抗菌肽CecropinB对人工感染大肠杆菌雏鸡的治疗效果研究

以1日龄来航蛋雏鸡为试验对象,研究重组抗菌肽CecropinB治疗雏鸡大肠杆菌感染的效果.120只雏鸡分6个组,每组20只,其中不同剂量抗菌肽治疗组又分为口服和肌内注射两个不同的处理,每个处理10只.致死剂量大肠杆菌肌内注射24 h后,肌内注射和口服不同浓度的重组CecropinB抗菌肽,连续治疗5 d.结果表明,重组抗菌肽CecropinB对大肠杆菌病有较好的治疗效果.其中高剂量(0.75 mL)口服组的效果最佳,治愈率达到80%,中剂量(0.5 mL)口服组与高剂量肌内注射组治愈率同为70%.中剂量肌内注射组与环丙沙星组效果一致,治愈率达到60%,低剂量抗菌肽治疗组治疗效果不如上述所有治疗组.与感染对照组相比,所有组别的雏鸡死亡率显著降低.     

不同结构对囊素样肽的免疫活性影响

化学合成单拷贝（BS）、30拷贝串联（KG30）和30拷贝分支结构（MAP）3种不同结构的囊素样肽，通过体外外周血淋巴细胞刺激增殖试验、杂交瘤细胞抗体分泌刺激试验、E-玫瑰花环试验和体内小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能、新城疫疫苗免疫应答的测定，比较了其免疫增强活性。结果表明，BS和MAP的活性显著高于KG30，BS体外试验活性优于MAP，而MAP体内试验活性优于KS。结构对囊素的活性有显著影响，以分支结构的囊素增强免疫效果最好。     

鸡新城疫融合蛋白基因在大肠杆菌中的表达

根据NDVNL株的F基因序列，自行设计带有XbaⅠ和XhoⅠ酶切位点的一对引物,应用聚合酶链式反应(PCR)扩增含NDVF基因的PFL质粒,扩增结果与设计相符，大小为630bp。该片段覆盖F基因的2/3的抗原决定簇。对该片段两端酶切后，克隆到融合表达载体pThioHisB中，并转化到大肠杆菌Top10内，利用AMP抗性筛选阳性重组子，并用PCR及双酶切鉴定克隆成功，用IPTG化学诱导表达了F基因。经SDS－PAGE电泳分析，结果在分子量约为35KD处可见到表达的蛋白条带。这与根据核苷酸大小计算的蛋白及融合蛋白之和的大小相符。说明外源片段插入正确表达成功。用HRP标记的兔抗鸡抗体与该条带进行Western－Blot检测，该条带呈阳性反应。进一步证实表达正确。通过蛋白灰度扫描显示表达的融合蛋白占菌体总蛋白的20％。     

中国华东地区猪生殖-呼吸道综合征病毒(S_1株)ORF_(5～7)基因特征研究

本研究对我国华东地区猪生殖和呼吸综合征病毒（ＰＲＲＳＶ）分离株Ｓ１主要结构蛋白基因（ＯＲＦ５～７）进行了ＰＣＲ扩增和ＤＮＡ测序分析。结果表明，长度为１５２０ｂｐＤＮＡ序列含有３个阅读框ＯＲＦｓ，即ＯＲＦ５、ＯＲＦ６和ＯＲＦ７，ＯＲＦ５和ＯＲＦ６及ＯＲＦ６和ＯＲＦ７间有部分碱基重叠，且与欧洲型和美洲型ＰＲＲＳＶ相似。ＯＲＦｓ推导的氨基酸序列与美国ＶＲ２３３２和欧洲ＬＶ毒株同源性分析为９９％～１００％和５９％～７８％。ＯＲＦｓ预测的蛋白质分子量、等电点、糖基化位点、亲水性分布图及跨膜螺旋区与ＶＲ２３３２毒株相似。     

