合,制备成猪乙型脑炎灭活疫苗。两次免疫（间隔14 d）接种乙型脑炎抗体阴性仔猪,首次免疫前（0 d）、免疫后第7、14、21、28、35、42天采集血清,检测血清中和抗体。二免后第28天进行乙型脑炎P3强毒的攻击,攻毒前（0 d）、攻毒后第1、2、3、5、7、9天采集血浆,攻毒后第14天剖杀免疫猪,采集脑组织,检测血浆和脑组织中JEV。结果显示,用细胞培养瓶进行培养,将Vero细胞培养至48 h进行病毒接种,接种量为1 000 PFU/mL,病毒吸附温度为37℃,吸附时间为90 min,吸附后用pH 7.6~8.8维持液继续培养,培养温度为35℃,培养96 h后收获毒液,冻融一次,可获得较高滴度的病毒。仔猪免疫制备的灭活疫苗后血清抗体水平迅速升高,血浆和脑组织中均未检测出JEV,免疫组试验猪能抵抗强毒攻击,可获得有效免疫保护。本试验结果为猪乙型脑炎疫苗的生产提供了参考依据。     

用不同鸡新城疫病毒株制备油乳剂苗的研究

应用４种鸡新城疫病毒Ｌａ－Ｓｏｔａ，Ｕｌｓｔｅｒ，Ｂ１和ＰＭＶ－Ⅰ分别作为抗原，制备ＮＤ油苗。每组苗颈部皮下接种非免疫来航鸡，每隔１～２周采血检测ＨＩ抗体一次，直至免疫后第８周。用同源抗原检测ＮＤ苗免疫的ＨＩ抗体滴度普遍高于非同源抗原检测的ＨＩ抗体滴度（Ｌａ－Ｓｏｔａ油苗除外），不同ＮＤ毒株油苗中，Ｕｌｓｔｅｒ油苗和Ｂ１油苗的ＨＩ抗体水平最高，其次是Ｌａ－Ｓｏｔａ油苗，ＰＭＶ－Ⅰ油苗ＨＩ抗体水平最     

具有中和活性的减蛋综合征病毒单抗的研制

用减蛋综合征病毒毒株ＷＰＤＶ２０５纯化抗原免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，在最后一次免疫后第３天取脾细胞与ＳＰ２／０细胞在ＰＥＧ－４０００的作用下融合。用间接ＥＬＩＳＡ初步筛选出阳性克隆１０株（４Ｂ１、１Ｄ４、２Ｄ６、３Ｄ６、３Ａ５、２Ａ１、３Ｃ６、３Ｃ１、１Ｂ３和２Ｃ５）。这些杂交瘤细胞经克隆化和再次检测后生产腹水，用微量细胞中和试验筛选出具有中和活性的单克抗隆体４株（４Ｂ１、３Ｃ１、３Ｃ６和２Ｃ５），其     

Ⅱ型猪链球菌S2株在兔中免疫原性的研究

本文对Ⅱ型猪链球菌Ｓ２株进行了研究。作者用Ｓ２制备了３种不同抗原：荚膜多糖,多糖蛋白复合物,灭活菌苗。通过血清学方法证明荚膜多糖（ＣＰＳ）,多糖蛋白复合物与Ｓ２株有共同的抗原,免疫兔后,保护指数在１／２至２／２之间。本试验用ＥＬＩＳＡ法检测了３种抗原的免疫反应。免疫荚膜多糖组在第２周就能检测到抗体,并持续到第４周,免疫多糖蛋白复合物组在第４周才有抗体出现,免疫灭活苗组第２周出现较低滴度的抗体,第４周就降到零。从抗体滴度看,ＣＰＳ反应快,多糖蛋白复合物产生抗体迟,灭活苗产生抗体滴度低。本文还比较了３种不同佐剂（铝胶,蜂胶,ＥＭＵＬＳＩＧＥＮＲ）对３种抗原的佐剂活性作用。铝胶能促使兔体对荚膜多糖产生抗体,蜂胶次之,ＥＭＵＬＳＩＧＥＮＲ最差。     

