猪细小病毒在PK15细胞中增殖规律的研究

猪细小病毒毒株在不同细胞系上的生长情况不尽相同,如不能掌握其规律,将难以生产出优质的疫苗。对PPV（长春株）在PK15和ST细胞上生长情况进行了研究,在PK15细胞系中重点比较了不同的病毒接种方法、病毒接种量和病毒收获时间等因素对病毒产量的影响。研究结果显示：本毒株在PK15和ST两种细胞系上的病变特征不同,但生长规模相似。在PK15细胞上按2％接种量、分步接种、80h时收获病毒,最终得到的病毒滴度（TCID50）最高。提示这是一种比较好的生产方案。然而,进一步的大规模培养试验是有必要的。     

规模化猪场常见疾病流行病学调查

猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)、伪狂犬病(PR).猪瘟(CSF)和猪圆环病毒病(PCVD)是4种威胁我国养猪业的重大传染病,但到目前为止还缺乏完善的防治手段.为了掌握这4种疾病的流行特点,本研究采用ELISA、免疫荧光等方法对2006年1月至2007年4月期间8个省市向本中心送检的6 918份病料及血清进行检测.此外,所有结果均用PCR/RT-PCR法进行验证,以保证结果的客观性和准确性.这4种病毒在所调查的养殖场均有很高的感染率.其中,PRRS、PR、CSF、PCVD的感染率分别43%、31%.7%和29%.在所检测的78个养猪场中,有53%的养猪场发生上述2种或多种病毒的合并感染.其中,CSF与PRRS、PR和PCVD双重感染的发生率分别为7.69%.7.69%和1.28%;PR与PRRS和PCVD双重感染发生率分别为19.23%和2.56%;PRRs和PCVD双重感染发生率为3.84%;PCVD-PRRS-PR,PCVD-CSF-PRRS及PR-PRRS-CSF三重混合感染率分别为5.13%.1.28%和2.56%;PR-PRRS-CSF-PCVD四重感染发生率为1,28%.无论是按季节还是按区域比较,PRRS的发病率最高,CSF的发病率最低.以上数据说明这4种疾病确实是当前养猪业丞待解决的问题,需要定期监测以便采取相应防治措施.     

规模猪场种猪扁桃体中猪瘟病毒的检测与猪瘟抗体监测方法的分析

猪瘟仍然是当前我国规模猪场需要重点防控的传染病,其发病呈现种群持续感染和非典型猪瘟的特点,因此,净化种群是控制猪瘟的根本性措施.通过对国内部分规模猪场种猪扁桃体活体采样进行免疫荧光检测,结果表明,种猪猪瘟病毒(CSFV)带毒率为8.9%(313/3516),总体阳性率为6.43%(351/5459),经过净化后,所有猪场种群CSFV带毒率显著降低.通过对临床血清学样品的对比分析,发现检测猪瘟抗体的阻断ELISA方法和间接血凝试验方法在判断结果上有一致性,但是检测抗体的滴度并无相关性.规模猪场需要对猪瘟采取综合防治措施来达到净化猪瘟的目标.     

山东猪圆环病毒病的流行病学调查

猪圆环病毒2型（PCV2）有致病性，与猪断奶后多系统衰竭综合征（PMWS）、猪皮炎与肾病综合征（PDNS）、猪呼吸道病复合征（PRDC）、猪的流产和死亡综合征（SAMS）、猪增生性和坏死性肺炎（PNP）以及猪先天性脑震颤（CT）等疾病的发生密切相关。自1991年由加拿大Clark报道之后，美国、法国、西班牙、意大利、德国、丹麦、荷兰、北爱尔兰、墨西哥和日本等国相继报道了该病的发生。我国北京、上海、江苏及台湾等地也已证实有本病存在。该病给世界各国养猪业造成了巨大的经济损失。     

母猪流产与高热综合征主要病原检测以及规模猪场猪繁殖与呼吸综合征血清学监测与分析

2006年发生于我国猪群的母猪流产与高热综合征对我国养猪业造成很大经济损失。我们对2006年底11个发生母猪流产与高热综合征猪场常见病原进行了检测,结果26份流产胎儿或高热病组织样品经RT-PCR检测有25份PRRSV核酸为阳性。7个猪场中有3个场检测到猪瘟病毒抗原阳性,7个猪场中有5个猪场存在伪狂犬野毒抗体,河北某场检测到弓形体抗体呈阳性。这说明PRRSV感染很可能是母猪流产和高热综合征疫情的重要原因之一,但是真正的病因和发病机理还有待于进一步深入的研究工作。本研究利用ELISA方法对2006年全年部分省市52个规模猪场共597份样品进行了PRRSV血清学检测,发现80.8%猪场猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)血清学阳性,样品阳性率为38.7%。说明PRRSV感染在我国已经很普遍,对于PRRSV的控制应采取综合措施,而不可仅仅依赖疫苗。     