犬α1干扰素在毕赤酵母中的分泌表达及其抗病毒活性研究

亚克隆犬α1干扰素(CaIFN-α1)成熟蛋白编码基因并克隆到表达载体pPICZα-A,构建转移重组载体pPICZα-A-CaIFN-α。pPICZα-A-CaIFN-α经SacⅠ酶切线性化后电转化导入毕赤酵母菌株X-33。转化子经PCR分析鉴定后利用甘油增菌和甲醇诱导,实现了CaIFN-α1在毕赤酵母系统中的分泌表达。SDS-PAGE检测结果表明表达产物相对分子质量约为2.7×104,比其推导结果(约1.9×104)大,推测可能是发生了糖基化。酵母分泌表达的CaIFN-α1具有较高的抗病毒活性,约为1.45×106U·mL-1,蛋白含量约为96mg·L-1,比活性为1.49×107U·mg-1。重组CaIFN-α1的生物学活性具有较强的种属特异性,在犬肾细胞(MDCK)上具有很高的抗病毒活性,在鸡胚成纤维细胞上活性较低,而在猫肾细胞(F81)和牛肾细胞(MDBK)上几乎没有抗病毒活性。进一步研究发现,重组犬α1干扰素对犬瘟热病毒和伪狂犬病毒在犬肾细胞中的增殖具有显著抑制作用。     

家鸭流感病毒的流行病学研究 Ⅱ.鸭源A型流感病毒对鹌鹑与鸡的致病性

利用６株鸭源Ａ型流感病毒（ＡＩＶ）的鸡胚传１代、２代或３代尿囊液，采用滴鼻－点眼、腹腔注射、静脉注射或肌注－腹注等途径，分别对鹌鹑、商品来航鸡、ＳＰＦ来航鸡进行人工感染。结果，鹌鹑５０％发病，无死亡；商品鸡１００％发病，死亡６２．５％；ＳＰＦ鸡１００％发病，死亡９２．４％。结果显示，腹腔注射和静脉注射最为有效，滴鼻、点眼的致病效果同样确实。本试验发现雄禽比雌禽易感，发病率高。试验表明，鸭源弱致病性流感病毒对其他禽类存在致病潜力，因而具有一定的流行病学意义及生态学意义。     

啤酒酵母和枸杞对肉鸡生产性能和经济效益的影响

随着我国畜牧业集约化程度的提高和饲料工业的发展，抗生素、化学合成药，如促长素、驱虫剂、调味剂、防腐剂等饲料添加剂也随之普遍使用。由于这些物质可在畜产品中残留，通过食物链给人类健康带来严重的危害。天然植物添加剂是很有发展潜力的绿色饲料添加剂品种之一，它克服了以抗生素可能产生药物残留及动物产生抗药性等的不足，有天然、无残留且稳定性强、易于推广应用等特点，可有效应用于饲料行业中。本研究主要探讨在肉鸡饲料中使用枸杞及啤酒酵母对肉鸡生产性能和养殖成本的影响。     

检测抗猫泛白细胞减少症病毒单克隆抗体的间接ELISA方法

用PEG6000沉淀和蔗糖密度梯度离心从细胞培养物中纯化猫泛白细胞减少症病毒(FPV),以纯化病毒包被酶标反应板,建立了检测猫泛白细胞减少症病毒单克隆抗体(FPV-McAb)的间接ELISA。本法具有特异性强、重复性好、敏感性高等优点,本试验比HI试验敏感64倍,阳性检出率为HI试验的两倍。在两次杂交瘤细胞融合中,共检出12株阳性孔。     

南京玄武湖动物园观赏禽类健康带毒情况初步调查

1987～1988年间,南京玄武湖动物园5种观赏禽类中有血凝性病毒的分离率为7/94,且均存在于野鸭中(7/77),其中6株为NDV,1株待定:而马立克氏病病毒、禽白血病病毒和野鸭血清中EDS—76抗体检出率均为O;鸳鸯、仙鹤、天鹅、等水禽和野鸭、野鸡、孔雀等岸养观赏禽中轮状病毒检出率为5/41,且均存在于水禽中(5/20)。