鸭瘟、鸭霍乱紧急防治措施研究

对鸭瘟、鸭霍乱紧急防治措施作了系列研究，结果表明：鸭瘟、鸭霍乱多价卵黄抗体对１００个ＬＤ５０鸭瘟强毒和８．３个Ｃ４８－１强毒菌的攻击具有１００％（８／８只）中和能力，对鸭瘟强毒（１００个ＬＤ５０）和Ｃ４８－１（８．３个）攻毒后５～６小时注射４倍稀释卵黄抗体２．０ｍｌ／只，具有１００％（６／６只）保护（口服有８３．３％保护）；分别以正常量和５倍量的鸭瘟弱毒苗免疫２月龄鸭，５～６小时后攻鸭瘟强毒，结果无一存活，鸭瘟弱毒苗和鸭瘟－禽霍乱二联活苗免疫后３天，对１００个ＬＤ５０鸭瘟强毒攻击获５０％（３／６）保护，７天获８３．３％（５／６）保护。Ａ群菌苗免疫后６天对Ｃ４８－１攻击获６６．７％（４／６只）保护，１２天获１００％保护。鸭瘟－禽霍乱二联活苗免疫后３天对Ｃ４８－１攻击获３３．３％（２／６）保护，７天获８３．３％保护；巴氏杆菌卵黄抗体和血清抗体能明显抑制巴氏杆菌生长并有溶菌现象出现；复方痢菌净、喹乙醇、庆大霉素、链霉素和四环素对多杀巴氏杆菌高度敏感（１７～４１ｍｍ）。     

抗鸡传染性法氏囊病病毒单克隆抗体中和株的建立

将纯化的鸡传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ）组织毒免疫的ＢＡＬＢ／ｃ鼠脾细胞与ＳＰ２／０骨髓瘤细胞融合，用ＥＬＩＳＡ，病毒中和试验检测分泌抗体，获得了６株稳定分泌抗ＩＢＤＶ单隆抗体的杂交瘤细胞，命名为ＮＩＢ－１，ＮＩＢ－２，ＮＩＢ－３，ＮＩＢ－４，ＮＩＢ－５，ＮＩＢ－６；６株ＭＣＡｂ均具ＥＬＩＳＡ特性和免疫沉淀特性，亚类鉴定表明，前４株属于ＩｇＧ２ａ，后２株属于ＩｇＧ１。杂交瘤细胞冻存６个月后复苏，均     

鸡减蛋综合征蜂胶佐剂灭活苗免疫期的试验研究

用三批减蛋综合征（ＥＤＳ）蜂胶佐剂灭活苗（９４０９１２、９４１０２４、９４１１２１）分别免疫成年产蛋母鸡，定期采血，连续检测ＨＩ抗体动态变化，这三批苗６个月的平均ＨＩ抗体滴度分别为７．７、８和７．７（Ｌｏｇ２）；用鸭胚做ＥＤＳＶ血清中和试验，其保护率均为１００％（５／５，５／５，５／５）；用ＥＤＳ２０６油苗和ＥＤＳ白油苗同时分别免疫蛋鸡，做平行对比ＨＩ抗体检测，其６个月的平均ＨＩ抗体效价分别为７．     

鸡新城疫—减蛋综合征蜂胶佐剂灭活二联苗的研究

首次用蜂胶作为佐剂，研制出鸡新城疫－减蛋综合征（ＮＤ－ＥＤＳ）二联灭活 ，在开产前１个月左右，用该苗按０．５ｍｌ／只的剂量皮下或肌肉注射免疫蛋鸡，接种后２０ｄ测ＮＤ抗体（ＨＩ法）效价为６．２５－７．０（ｌｏｇ２，）ＥＤＳ－７６抗体（ＨＩ法）效价为６．５－８．０，用ＮＤ－ＥＤＳ油乳剂灭活二联苗做对照，进行免疫持续期平行测定对比试验，免疫后１８０ｄ，蜂胶苗免疫组鸡的ＮＤ抗体滴度为８．５－８．７，ＥＤＳ     

大肠杆菌油佐剂灭活苗免疫雏鸡抗体消长规律的研究

用鸡源致病性大肠埃希氏菌Ｏ２血甭型制成的油佐剂灭活苗对１５日龄雏鸡进行免疫接种，以测定其抗体消长规律；对免疫后不同抗体滴度的雏鸡进行了攻毒试验。结果表明，免疫１周后可监出抗体，２－３周抗体达到高峰，抗体可持续１０周左右，抵抗同型大肠杆菌攻毒的最低抗体滴度为１：１６－１：３２，免疫保护期可达２个月以上。     

