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犬瘟热病毒抗体检测方法的比较研究 总被引:19,自引:0,他引:19
用犬瘟热(CD)弱毒和自制的高免犬血清,建立了检测犬瘟热病毒(CDV)抗体的中和(SN)试验、间接荧光抗体技术(IFAT)和间接免疫酶染色法。这3种方法对38份CD弱毒疫苗免疫犬血清抗体效价的测定结果表明,当被检血清稀释度为1∶100时,SN试验、IFAT和间接免疫酶染色法测定时的阳性血清数分别为29,7和31份,IFAT和间接免疫酶染色法测定结果相对于SN试验结果的符合率分别为42.1%和94.7%。同时发现,当SN试验测定的血清效价在1∶100以上时,IFAT测定结果总是在1∶25以上,间接免疫酶染色法测定结果总是在1∶100以上。3种方法以各自初步确定的CDV血清抗体效价完全保护值指标计算所测血清的完全保护率,SN试验为76.3%,IFAT为78.9%,间接免疫酶染色法为81.6%。据此认为,IFAT和间接免疫酶染色法均可部分代替SN试验用于CD疫苗免疫效果的评价、免疫犬抗体水平的监测以及CD的流行病学调查 相似文献
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用微量补体结合试验对感染熊脑炎病毒而死亡的熊的实质脏器,熊脑炎腺病毒(BA-1株)的犬肾细胞培养物、试验感染犬、豚鼠急性发病期的肝浸液、腹水、血液进行抗原诊断;对6份采自临床健康熊血清和试验感染犬、豚鼠恢复期血清进行抗体诊断。结果表明,本法简便省时,特异性强,可用于熊病毒性脑炎的抗原、抗体的特异性诊断及流行病学调查。 相似文献
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由牛 β-酪蛋白 ( β-Casein)启动子与大鼠乳清酸蛋白 ( WAP)启动子融合及串联构建成 2个组织纤溶酶原激活剂 ( t-PA) c DNA乳腺定位表达载体 p SVL-βΔWAP-PA和 p SVL-WAPβ-PA。将这 2种表达质粒分别注入怀孕家兔乳腺导管中 ,溶圈试验结果显示 ,2种质粒均能在家兔乳腺中表达 ,且以分娩后第 5天的乳汁中表达水平最高 ,分别为 70 0 μg/ L和 50 0 μg/ L。本试验为进一步研究 t-PA基因乳腺定位表达调控和建立 t-PA乳腺生物反应器奠定了基础 相似文献
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鸭冠状病毒的分离目前国内外尚无报道.我们将回归发病鸭的肠粪及肠内容物处理后,经羊膜腔、尿囊腔接种12~14日龄鸭胚,37℃培养48小时后取羊水和尿囊液继代,将第5代的鸭胚羊水、尿囊液混合(称DCV5)并对其进行系统鉴定,结果表明;该病毒在鸭胚;其TCID50为5.0,电镜负染观察多呈不规整的圆形,直径80~120nm。有囊腹,病毒粒子外周有花瓣样突起。核酸型为RNA型,对乙醚敏感、56℃15分钟即可使其失去感染性,在pH3条件下室温3小时仍保持一定活力,该毒接种幼鸭可引起幼鸭腹泻症状,接种幼鸡和火鸡不引起任何症状。 相似文献
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牛BLG/hEPO和大鼠WAP/hEPO基因在家兔乳腺中的表达 总被引:1,自引:1,他引:0
将人红细胞生成素 (h EPO)基因组 DNA(g DNA)与 1.1kb牛 β-乳球蛋白 (BL G)基因的 5′端上游调控序列融合 ,构建了 p CMV- BL G- EPO- b GH poly A(p CBEA)乳腺定位表达载体。该载体与已构建的大鼠乳清酸蛋白 (WAP)基因 5′端上游调控序列和 h EPO融合基因 p WAP- EPO- WAP3′U TR(p WE3′)和 p CMV- WAP- EPO- b GH poly A (p CWEA )经脂质体包裹后 ,通过显微外科方法 ,经乳腺导管注入妊娠中后期家兔乳腺内 ,进行短暂表达。于家兔分娩后 1~ 2 5 d采奶 ,EL ISA检测乳汁中 EPO含量 ,3个载体均获得表达。表达水平从高到低依次为 p CWEA、p CBEA、p WE3′;表达量为 0 .116~ 0 .75 3μg/ L ,且表达一直持续整个泌乳期 相似文献
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人红细胞生成素转基因小鼠乳腺生物反应器的建立 总被引:3,自引:1,他引:2
将 2.4 kb 的人红细胞生成素(h E P O)基因组基因(g D N A)m inigene 克隆于 0.977 kb 大鼠乳清酸蛋白( W A P)5′调控序列下游和 0.85 kb W A P3′侧翼序列上游,构建了 h E P O 乳腺定位表达载体 p W A P E P O W A P3′ U T R(p W E3′)。载体经 Sac I I酶切、回收并纯化后作为目的基因,通过显微注射方法导入小鼠受精卵的雄原核,共注射 500 枚卵,移植 300 枚卵至 29 只假孕母鼠输卵管内,获得仔鼠 55 只。采取鼠尾,提取基因组。经 P C R 检测,阳性鼠 22 只; Southern blotting 检测,阳性鼠 16 只,其中 9 只母鼠,7 只公鼠。将 16 只首建者小鼠分别与非转基因鼠交配,共获得 F1 代仔鼠 157 只。应用 P C R 方法对 F1 代小鼠进行检测,结果首建者1 号母鼠所生的 6 只仔鼠中有 3 只为阳性。与此同时,于 9 只雌性首建者分娩后第 10 天采奶,应用 E L I S A 方法对乳汁中的 E P O 进行检测,结果 6 只母鼠获得表达,表达量为 0.12~1.59 μg/ L。 相似文献