贵州省规模猪场伪狂犬病免疫和感染情况调查

为摸清贵州省规模猪场伪狂犬病免疫与野毒感染情况,利用g E-ELISA方法,对从贵州省181个规模猪场采集的3 192份猪血清样品进行抗体检测。结果显示:129个规模场存在伪狂犬病阳性样品,场点阳性率为71.27%(129/181),检出538份阳性样品,样品阳性率为16.85%(538/3 192)。其中:种猪场场点阳性率为64.29%(18/28),样品阳性率为30.81%(65/211);免疫猪场场点阳性率为51.39%(25/47),样品阳性率为9.20%(110/1 196);其他猪场场点阳性率为81.13%(86/106),样品阳性率为20.34%(363/1 785)。对从26个免疫猪场采集的1 061份样品进行g B-ELISA抗体检测,发现场点免疫抗体阳性率为100%(26/26),样品阳性率为60.79%(645/1 061)。对来自屠宰场等16个监测场点的179份扁桃体样品进行伪狂犬病病毒荧光PCR检测,检出1份阳性样品。调查结果表明,贵州省规模猪场存在伪狂犬病野毒感染且隐性带毒情况较为严重;疫苗免疫虽有一定的免疫效果,但个体免疫抗体阳性率不高。调查结果提示,贵州省应加强PRV野毒检测,掌握病毒基因变异情况,科学调整免疫程序,从而为全省规模猪场的伪狂犬病净化奠定基础。     

长沙市对伪狂犬病野毒感染的调查

为了解长沙市规模猪场伪狂犬病流行情况,对市内47个规模猪场送检的1534猪血清样品和22个已免疫伪狂犬基因缺失苗规模场送检的1300份血清样品,用ELISA方法对猪伪狂犬病野毒感染抗体（gpI抗体,下同）和免疫抗体（gB抗体,下同）进行检测。结果表明,长沙市规模猪场猪伪狂犬病gpI抗体阳性率为20.9%,场阳性率为44.7%;22个免疫猪伪狂犬基因缺失苗规模猪场猪伪狂犬病gpI抗体阳性率下降1.8%,场阳性数下降4.6%。结果表明,通过利用猪伪狂犬病基因缺失疫苗科学免疫,同时配合伪狂犬野毒抗体检测技术可以控制和净化规模猪场猪伪狂犬病流行。     

2014年滨州市猪伪狂犬病血清抗体检测与分析

为了解猪场伪狂犬病疫苗免疫效果及猪伪狂犬病感染情况,指导猪伪狂犬病的防控,采用ELISA方法对滨州市4个县区43家不同规模自繁自养猪场453份血样进行了猪伪狂犬病病毒gB抗体和gE抗体检测。检测发现,母猪样品gB抗体阳性率为75.58%,育肥猪样品阳性率为68.67%;猪场阳性率高于70%的猪场占比为74.42%。母猪和育肥猪样品伪狂犬病病毒gE抗体阳性率分别为25.41%与26.67%,猪场阳性率分别为46.51%与44.33%,且各县区之间存在区域性差异。     

云南省部分猪场猪伪狂犬病血清学调查

为调查了解云南省猪场伪狂犬病疫苗免疫抗体水平和野毒感染情况,采用ELISA-gB和ELISA-gE抗体检测方法对云南省部分猪场送检的602份血清样品进行了检测分析。结果表明:检出疫苗免疫猪场伪狂犬病的抗体阳性率为92.73%,未免疫疫苗的猪场伪狂犬病野毒gE抗体阳性率为38.46%。说明猪伪狂犬病野毒感染在云南省猪场中普遍存在,疫苗免疫过的猪场伪狂犬病的抗体水平较高,但不同阶段猪的抗体水平存在一定的差异。     

2016—2018年浙江省部分规模猪场伪狂犬病血清学定点监测

为了解浙江省规模猪场伪狂犬病野毒感染情况及变化趋势,2016—2018年对26家定点规模猪场开展伪狂犬病血清学监测。场内选择育成/育肥猪进行采样,每年度采集至少30份血清样品,采用ELISA方法进行猪伪狂犬病病毒gE抗体检测,共检测样品7 519份。2016—2018年,共检出阳性样品2 813份,个体阳性率为37.4%,各年度个体阳性率分别为44.7%、37.4%、30.6%,呈下降趋势,但个体阳性率在50.0%以上的规模猪场数量都在8个以上。结果表明,通过加强疫苗免疫,浙江省规模猪场伪狂犬病野毒感染正逐步得到控制,但感染程度仍较为严重,感染范围依然较广。因疫苗免疫效果受疫苗生产厂家、毒株种类、免疫次数等多种因素影响,所以应根据监测结果,及时调整疫苗种类和免疫程序,同时强化生物安全,逐步实现规模场伪狂犬病净化目标。     