具有IBD移行抗体雏的弱毒苗免疫适期测定

日本西条加须江等用蛋鸡和肉鸡各３群共２４０只进行试验，结果移行抗体价的半衰期平均为 ３． ４６天，预防野毒感染的移行抗体（中和抗体）价为１： ２８。 用 ＳＰＦ鸡试验，给苗后需６ 天产生坚强免疫抗体。根据以上数据计算，移行抗体价低于１：８０ 应进行免疫。第一次免疫局测保护率公有５０％－８０％，如第一次免疫局７天 进行第二次免疫， 保护率达１００％。 第一次免疫最佳 日龄计算法：Ｘ／２ （ｙ－ｚ）／３．４６＝ ８０， ｙ＝ １１． ４９× Ｉｇ１０ｘ＋ｚ－１．８７。说明：Ｙ为首免日龄，Ｚ为测移行抗体价雏日龄，Ｘ为…     

牛轮状病毒性腹泻的研究

从安徽、河南两地黄牛犊腹泻粪样中分离出了３株能在ＭＡ－１０４细胞上稳定繁殖、继代的轮状病毒（标号为ＢＲＶ００７、ＢＲＶ０１４及ＨＮ－７）。中和试验表明，该３株黄牛分离毒与北京奶牛毒ＢＲＶ６５５５及国外参考毒株ＮＣＤＶ之间抗原性无差异，同属轮状病毒血清６型（或牛轮状病毒血清１型），在亚组抗原特异性上均为第Ⅰ亚组。用ＢＲＶ０１４高代次（５０代以上）细胞培养物（ＴＣＩＤ５０＝１０－６．５）于孕母牛产前３个月和１个月经肌肉免疫注射２次，可明显提高母牛初乳中的轮状病毒抗体，在产后２０ｄ，抗体滴度仍能维持在１∶６４；临床观察，免疫母牛所产犊牛的腹泻发生率较对照组降低８３．８％。     

肾型鸡传染性支气管炎病毒油佐剂灭活苗免疫抗体形成规律

以肾型鸡传染性支气管炎病毒油佐剂灭活苗免疫１５日龄ＡＡ鸡，采用间接血凝试验（ＰＨＡ）分别检测免疫后第５、１０、１５、２０。２５、３０、３５、４０天的病毒抗体绘制成免疫抗体形成曲线；采用１５日龄无母原抗体ＡＡ鸡对比试验，分别检测肾型鸡传染性支气管炎病毒强毒株攻毒后不同时间的病毒抗体，绘制成抗体形成曲线。比较两曲线可知肾型鸡传染性支气管炎病毒油性剂灭活苗免疫后第５天可检测到病毒抗体．抗体水平高峰期出现在免疫后第１０～２０天，免疫保护力至少可维持一个月以上、分析攻毒发病鸡群的抗体形成规律，可初步确定采用ＰＨＡ检测免疫鸡群的病毒抗体其免疫临界限为２－４～２－７。     

用于检测猪血清中猪生殖—呼吸道综合征病毒抗体的一种…

为了提高检测猪生殖－呼吸道综合征病毒（ＰＲＲＳＶ）感染猪抗体的血清中和试验（ＳＮ）的敏感性，对不同条件进行了评价和改进，通过在病毒稀释液中添加２０％新鲜猪血清及使用派生于ＭＡ－１０４细胞系的一种受纳细胞克隆（ＭＡＲＣ－１４５），可自始至终获得较高的ＳＮ抗体效价，用于评估ＳＮ试验的待检血清来自两组３周龄，经鼻内感染ＰＲＲＳＶ（ＭＮ－１ｂ株）的猪。用此改良法，在接种后９～１１天首次检出ＳＮ抗体，且于接     

白细胞介素—3对猪瘟病毒E2基因疫苗免疫增强作用的研究

以昆明系小白鼠为试验动物，观察了白细胞介素－３（ＩＬ－３）对猪瘟病毒Ｅ２囊膜糖蛋白（ＨＣＶ Ｅ２）基因疫苗免疫效果的增强作用。用ＤＮＡ重组技术将ＨＣＶ Ｅ２基因和白小鼠ＩＬ－３基因克隆到ｐＩＲＥＳ１ｎｅｏ质粒，因在两者之间有脑心肌炎病毒（ＥＭＣＶ）的核糖体进入位点（ＩＲＥＳ）片段，可得到ＨＣＶ Ｅ２抗体效价。结果显示，ＩＬ－３能显著提高ＨＣＶ Ｅ２基因疫苗的免疫效果，表明ＩＬ－３可作为ＨＣＶ Ｅ２