猪场爆发猪繁殖与呼吸综合征的临床诊断及实验室检测

在对某猪场疑似猪繁殖与呼吸综合征的临床诊断、病理诊断、抗体快速金标检测、回归动物实验和细胞病变观察的基础上,参考GenBank上PRRSVLV和VR-2332毒株核苷酸序列,设计并合成一对特异性引物,以提取来自贵州某猪场猪繁殖与呼吸综合征疑似病料（包括血液、肝、肺、肾、淋巴结、心、脾组织）的总RNA为模版,应用反转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）方法,经94℃预变性2min;94℃变性45s,60℃退火1min,72℃延伸1min进行35个循环;72℃再延伸10min进行扩增。扩增产物经回收纯化后,应用pMD18-T载体进行克隆后测序。测序结果表明,所扩增DNA片段大小为716bp,该核苷酸序列与湖南发现的PRRSV序列同源性为100％。本实验结果说明临床诊断及实验检测方法作为猪繁殖与呼吸综合征的诊断方法是可靠的,可为猪繁殖与呼吸综合征诊断提供参考依据。     

猪场猪繁殖与呼吸综合征病毒感染的诊断

为摸清贵州省某猪场猪只发病死亡的原因,采用流行病学调查、临床症状观察、病理解剖诊断、猪繁殖与呼吸综合征抗体快速金标检测卡检测和RT-PCR检测核酸确诊等方法,对该猪场发病猪进行了诊断.试验诊断结果表明:通过流行病学调查、剖检病理和猪繁殖与呼吸综合征抗体快速金标检测卡检测初步诊断该猪场发病猪疑似猪繁殖与呼吸综合征病毒感染,RT-PCR检测核酸确诊为猪繁殖与呼吸综合征病毒野毒感染.     

猪繁殖与呼吸综合征的RT-PCR诊断与防制

2007年7月,周口市某猪场发生了一种以初产猪流产、死产为特征的疾病。根据猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)美洲株VR-2332ORF7基因序列设计1对特异性引物,提取流产胎儿的肺、肝等组织中的RNA,经RT-PCR扩增,检测PRRSV为阳性,结合病史和临床症状,诊断为猪繁殖与呼吸综合征。对该猪场采取综合防制措施,取得了较好的效果。     

猪场爆发猪繁殖与呼吸综合征的临床诊断及实验检测

摘 要: 猪繁殖与呼吸综合征是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引起的猪繁殖和呼吸道接触性传染病。临床特征为母猪流产、死胎和木乃伊胎增多,仔猪出现呼吸道症状和断奶前死亡率增高以及免疫抑制,严重危害种公猪和繁殖母猪及其仔猪。本文参考 GenBank上PRRSV LV和VR-2332毒株核苷酸序列,设计并合成一对特异性引物,以提取来自贵州某猪场猪繁殖与呼吸综合征疑似病料（包括血液、肝、肺、肾、淋巴结、心、脾组织）的总RNA为模版,应用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)方法,经94℃ 预变性2 min;94℃变性45s,60℃退火 1min,72℃延伸1min进行35个循环;72℃ 再延伸10min进行扩增。扩增产物经0.8%琼脂糖凝胶电泳检测,结果表明所扩增的目的DNA条带大小约750bp,与预期大小相似。扩增产物经回收纯化后,应用pMD18－T 载体进行克隆后测序。测序结果表明,所扩增DNA片段大小为739bp,该核苷酸序列与湖南发现的PRRSV序列同源性为100%。本实验说明临床诊断及实验RT-PCR检测方法作为猪繁殖与呼吸综合征的诊断方法是快速有效的,可为猪繁殖与呼吸综合征诊断提供参考依据。     

广西出现猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪圆环病毒2型混合感染

2004年4月以来,广西的桂林、玉林、南宁、崇左、贵港、来宾6市共8个规模化猪场均发生以肺部严重病变、淋巴结肿大出血为主要特征的疫病。在流行病学调查、临床症状、病理剖检的基础上,采用已建立的诊断猪繁殖与呼吸综合征病毒的RTPCR技术和诊断猪圆环病毒2型的PCR技术,从这几个规模化猪场的病料中均扩增出特异的目的基因片段,证实为猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪圆环病毒2型混合感染。     

一例猪繁殖与呼吸综合征高致病性毒株与链球菌混合感染的实验室诊断

某规模化自繁自养猪场产房母猪出现流产,保育猪关节肿胀、倒地不起、大量死亡,为研究发病原因,采集流产胎儿、死亡仔猪的肺脏、脾脏、淋巴结和关节液,进行分子生物学检测,病毒和细菌分离鉴定,并检测不同胎龄母猪猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体,结果显示猪繁殖与呼吸综合征病毒检测为阳性,使用PAM分离到一株猪繁殖与呼吸综合征病毒,经序列鉴定为高致病性毒株;抗体结果表明四胎及以上母猪猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体阳性率异常升高;病料分离的细菌经鉴定为猪链球菌,经实验室诊断确定猪场发病的原因为猪繁殖与呼吸综合征高致病性毒株与猪链球菌混合感染。     