2018年河南省郑州市定点监测猪群伪狂犬病gE抗体检测

为了解河南省郑州市2018年规模猪场的伪狂犬病野毒感染情况,利用gE抗体ELSIA方法,对免疫过猪伪狂犬病gE基因缺失疫苗的36个不同养殖规模的定点监测猪场,进行gE抗体检测。2018年1—12月,共检测血清样品1 057份,检出阳性场27个,场群阳性率为75.0%(27/36);检出阳性样品309份,样品阳性率为29.2%(309/1 057)。结果表明,郑州市伪狂犬病野毒感染面较广,流行率较高,存在较高的疫情暴发风险。存栏500头以下规模猪场的gE抗体阳性率(69.8%)是存栏3 000头以上的规模场(19.1%)的3.65倍,表明养殖规模越小,伪狂犬病野毒感染风险越大。利用荧光PCR方法对gE抗体阳性样品进行检测,检出阳性32份,阳性检出率为35.6%(32/90),表明感染猪群的持续带毒、排毒现象较为严重。建议规模化养猪场加强gE基因缺失疫苗免疫和gE抗体检测,及时淘汰阳性猪,同时结合隔离、消毒等综合防控技术,逐步实现猪伪狂犬病的控制与净化。     

江苏省猪伪狂犬病流行病学调查及两种疫苗免疫效果评估

为了掌控江苏地区规模化猪场伪狂犬病野毒的感染情况及其流行性趋势,比较变异株猪伪狂犬病疫苗(C株)和Bartha-K61疫苗的免疫防控效果。于2017年5月份至2019年1月份对江苏地区59个规模场进行采样,通过间接ELISA方法检测猪群中的gE抗体来鉴定猪群是否被伪狂犬病野毒感染。另外,在一猪伪狂犬病阳性的规模猪场进行变异株猪伪狂犬病疫苗(C株)和Bartha-K61疫苗的防控效果的实验,通过检测猪伪狂犬病gE,gB抗体及中和抗体来判定猪群的猪伪狂犬病抗体保护水平。显示4 608份检测血样中,gE阳性1 681份,阳性率36%,母猪群gE阳性率46%,育肥猪群gE阳性率28%,59个猪场中育肥阶段gE阳性的猪场22个,占比37%。在其中一个商品猪群gE抗体100%阳性猪场进行2组猪伪狂犬病疫苗的实验,通过实验2组商品猪gE抗体18周龄至出栏前均为阴性,同时检测发现变异株疫苗(C株)对经典株和变异株的中和抗体效价均高于Bartha-K61疫苗。结果表明,江苏地区猪伪狂犬病感染压力较大,另外C株疫苗相对于进口的Bartha-K61株疫苗在本场的免疫效果更佳。     

某规模猪场猪瘟、猪伪狂犬病免疫效果评价

为对昆明市禄劝县某规模化猪场猪瘟、猪伪狂犬病的免疫效果进行评价,采用酶联免疫吸附分析(ELISA)试剂盒,对该猪场18份妊娠母猪、24份哺乳母猪和38份2.5~3月龄保育猪,共80份血清样品进行抗体水平检测。结果表明,3种猪群的猪瘟抗体阳性率分别为94.4%、95.8%和89.5%;猪伪狂犬病抗体阳性率为100%、100%和7.9%。表明该猪场猪瘟免疫合格;猪伪狂犬病妊娠母猪、哺乳母猪免疫合格,但保育猪免疫失败。建议分析保育猪免疫失败原因,完善免疫程序,及时补充接种伪狂犬病疫苗。     

2013-2018年福建省部分规模化猪场猪伪狂犬病病毒野毒感染的流行病学调查

为了解2013-2018年福建省西南地区规模化猪场猪群伪狂犬病病毒(PRV)野毒感染情况,本研究分别采用PCR和ELISA检测方法,对2013-2018年该地区787个规模化猪场送检的1320份疑似发病猪群组织样品、3041场次的猪场67660份猪血清样品进行PRV病原学、血清学检测。结果显示:送检病例猪组织样品PRV野毒感染总阳性率为50.83%,场阳性率为52.60%;送检猪血清样品野毒感染抗体总阳性率为29.25%,场阳性率为61.13%。对检测数据进行分类统计,分析不同年份和不同猪群送检病例组织样品PRV野毒感染情况,发现2014年和2015年是福建省西南地区规模化猪场不同猪群猪伪狂犬病病毒野毒感染最严重时期;分析不同年份和不同猪群血清样品PRV野毒感染gE抗体,发现2015-2018年PRV野毒感染的猪场阳性率处于较高水平。不同猪群的猪存在一定比例的PRV-gE抗体阳性猪,但差别不明显。结果表明,福建省西南地区猪伪狂犬变异毒株流行后,规模化猪场猪伪狂犬病野毒防控形势更加严峻,提示应进一步加强伪狂犬病疫苗免疫的预防控制水平,并定期做好病原学、血清学监测,实时调整疫苗免疫程序,减少其他疫病的混合感染导致的猪场疫病控制更加复杂化。     