近期部分规模化猪场猪伪狂犬病野毒抗体监测情况调查

猪伪狂犬病仍然是我国猪群的重要威胁性传染病，通常造成母猪繁殖障碍以及仔猪的神经症状和高死亡率，同时伪狂犬病病毒也是猪呼吸系统疾病综合征的重要原发性病原。用gE-ELISA野毒鉴别诊断方法共检测了来自8个省、市46个猪场1940份血清样品，其中阳性样品657份，样品总阳性率33.87%，阳性猪场25个。在检测的各场中，阳性率最高猪场达到75.76%(125/165)。而部分进行了科学的疫苗免疫和实施了严格的生物安全措施的猪场始终保持猪伪狂犬病阴性(0/135)。利用基因缺失疫苗科学免疫配合伪狂犬抗体鉴别诊断技术是控制和净化伪狂犬病的重要手段。     

一株猪捷申病毒的分离与鉴定

北京地区某猪场猪群疑似感染猪捷申病毒(porcine teschovirus,PTV),为了分离与鉴定该病毒,从采集的脑组织样品中分离出病毒,并从病毒中提取总RNA,根据已报道的引物序列,经RT-PCR扩增得到部分编码主要结构蛋白的VP1基因和高度保守的5'-UTR区基因序列,将这些基因克隆到pEASY-Blunt载体中,经序列测定,与GenBank上的毒株序列进行比对。试验结果表明,分离的毒株与猪捷申病毒同源性为95%~100%。本试验成功分离获得一株猪捷申病毒北京地方流行毒株,命名为 10BJ02株。     

4种病毒性猪病流行病学调查与分析

利用ELISA和PCR／RT—PCR方法对2010年6月-2011年9月来自20个省市的病料和血清共13824份,分别进行了抗原和抗体的检测,以调查猪瘟（CSF）、猪圆环病毒病（PCVD）、猪蓝耳病（PRRS）、猪伪狂犬病（PR）的流行情况。结果显示：抗原和猪场阳性率最高的均是PCVD,分别达到63．14％（334／529）和89．69％（87／97）,最低的均是PR,分别达到10．01％（354／3537）和38．67％（58／150）;抗体水平最高的是PR,最低的是PCVD,说明疫苗免疫具有一定效果;证实了目前PRRSV和HP—PRRSV均是流行毒株,并且在同一猪场同时检出这两个毒株的几率很大。以上结果呈现了4种疾病的感染情况,以期为养猪业提供参考,从而采取合理有效的防治措施。     

不同CpG-DNA序列对鸡ND HI影响的研究

将16种人工合成的CpG-DNA与新城疫Ⅳ弱毒苗(La Sota株)合用,免疫14日龄雏鸡,于免疫前及免疫后7、14、21天测鸡HI抗体效价,筛选出4种CpG-DNA短序并进行SPF鸡重复试验,结果表明:筛选的4种CpG短序(1.AACGTr AACGTr;2.AACGTC AACGTC;3.AGCGTC AGCGTC;4.AGCGCT AGCGCT)可显著提高鸡体的体液免疫水平.     

母猪流产与高热综合征主要病原检测以及规模猪场猪繁殖与呼吸综合征血清学监测与分析

2006年发生于我国猪群的母猪流产与高热综合征对我国养猪业造成很大经济损失。我们对2006年底11个发生母猪流产与高热综合征猪场常见病原进行了检测，结果26份流产胎儿或高热病组织样品经RT—PCR检测有25份PR_RSV核酸为阳性。7个猪场中有3个场检测到猪瘟病毒抗原阳性，7个猪场中有5个猪场存在伪狂犬野毒抗体，河北某场检测到弓形体抗体呈阳性。这说明PRRSV感染很可能是母猪流产和高热综合征疫情的重要原因之一，但是真正的病因和发病机理还有待于进一步深入的研究工作。本研究利用ELISA方法对2006年全年部分省市52个规模猪场共597份样品进行了PR．RSV血清学检测，发现80、8％猪场猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRPSV）血清学阳性，样品阳性率为38．7％。说明PR．RSV感染在我国已经很普遍，对于PRRSV的控制应采取综合措施，而不可仅仅依赖疫苗。