河南省部分猪场猪繁殖与呼吸综合征和猪瘟血清抗体检测

为了解河南省部分猪场猪繁殖与呼吸综合征和猪瘟的抗体保护水平,2018年采用ELISA方法,对河南省部分一级监测网点猪场开展了猪繁殖与呼吸综合征和猪瘟血清抗体检测。检测结果显示:猪繁殖与呼吸综合征抗体总阳性率为91.28%,猪瘟抗体总阳性率为95.87%。其中:后备猪、种公猪、经产母猪、保育猪、育肥猪血清样品的猪繁殖与呼吸综合征抗体阳性率分别为93.68%、93.87%、92.16%、88.93%、88.65%,猪瘟抗体阳性率分别为98.51%、98.77%、98.45%、85.71%、91.82%;祖代场、父母代场、商品场血清样品的猪繁殖与呼吸综合征抗体阳性率分别为94.63%、88.02%、89.46%,猪瘟抗体阳性率分别为98.40%、96.16%、91.03%。检测结果表明:河南省一级监测网点猪场的猪繁殖与呼吸综合征和猪瘟抗体水平较高,但保育猪群和育肥猪群偏低,需要对其加强抗体监测,以确定最佳免疫方案;商品代猪场抗体水平略低于祖代和父母代猪场,这要求畜牧兽医部门需同时加强对所有猪场的日常监督与监管。     

高致病性猪繁殖与呼吸综合征的调查报告

为了解2011年盘锦地区免疫猪群中高致病性猪繁殖与呼吸综合征的免疫效果和感染状况,采用ELISA和荧光定量RT-PCR方法分别检测了本年度1-12月采集到的2160份猪血清和120份猪组织样品。结果表明,受检的猪组织样品中均无高致病性猪繁殖与呼吸综合征抗原;大洼县、盘山县、兴隆台区、双台子区猪繁殖与呼吸综合征抗体阳性率分别为82.2%、81.1%、78.8%、81.1%;种猪场、商品代猪场、散养户的猪繁殖与呼吸综合征抗体阳性率分别为90%、81.3%、75%。从总体来看,2011年盘锦地区的猪繁殖与呼吸综合征免疫状况良好,无猪繁殖与呼吸综合征疫情发生。     

猪圆环病毒2型和猪繁殖与呼吸综合征病毒混合感染病例的实验室诊断

为确诊贵阳市某养猪场生猪发病死亡的原因,采集3头病猪的血液、肺脏、肾脏、脾脏、淋巴结病料,采用PCR、qRT-PCR方法进行猪圆环病毒2型、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪瘟病毒核酸检测。结果:在血液及组织样品中猪圆环病毒2型核酸检测均为阳性,猪瘟病毒核酸检测均为阴性;在血液样品中猪繁殖与呼吸综合征病毒核酸检测结果为阴性,而组织样品中检测结果为阳性。结论:猪场病例存在猪圆环病毒2型、猪繁殖与呼吸综合征病毒混合感染。与血液样品相比较,猪繁殖与呼吸综合征病毒核酸在病猪的组织病料中更容易检出。     

猪繁殖与呼吸综合征区域流行病学调查

为了解黑龙江省大庆市及周边地区猪群猪繁殖与呼吸综合征感染情况,应用RT-PCR方法,对屠宰场和疑似猪场采集的共计251套组织样品进行了核酸检测。经比较分析,疑似猪场组织样品检出率为45.45%,屠宰场组织样品检出率为2.08%。     

一步法RT—PCR检测猪繁殖与呼吸综合征病毒的方法建立及应用

根据GeneBank公布的猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒（PRRSV）美洲型毒株VR-2332序列设计了一对特异性引物P1／P2,扩增片段为508bp,从而建立了检测PRRSV的一步法RT—PCR蛤测方法,特异性试验表明,该引物均不能扩增其它常见的与繁殖障碍有关的病毒基因。敏感性实验表明,该引物可以检测到10^-5TCID50的病毒含量。利用该方法对青海某猪场中20份临床上疑似PRRS的组织进行检测,其中16份样品呈PRRSV阳性结果,阳性率为80％,表明建立的该方法完全可以快速检测组织中的PRRSV。     

沈阳市及周边地区规模化猪场猪繁殖与呼吸障碍综合征疫苗免疫效果及病原调查

为了解沈阳及周边地区猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒感染情况和疫苗免疫效果,应用已建立的猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒RT—PCR．检测方法在2011年1月～2013年6月期间,对来自辽宁省沈阳、大连、鞍山等16个市县地区的猪场和屠宰场的送检样品进行检测。结果发现,2011年辽宁省猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒的阳性率为9．28％,2012年为27．3％,2013年上半年为0．6％,3年平均阳性率为12．1％;同时选择沈阳市5家规模化养猪场3年采集血清902份进行猪繁殖与呼吸障碍综合征疫苗免疫效果的评价,结果显示,2011年5个猪场猪繁殖与呼吸障碍综合征疫苗免疫抗体合格率为97．3％,2012年为98．8％,2013年上半年为94．8％,3年平均阳性率为97．5％;另外,对沈阳市某猪场免疫母猪所产仔猪的母源抗体进行为期7周的监测,发现,仔猪猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒母源抗体在7日龄时达到最大值,直到21日龄维持在较高水平,之后呈现下降趋势。     