河北省沧州地区猪场伪狂犬病毒感染情况调查与分析

为了解沧州地区猪场伪狂犬病疫苗免疫后伪狂犬病毒的感染情况,对本市13个注射过猪伪狂犬病gE基因缺失苗的猪场进行了猪伪狂犬病的血清学ELISA检测。结果表明,不同地区阳性率相差较大,沧县、盐山县、黄骅市、肃宁县血清阳性率较高,泊头市、河间市猪伪狂犬病阳性率较低;300头母猪以上的猪场阳性率(54.05%)低于平均阳性率(63.34%),100头母猪以下猪场阳性率最高达72.53%(66/91);1胎阳性率低于平均阳性率,而4胎以上的母猪高于平均阳性率;每年免疫2次的母猪阳性率明显高于每年免疫3次的母猪;30日龄内与31~60日龄的商品猪伪狂犬病阳性率相差不明显,60日龄以上的仔猪阳性率最小,低于平均值;未免疫疫苗的仔猪阳性率最高28.57%(12/42),而免疫2次的商品猪阳性率最低14.58%(7/48)。     

厦门市同安区猪伪狂犬病流行病学调查

猪伪狂犬病是《国家中长期动物疫病防治规划（2012-2020年）》中优先防治的16种动物疫病之一,到2020年全国所有种猪场猪伪狂犬病都要达到规划设定的考核标准。厦门市同安区为了配合做好猪场净化工作,掌握全区猪群猪伪狂犬病的感染状况,对其进行流行病学调查,估计辖区内猪群猪伪狂犬病的血清学流行率。本研究使用猪伪狂犬病病毒gE-ELISA试剂盒,共检测991份血清样品,并实地调查20家猪场,了解猪场饲养管理和免疫情况。结果显示,同安区猪伪狂犬病血清学场流行率为65.0%,个体真实流行率为47.5%（44.5%~50.4%）。     

2018年湖南省规模猪场伪狂犬病血清学调查

为了解湖南省规模化猪场猪伪狂犬病免疫状况及猪伪狂犬病毒感染情况,2018年在湖南省14个市州208个规模猪场采集4288份猪血清,采用ELISA方法检测血清中的伪狂犬病毒抗体。结果显示,免疫猪PRV gB抗体个体阳性率为78.1%,PRV gE抗体个体阳性率为21.0%,场阳性率为38.9%;从不同养殖规模来看,存栏量在1000头以上的大型猪场PRV gE抗体阳性率最高,为22.9%;在季节分布上,夏季猪群的PRV gE抗体阳性率最高,为25.1%;在不同的年龄阶段中,以种母猪PRV gE抗体阳性率最高,为36.2%。表明猪伪狂犬病在湖南地区仍广泛流行,野毒感染情况较为普遍。     

河北省猪场伪狂犬病病毒感染情况调查及gE基因遗传变异分析

采用ELISA检测方法对2018年1月至2019年5月从河北省11个地市195个不同规模猪场采集的10479份血清进行gE抗体的检测,采用PCR方法对流产胎儿进行猪伪狂犬病病毒(pseudorabies virus,PRV)的抗原检测,并将部分阳性样本进行gE全基因的扩增和遗传变异分析。血清学检测结果显示,所检测的河北省11个地市均存在不同程度的PRV感染,血清样本gE抗体平均阳性率为50.05%;检测的195个猪场中,161个gE抗体为阳性,场群阳性率为82.56%,且存栏50~300头母猪的规模化猪场阳性率最高;不同阶段的猪群中,种猪群空怀母猪的阳性率最高,为73.75%。病原检测结果显示,204个流产胎儿中有54个为PRV阳性,阳性率为26.47%;对扩增的8株PRV进行遗传进化分析,结果显示河北省流行的毒株与2011年后的流行毒株亲缘关系较近,且均在第48位和第492位各存在1个天冬氨酸的插入,为变异毒株。以上结果提示,河北省猪场PRV的感染较为普遍。     

