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本研究以牛分枝杆菌Vallee111染色体DNA为模板,以MPB70成熟蛋白基因特异性引物进行PCR扩增,获得约500bp的DNA片段.通过T-A克隆技术,将PCR产物克隆至pGEM-T Vector中,成功地构建出克隆载体pGEM-T-70.以BamH Ⅰ和EcoR Ⅰ双酶切pGEM-T-70和pET28a( ),并将纯化的MPB70基因亚克隆至pET28a( )中,构建出原核表达载体pET28a-70.将pET28a-70转化至感受态E.coli BL21(DE3)中,经IPTG诱导和SDS-PAGE分析,可见约25Ku外源蛋白带.Western blot分析发现,该蛋白具有牛分枝杆菌抗原性,从而为进一步研究MPB70的亚单位疫苗及DNA疫苗奠定基础. 相似文献
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禽分枝杆菌副结核亚种基因分型研究进展 总被引:1,自引:0,他引:1
副结核分枝杆菌(Mycobacterium avium subsp.paratuberculosis,MAP)是引起副结核病(Paratuberculosis,Johne’s disease,JD)的病原。该病早在1826年就有记载,1895年第一次被报道。目前仍广泛流行于世界各国,其中以奶牛业和肉牛业发达的国家和地区受害最重。仅在美国每年的损失就达2.0~2.5亿美元。最新研究表明,在原生动物、负鼠、野兔、野生猫、野猪、赤鹿、野牛等动物中也分离到该病原菌, 相似文献
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猪囊尾蚴逃避宿主防御攻击机制的研究进展 总被引:1,自引:0,他引:1
根据有关猪囊尾蚴致病原因在和在宿主中生存原因的研究结果,概括出了猪囊尾蚴逃避主防御攻击的一些机制、包括:功能性蛋白酶类作用、蛋白酶抑制作用、易化免疫等。指出了研究猪囊尾蚴逃避机制的意义和今后的努力方向。 相似文献
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本实验克隆、表达了牛结核早期分泌靶抗原蛋白6(ESAT-61抗原,建立了ESAT-6酶联免疫吸附检测方法(ELISA)。同时应用牛结核提纯菌素(PPD)ELISA和ESAT-6-ELISA对采自疫区的641头牛和非疫区的324头牛进行检测,其中PPD-ELISA检测中,疫区有581头阳性牛,阳性率为90.64%,非疫区有2头阳性牛,阳性率为0、62%;ESAT-6-ELISA检测中,疫区有567头阳性牛,阳性率为88.45%,非疫区没有阳性牛。对采自疫区的23例变态反应阳性牛和非疫区的7例变态反应阳性牛进行检测,其中PPD-ELISA检测中,疫区有20头为阳性。与变态反应的符合率为86.90%,非疫区有1头为阳性,与变态反应的符合率为14%;在ESAT-6-ELISA检测中,疫区有18头为阳性,与变态反应的符合率为78.30%,非疫区没有阳性。这些结果表明:ESAT-6-ELISA的敏感性要低于PPD-ELISA;牛结核ELISA在非疫区应用效果较差,在疫区更具有应用价值。 相似文献
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牛分枝杆菌MPB64基因在大肠杆菌中的表达 总被引:1,自引:0,他引:1
牛结核病主要是由牛分枝杆菌引起的一种人兽共患传染病.人结核病的10%以上是由牛分枝杆菌引起的.牛结核病的防制主要是采用牛结核PPD进行变态反应检疫,对检出的阳性牛隔离或捕杀,以达到消灭该病的目的.但是,应用该防制措施并未达到控制该病的目的,反而近年来呈上升趋势[1].目前,预防人结核病普遍采用卡介苗(BCG),但是,BCG在不同的人群和地域中保护力差异很大[2],尤其对成人的保护效果不佳.对牛和其他动物而言,注射BCG后,变态反应检测均呈阳性,导致人工免疫和自然感染不能区别,影响牛的检疫和国际贸易. 相似文献
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实验室是培养学生动手能力和实践技能的场所,也是人才培养的重要支撑条件。随着高等教育的发展,高等院校对实验教学的重视程度和投入日益增加,实验条件得到明显改善,但与此同时也暴露出一些不可回避的问题,如资源分散、实验人员素质参差不齐、思想意识薄弱等,探索适合农业院校实验教学发展的新思路具有十分重要的理论意义和现实价值。文章对吉林农业大学农业生物学与工程技术实验教学示范中心的建设历程进行概述,希望对同类院校实验教学规范化管理和实验教学资源整合能有所裨益。 相似文献
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为了解2016年山东省几种主要猪病毒性疫病的流行情况,采用荧光定量RT-PCR或PCR方法,对山东省部分猪场送检的730份病料进行了病原学检测。结果检出248份阳性病料,样品个体阳性检出率由高到低的病原依次为猪圆环病毒2型(13.02%)、猪蓝耳病病毒(10.41%)、古典猪瘟病毒(8.08%)、猪流行性腹泻病毒(7.26%)、猪伪狂犬病毒(3.84%)、猪轮状病毒(1.65%)、猪传染性胃肠炎病毒(0.14%);样品混合感染阳性率为8.08%,以猪蓝耳病病毒和猪圆环病毒2型混合感染最为常见(3.02%)。本次病原学检测为山东省猪场病毒性疾病的综合防控提供了数据参考。 相似文献