一例猪繁殖与呼吸综合征的RT-PCR诊断

利用猪繁殖与呼吸综合征的检测性引物对一例疑似猪繁殖与呼吸综合征的病猪进行RT-PCR检测，结果扩增出目的条带。     

应用RT-PCR技术快速诊断广西猪繁殖与呼吸综合征病毒研究

根据猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）的N基因序列设计了一对引物，建立诊断PRRSV的RT-PCR技术。对从广西不同地区10个猪场送检的24份病猪材料进行检测。有4个猪场的5份病料检出PRRSV，证实广西存在PRRSV感染。     

猪繁殖与呼吸综合征的诊治与防控

猪繁殖与呼吸综合征(Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome,简写PRRS)亦猪蓝耳病是目前对我国乃至世界养猪生产困扰最大的原发性疾病,这是由于该病毒不断变异造成的。因此,研究猪繁殖与呼吸综合征对于促进养猪业的发展和保障人类健康具有重要的意义。对天津市武清区崔黄口镇某猪场进行调查发现,该猪场连续发生猪繁殖与呼吸综合征,并有死亡病例。在做记录的同时,调查了该镇其余养猪场,对猪繁殖与呼吸综合征有了更详细的了解,本文就对猪繁殖与呼吸综合征的流行病学调查以及防制进行讨论。     

抗体快速金标检测卡结合RT-PCR技术诊断猪繁殖与呼吸综合征

采用猪蓝耳病抗体快速金标检测卡对贵州省不同发病猪场进行血清学检测,其弱阳性检出率为54%。在此基础上参考GenBank登录的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)LV和PRRSV VR-2332毒株核苷酸序列,设计一对特异性引物,用提取上述检测的某猪场猪繁殖与呼吸综合征疑似病料(包括血液、肝、肺、肾、淋巴结、心、脾组织)总RNA为模版,应用RT-PCR方法扩增出目的条带,大小为739 bp,与预期的结果相同。分析表明:该核苷酸序列与已报道的Hunan-3株的同源性为100%,与国内最早PRRSV分离株CH-1 a同源性为95%,与北美代表株VR-2332和欧洲代表株LV的同源性分别为89.2%和29.2%。说明采用猪蓝耳病抗体快速金标检测卡结合RT-PCR方法作为猪繁殖与呼吸综合征的诊断方法是准确、可行的。     

母猪流产与高热综合征主要病原检测以及规模猪场猪繁殖与呼吸综合征血清学监测与分析

2006年发生于我国猪群的母猪流产与高热综合征对我国养猪业造成很大经济损失。我们对2006年底11个发生母猪流产与高热综合征猪场常见病原进行了检测，结果26份流产胎儿或高热病组织样品经RT—PCR检测有25份PR_RSV核酸为阳性。7个猪场中有3个场检测到猪瘟病毒抗原阳性，7个猪场中有5个猪场存在伪狂犬野毒抗体，河北某场检测到弓形体抗体呈阳性。这说明PRRSV感染很可能是母猪流产和高热综合征疫情的重要原因之一，但是真正的病因和发病机理还有待于进一步深入的研究工作。本研究利用ELISA方法对2006年全年部分省市52个规模猪场共597份样品进行了PR．RSV血清学检测，发现80、8％猪场猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRPSV）血清学阳性，样品阳性率为38．7％。说明PR．RSV感染在我国已经很普遍，对于PRRSV的控制应采取综合措施，而不可仅仅依赖疫苗。     

高致病性猪繁殖与呼吸综合征与猪伪狂犬病混合感染的诊断

为了解信阳某猪场发病仔猪死亡原因,通过流行病学调查、病理解剖、伪狂犬病毒PCR检测、PRRSV的PCR检测、PRRSV分离株ORF5基因的PCR扩增及序列分析等方法,对该猪场发病猪进行了诊断。结果表明,该猪场猪只为高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒（HP-PRRSV)和伪狂犬病病毒（PRV）的混合感染。     

一例猪繁殖与呼吸综合征的诊治

某规模猪场的种猪群出现繁殖障碍,保育猪发生呼吸道综合征,造成重大损失.经诊断为猪繁殖与呼吸综合征,采用综合性防治措施,疫情得到有效控制.     

猪繁殖与呼吸综合征的研究进展

猪繁殖与呼吸综合征(Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome,PRRS)由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引起,以母猪繁殖障碍和仔猪呼吸道综合征为主要特征。近几年,由于PRRSV不断变异,毒力更强的新型PRRSV毒株严重危害着养猪业。2006年入夏以来,我国南方一些猪场暴发了一种以高热、高发病率和高死亡率为特征的传染病,运用分子生物学方法诊断与鉴定,最后证实猪繁殖与呼吸综合征病毒变异株为主要病原之一。为更好地防制猪繁殖与呼吸综合征在我国的发生与流行,笔者对PRRSV的病原学、流行病学、致病机制和遗传变异等方面的研究进展进行综述。