2012～2017年我国部分地区规模化猪场PRV野毒流行病学调查

为了监测我国规模化猪场伪狂犬病病毒(Pseudorabies virus,PRV)野毒感染情况,本研究采用伪狂犬g E抗体ELISA检测试剂盒对2012年2月~2017年7月送检的我国11个省份925个规模化猪场的44809份猪血清样品进行PRV野毒抗体检测。结果显示,925个猪场中有508个野毒阳性猪场,占检测猪场总数的54.91%,检出9153份阳性猪血清,平均阳性率为20.42%。其中种猪的野毒感染情况最明显,检出率较高,阳性率为23.19%;育肥猪的阳性检出率最低为17.22%。调查表明,我国规模化猪场猪群中仍存在PRV野毒感染。同时,本调查分析了不同地区、不同日龄猪的PRV野毒感染情况及该病的流行趋势,为我国伪狂犬病的净化提供思路。     

2017-2020年浙江省猪主要病毒性传染病的流行病学调查与分析

为了解浙江省猪主要病毒性传染病的流行情况及变化规律,本试验对2017-2020年浙江省不同地区规模化猪场送检的血清和病料样品进行猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪瘟病毒(CSFV)、猪圆环病毒2型(PCV2)和猪伪狂犬病病毒(PRV)4种疫病痛原和抗体检测.抗体检测结果显示:PRRSV、CSFV、PCV2、PRV...     

Development of real-time polymerase chain reaction assays for rapid detection and differentiation of wild-type pseudorabies and gene-deleted vaccine viruses

The successful eradication of pseudorabies in U.S. domestic swine was accomplished through the use of glycoprotein E (gE) deleted modified live virus vaccines and an accompanying gE differential enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). Yet, pseudorabies virus (PRV) was established in feral swine in the United States, becoming a potential reservoir of PRV for infection of domestic swine and other native wildlife. A critical need for the current PRV surveillance program in the United States is the rapid detection of PRV infection. For this reason, a set of 2 real-time polymerase chain reaction (PCR) assays by using TaqMan chemistry was developed and evaluated for their capability in the detection and differentiation of field and vaccine strains of PRV. PCR primers and probes were designed for gB and gE genes of PRV, respectively. The newly developed PRV-specific real-time PCR assays could detect all wild-type PRV isolates from diagnostic submissions and differentiate them from vaccine strains. The analytical sensitivity of the assays was approximately 0.1 plaque-forming units per reaction. The assays were highly specific for PRV, because no positive results were obtained from testing other common swine viral pathogens and other animal herpesviruses. The results of testing samples from domestic and feral swine and from bovine showed that the real-time PCR assays are more sensitive than gel-based PCR. These results demonstrated the potential application of the developed real-time PCR assays as a differential test for rapid and specific detection of PRV in domestic and feral swine, as well as nonporcine species that can be infected with PRV and serve as carriers.     

规模化猪场猪圆环病毒2型感染的实验室诊断

为了确诊贵州省某规模化猪场保育仔猪异常死亡原因,从怀孕母猪、产房母猪、后备母猪、种公猪、哺乳仔猪、保育仔猪6个猪群采集90份血清样本采用ELISA方法分别进行血清抗体检测,并对采集的90份血清样本和1份病死猪淋巴结组织采用荧光PCR方法进行病原学检测。结果:6个猪群综合的猪瘟病毒、猪蓝耳病病毒、伪狂犬病病毒g B蛋白、伪狂犬病病毒g E蛋白血清抗体阳性率分别为87.78%、70.00%、88.89%、4.44%;猪瘟病毒、猪蓝耳病病毒、伪狂犬病病毒病原核酸检测显示阴性,猪圆环病毒2型病原核酸检测淋巴结组织样本显示阳性。试验结果表明,引起该猪场保育仔猪死亡的原因为猪圆环病毒2型感染。同时,怀孕母猪群出现了伪狂犬病病毒g E蛋白抗体阳性,提示怀孕母猪群可能存在猪伪狂犬病野毒感染。     

福建省龙岩市部分地区猪伪狂犬病野毒感染血清学调查

为了探究福建省龙岩地区的2018年猪伪狂犬病野毒感染及流行概况,本试验随机选取龙岩新罗区、连城县、武平县以及长汀县的部分规模化猪场共21个,应用ELISA法对763份血清样品PRV g E抗体进行血清学调查。结果显示样品检测总阳性率为30.41%,其中保育猪、育肥猪、能繁母猪及后备母猪的阳性率分别为:25.29%、30.98%、30.85%、31.75%;用SPSS19.0对其进行差异显著性分析,结果显示不同阶段的猪群gE抗体阳性率差异不显著(P=0.741>0.05);各场场均阳性率为31.89%;各地区阳性率分别为:41.58%、18.18%、30.14%、26.29%,场均阳性率分别为41.14%、23.50%、29.60%、33.33%,对其进行差异显著性分析,结果表示不同地区之间gE抗体阳性率差异极显著(P=0.0003<0.001),即各地区之间伪狂犬病野毒感染情况差异较大,部分地区更需要加强其控制和净化措施。