基于网络药理学探讨黄芩素对猪丁型冠状病毒感染的潜在作用机制

本研究旨在探讨黄芩素抗猪丁型冠状病毒（porcine deltacoronavirus,PDCoV）感染的作用机制。通过Pharmmapper、Pubchem、STITCH、TCMSP和Swiss Targer Prediction数据库获得黄芩素的作用靶点。根据前期蛋白组学结果获得PDCoV感染的相关靶点,获取黄芩素与PDCoV感染的共同靶点,并利用STRING数据库和Cytoscape 3.8.2软件构建“药物-疾病-靶点”网络和靶蛋白相互作用网络,利用CytoNCA插件进行网络拓扑分析和核心网络构建,使用Metascape数据库对核心网络基因进行GO和KEGG分析。通过细胞试验对富集得到的信号通路下游基因表达水平进行检测。通过筛选,共获得黄芩素的潜在靶基因268个,黄芩素-PDCoV的共同靶点75个,GO富集结果表明黄芩素主要参与细胞周期、细胞膜筏形成、线粒体膜形成、纺锤体形成和MAPK信号级联传导过程;KEGG富集筛选得到277条信号通路（P<0.01）,主要涉及PI3K-Akt信号通路、Ras信号通路和MAPK信号通路等。细胞试验结果表明,与正常细胞对照组相对,病毒感染后PI3K、AKT、NF-κB mRNA表达显著升高;与病毒感染组相比,黄芩素处理组PI3K、AKT、NF-κB mRNA的表达显著降低（P<0.05）。黄芩素对PDCoV感染的作用具有多靶点、多通路的特点,可能是通过作用于AKT1、HSP90AA1、SRC、EGFR、CASP3、MAPK、STAT3等核心基因调控PI3K-Akt、Ras和MAPK信号通路、细胞凋亡、病毒感染等通路发挥作用,可以作为抗PDCoV感染的潜在治疗药物进一步研究。     

莪术油注射液体外抗猪细小病毒的试验

制备莪术油注射液,评价莪术油注射液体外对猪细小病毒(PPV)7909标准毒株的作用效果。在PK-15细胞上,通过不同加药方式观察PK-15细胞病变(CPE),用MTT法测定细胞活力。结果在PK-15细胞上,药物最大安全浓度(TD0)为86.4μg/mL,半数感染浓度(TD50)为162.2μg/mL;在药物安全浓度范围内,莪术油注射液对PPV 7909标准毒株的半数抑制浓度(IC50)为1.865μg/mL,半数阻断浓度(IC50)为3.75μg/mL,半数直接杀灭作用浓度(IC50)为81.2μg/mL。结果表明莪术油对PPV 7909标准毒株有明显的体外抑制作用,但直接杀灭作用不明显。     

板蓝根多糖的提取及其对猪细小病毒的体外作用

用水煮醇沉法提取板蓝根多糖,通过观察PK-15细胞病变效应（CPE）来评价板蓝根多糖的不同加药方式体外对猪细小病毒（PPV）的阻断和抑制作用。结果表明板蓝根多糖在对细胞的安全浓度范围内,对猪细小病毒有明显的阻断作用和抑制的作用,最小的阻断浓度为2.09μg/ml,最小的抑制浓度为4.19μg/ml。     

株血清学和免疫学特性的研究

 在鸡胚肾细胞上对HN₉₉株病毒进行了克隆纯化，经检测无外源病原污染。应用血清交叉中和试验确定了IBV HN₉₉株的血清型，并用免疫保护试验进行了验证，结果证明HN₉₉株与T株属同一血清型，与TJ、SD、湖北等地方分离株有一定的相关性。不同免疫剂量的效力试验结果表明用0.2 ml剂量的HN₉₉灭活苗接种试验鸡，能够对HN₉₉攻毒提供100%的保护，证明HN₉₉株具有良好的免疫原性。     

