浙江省鸭、鸡、鹅群感染坦布苏病毒的血清学调查与分析

为分析坦布苏病毒（TMUV）在鸭、鸡、鹅群中的感染情况,开展了血清流行病学调查。2010-2014年间,在浙江省11个地市采集鸡、鸭、鹅血清样品4 989份,采用ELISA方法检测TMUV抗体水平。结果表明：鸭、鹅、鸡的抗体阳性率分别为27.33%,6.94%,1.11%。按年度分析,在2010-2011年鸭TMUV引起的产蛋下降疫情流行期间,鸭感染群的TMUV抗体阳性率为54.83%,鹅、鸡未采样检测;2012年鸭、鹅TMUV感染群的抗体阳性率分别为33.88%,20.00%,鸡未检测到抗体阳性群;2013年鸭、鹅、鸡TMUV感染群的抗体阳性率分别为49.68%,10.00%,28.00%;2014年鸭、鹅TMUV感染群的抗体阳性率分别为39.19%,6.67%,鸡未检测到抗体阳性群。总体来看,鸭群在2010-2011年TMUV流行期间的抗体水平最高,表明鸭群是TMUV感染的主要禽种。     

猪繁殖与呼吸综合征的ELISA抗体检测结果分析与应用

本研究应用ELISA方法共检测25个猪场26个猪群507份血清的PRRS抗体水平,应用统计学方法分析各猪群的检测数据,结合猪群临床表现和病原污染情况的流行病学调查结果,可将猪群分为无PRRSV污染,临床健康;PRRS病毒污染,临床稳定;PRRS病毒污染,临床发病且控制困难等3种流行模式,并提出了应用猪群PRRS ELISA检测值标准差、个体检测极值及盒须图(Box-and-Whisker Plot)进行分类的具体指标和PRRS分类控制的建议。     

家禽H5亚型禽流感(Re-6株)疫苗免疫抗体消长规律研究

为了解H5亚型重组禽流感Re-6株灭活疫苗在鸡、鸭免疫后的抗体消长规律,本实验分别选择一个鸡场和鸭场开展了临床免疫实验。实验鸡群于14日龄首免单价疫苗(Re-6株)和H5亚型二价疫苗(Re-6株+Re-4株)后,在30日龄~200日龄不同时间点采血检测Re-6抗体,结果表明,二价疫苗比单价疫苗免疫后的Re-6免疫抗体产生早、效价高、抗体整齐度好;40日龄二免后20 d,二价疫苗和单价疫苗的Re-6免疫抗体消长规律趋于一致。实验鸭群于17日龄分别采用禽流感(H5+H9)双价灭活疫苗和单价灭活疫苗(H5N1亚型,Re-6株)进行免疫,免后45日龄~205日龄不同时间点检测Re-6抗体,结果表明,双价疫苗与单价疫苗均可以诱导免疫鸭产生高水平抗体,而且两种疫苗的消长规律相似。此外,45日龄二免Re-6株疫苗的免疫程序要优于70日龄二免的免疫程序。本研究评估Re-6疫苗的防控效果,为家禽H5亚型禽流感免疫防制提供了实验依据。     

O型口蹄疫抗体不同检测方法的检测结果比较分析

为更好开展O型口蹄疫免疫质量评估,客观评价不同抗体检测方法的相关性和特点,试验选择猪、牛、羊血清样品299份和2个规模猪场日常检测血清样品180份,采用正向间接血凝(IHA)、液相阻断ELSIA(Lp B)和VP1结构蛋白ELISA(VP1)三种方法进行0型口蹄疫免疫抗体检测。结果显示,采用IHA方法检测的免疫抗体更符合临床实际免疫变化规律。采用合成肽疫苗免疫的猪场不宜采用IHA方法检测抗体,但可采用Lp B和VP1方法检测,两种方法检测结果符合率较高。     

鸭瘟病毒ZJ2016强毒株部分基因序列的测定与分析

2016年,浙江省一鸭场发生疑似鸭瘟病例,经鉴定,病鸭感染鸭瘟病毒,命名为ZJ2016病毒株。实验应用二代基因测序方法对该病毒核酸进行全基因测序,鉴定分析鸭瘟病毒ZJ2016株抗原与毒力相关基因序列特征。对测序病毒主要囊膜糖蛋白基因gB、gC、gG、gH、gI、gK、gL、gM、gN与致病力基因LORF11、UL2、UL12、UL41、UL47、US10进行核酸与氨基酸序列分析,并与已发表毒株序列及疫苗株(VAC株、clone-03株)序列比较。结果显示,与疫苗免疫保护抗原相关的ZJ2016株囊膜糖蛋白序列与疫苗毒株序列相比未发生明显的变异,而ZJ2016株的LORF11、UL2、UL12、UL41、UL47、US10基因结构及同源性与疫苗株氨基酸序列差异明显,且与中国其他分离强毒株LH2011株、CHv株、CV株同源性较高,表明该毒株具有强毒株的基因型特征。     

2016—2018年浙江省部分规模猪场伪狂犬病血清学定点监测

为了解浙江省规模猪场伪狂犬病野毒感染情况及变化趋势,2016—2018年对26家定点规模猪场开展伪狂犬病血清学监测。场内选择育成/育肥猪进行采样,每年度采集至少30份血清样品,采用ELISA方法进行猪伪狂犬病病毒gE抗体检测,共检测样品7 519份。2016—2018年,共检出阳性样品2 813份,个体阳性率为37.4%,各年度个体阳性率分别为44.7%、37.4%、30.6%,呈下降趋势,但个体阳性率在50.0%以上的规模猪场数量都在8个以上。结果表明,通过加强疫苗免疫,浙江省规模猪场伪狂犬病野毒感染正逐步得到控制,但感染程度仍较为严重,感染范围依然较广。因疫苗免疫效果受疫苗生产厂家、毒株种类、免疫次数等多种因素影响,所以应根据监测结果,及时调整疫苗种类和免疫程序,同时强化生物安全,逐步实现规模场伪狂犬病净化目标。     

检测猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒抗体的两种ELISA方法的比较及其应用

采用检测猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)两种不同目标蛋白抗体的间接ELISA方法对来自10个规模猪场216份血清进行检测,结果显示,包被抗原分别为核蛋白(Nucleoprotein,N)和以GP5蛋白为主的膜蛋白(membrane pro-teins,G)的两种方法检测阳性率分别为83.8%和81.9%,符合率为92.6%,Kappa值为0.74,表明两种检测方法的检测结果在给定的临界点条件下抗体检测结果具有良好的一致性。通过数据标准化,调整阴阳性判定的临界点,发现两种检测方法所得出的阳性率变化趋势相似,但检测膜蛋白的G-ELISA抗体阳性率其降幅显著高于检测核蛋白的N-ELISA。本试验初步阐明了检测猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒抗体的两种间接ELISA方法的特点,为科学使用提供依据。     

湖北省羊衣原体流行病学调查

利用间接血凝(IHA)和酶联免疫吸附测定(ELISA),对湖北省羊养殖场进行了衣原体流行病学调查。结果表明,羊衣原体在湖北省平均阳性率为10.7%,湖北省羊衣原体感染率保持稳定。