板蓝根多糖的提取及其对猪细小病毒的体外作用

用水煮醇沉法提取板蓝根多糖，通过观察PK-15细胞病变效应（CPE）来评价板蓝根多糖的不同加药方式体外对猪细小病毒（PPV）的阻断和抑制作用。结果表明板蓝根多糖在对细胞的安全浓度范围内，对猪细小病毒有明显的阻断作用和抑制的作用，最小的阻断浓度为2.09μg/ml，最小的抑制浓度为4.19μg/ml。     

反刍动物饲料产品和动物源性饲料产品中牛羊源成分检测

利用聚合酶链式反应法(PCR法)对反刍动物饲料产品(预混料、精料补充料、全价配合料等)和动物源性饲料产品(鱼粉、肉粉等)共计350个样品进行了牛羊源成分检测.结果表明,有3个样品检出牛和/或羊源性成分,牛羊源性成分检出率0.86%.其中,反刍动物饲料产品310批次,牛羊源性成分检出率为0.97%;动物源性饲料产品40批次,均未检出牛羊源性成分.     

硒蛋氨酸对猪细小病毒体外增殖的抑制作用

以PK-15细胞为模型,研究不同浓度的硒蛋氨酸对猪细小病毒(PPV)体外复制的抑制作用.结果表明,在2～8 μmol*L-1范围内,硒蛋氨酸对细胞生长没有影响,但对猪PPV的体外复制呈现显著的抑制作用(P&lt;0.05),且随着浓度的增加其抑制作用增强.还原型谷胱甘肽和甘露醇均有增强硒蛋氨酸的抑制病毒复制作用,两者同时添加时,其作用更明显.     

有机硒和某些中草药对鸡免疫功能的影响

将购进的 1日龄雏鸡分组 ,其中 1组饲料中添加有机硒 ,另 3组分别添加中草药黄芪、女贞子、淫羊藿 ,另设 1组空白对照。饲养至 60日龄空腹称重 ,采血分离淋巴细胞 ,测其E 玫瑰花环形成率 ,计算其脾指数和法氏囊指数。结果其玫瑰花环形成率、脾指数和法氏囊指数分别为 :有机硒组 (37 79±0 0 2 ) %、 0 2 73、 0 474;黄芪组 (38 63± 0 0 6) %、 0 2 91、 0 486;女贞子组 (35 1 4± 0 0 3) %、 0 2 67、 0 467;淫羊藿组 (36 42± 0 2 ) %、 0 2 69、 0 468;对照组为 (2 6 0 6± 0 0 3) %、 0 2 4 8、 0 42 5。试验组与对照组结果差异显著 ,说明有机硒、黄芪、女贞子、淫羊藿对鸡体的免疫增强作用明显 ,尤其以黄芪组为最高     

三聚氰胺毒理学研究进展

近来,三聚氰胺陆续在众多动物性食品中被检出,引起了公众对三聚氰胺的密切关注和恐慌。为让公众对三聚氰胺有所了解,就三聚氰胺毒理学研究进展进行了阐述。     

麋鹿魏氏梭菌病和巴氏杆菌病混合感染

20 0 3年 1月 ,河南省野生动物救护中心饲养的30只麋鹿 ,先后有 3只青年麋鹿突然发病死亡 ,临床主要表现为严重败血症、腹泻而衰竭死亡 ,病程短 ,病死率高。1　临床症状　 3只麋鹿均突然发病 ,精神不振 ,腹痛 ,呼吸困难 ,全身肌肉震颤 ,口吐白沫 ,流涎 ,随后倒地 ,四肢划动 ,抽搐死亡。死亡后腹部迅速胀大 ,口腔流出带红色泡沫状水样物。2　病理剖检　剖检 3只麋鹿的症状基本相似 ,主要表现为 :可视黏膜出血 ,皮下组织浆液浸润。心外膜有无数大小不等的出血点。脾脏稍肿 ,边缘钝圆 ,脾髓暗红色 ,稍软化。肝肿大 ,有出血斑。肺有暗红色硬块 ,…