密蒙花滴眼液对去势雄兔干眼症泪腺细胞炎症因子TNF-α、IL-1β的影响

目的 观察不同浓度密蒙花滴眼液对去势雄兔角结膜干燥症泪腺细胞炎症因子TNF-α、IL-1β的影响,并探讨其疗效。方法 将42只雄兔随机分为：空白组（A）,模型组（B）,密蒙花滴眼液低（C）、中（D）、高（E）浓度组,安慰剂组（F）,睾酮组（G）,每组6只。除A组外各组切除双侧睾丸及附睾。术后第3天开始C-F组给予滴眼液,3次/d;G组注射丙酸睾酮,每3天1次。各组术前和术后第4周各测量一次SIT和BUT。4周后处死兔子,摘取双眼泪腺,采用免疫组化法检测泪腺中TNF-α和IL-1β,并进行统计学分析。结果 （1）SIT与BUT：B、F组前后比较,B组与其他各组及C组与D、E、G组比较,差异均有统计学意义（P<0.01）。（2）治疗后各组TNF-α、IL-1β比较：B、F组与其他各组比较,差异有统计学意义（P<0.01）;C组与D、E、G组比较,差异均有统计学意义（P<0.05）。（3）TNF-α、IL-1β表达结果：A、G组未见表达;B、F组大量表达于细胞膜和细胞浆中,呈棕黄色颗粒;C、D、E组散见表达。结论 密蒙花滴眼液具有与雄激素相似的抑制炎症因子TNF-α和IL-1β表达的作用,但弱于雄激素。密蒙花滴眼液中、高浓度作用无明显差异,但均较低浓度要优。     

密蒙花滴眼液对去势雄兔干眼泪腺组织中ICAM-1、IL-6、IL-17表达的影响

目的 观察不同浓度密蒙花滴眼液对雄兔干眼泪腺组织中炎性细胞因子：细胞间黏附因子-1（intercellular cell adhesion molecule-1,ICAM-1）、白细胞介素-6（interleukin-6,IL-6）、白细胞介素-17（interleukin-17,IL-17）表达的影响,从而探讨其疗效。方法 将36只成年新西兰雄兔随机分为空白组（A）,模型组（B）,密蒙花滴眼液低（C）、中（D）、高（E）浓度组,睾酮组（F）组,每组6只。除A组外,其余各组均切除双侧睾丸及附睾,造模成功后,C、D、E组开始双眼滴用滴眼液,F组注射丙酸睾酮注射液。术前及治疗后第4周各组雄兔均测定1次泪膜破裂时间（tear break-up time,BUT）和泪液分泌功能（Schirmer Ⅰ test,SIT）。治疗后第4周处死实验用兔,并摘取其双侧泪腺,采用免疫组化的方法检测ICAM-1、IL-6与IL-17的表达。结果 （1） SIT和BUT：B组自身前后对比,治疗后第4周：B组与C、D、E、F组相比,E组与C、D组相比,F组与C、D、E组相比,差异均有统计学意义（P<0.05或P<0.01）;（2） ICAM-1、IL-6与IL-17电镜下表达的结果：A、F组未见明显表达;B组可以见到大量棕黄色颗粒存在细胞浆与细胞膜中;C、D、E组可见散在的表达;（3）治疗后第4周,组间ICAM-1、IL-6与IL-17的表达相比较：B组与其余各组相比,E组与C、D组相比,差异均有统计学意义（P<0.05或P<0.01）。结论 密蒙花滴眼液具有拟雄激素的作用,可以抑制炎性细胞因子ICAM-1、IL-6与IL-17的表达,疗效弱于雄激素。不同浓度的密蒙花滴眼液中,高浓度的疗效最佳。     

滋阴活血解毒方对局灶性脑缺血模型大鼠 血清中IL-1(3,IL-8,TNF-。含量的影响

〔摘要〕目的观察滋阴活血解毒饮片及超微方对大鼠局灶性脑缺血后白细胞介素一1日(IL-1日)、白细胞介素- 8(IL-8)、肿瘤坏死因子一。(TNF-a)含量的影响、方法将25只大鼠随机分为假手术组、模型组、滋阴活血解毒方饮 片组(以卜简称饮片组)、滋阴活血解毒方超微组(以卜简称超微组)、阿加曲班组,每组5只、大脑中动脉线栓法复 制局灶性脑缺血模型,进行神经功能评分〔造模成功后7d,用TTC染色法测定脑梗死范围,用Motic Med6.0数码 图像分析系统分析脑梗死面积〔采用ELISA法测定大鼠血清IL-1日,IL-8 ,TNF-。的含量〔结果饮片组、超微组及 阿加曲班组大鼠脑梗死体积比均明显低于模型组,差异具有统计学意义(P<0.01) ;模型组血清IL-1日,IL-8,TNF-a 含量明显高于假手术组(P<0.01),饮片组、超微组、阿加曲班组均能明显降低大鼠血清IL-1日、IL-8 , TNF-a含量, 与模型组比较,差异均有统计学意义(P<0.01)、结论滋阴活血解毒方能减小脑梗死面积,抑制炎性因子的表达,降 低脑缺血所致的脑损伤、     

环磷酞胺复制中老年男性雄激素部分 缺乏综合征大鼠模型的研究

〔摘要〕目的应用环磷酞胺复制中老年男性雄激素部分缺乏综合征的大鼠模型建立〔方法取20只大鼠随机 分为2组:正常组,模型组〔分别于造模前、造模后1d、造模后30 d观察大鼠一般情况、体质量、悬尾实验和强迫游 泳实验时间以及辜丸指数,放射免疫法测定各组造模前后血清1"1'' , FT水平,免疫组化法测定各组大鼠辜丸间质细 胞stAR蛋白平均灰度值,并进行统计分析〔结果与正常组比较,模型组大鼠悬尾实验时间延长,差异具有统计学意 义(P<0.01),强迫游泳实验时间缩短,差异具有统计学意义(P<0.01) ,血清1"1'' , FT水平、stAR蛋白平均灰度值均显著 升高,差异具有统计学意义(P<0.05、结论环磷酞胺造成的大鼠血清1"1'' , FT水平卜降,行为学改变的反辜丸组织退 行性变.基木类似PADAM模型、     

亚精胺对鼠免疫器官指数及炎症因子表达的影响

为阐明亚精胺对鼠免疫器官指数、胸腺和脾脏组织炎症因子表达的影响,采用0、0.05、0.10和0.15mg·g-1(体质量)亚精胺腹腔注射6周龄昆明小白鼠,测定鼠胸腺和脾脏指数,并定量检测胸腺和脾脏组织TNF-α、IL-1β、IL-6和IFN-γ表达量。结果表明:注射0.15 mg·g-1亚精胺组鼠胸腺指数和脾脏指数显著(P0.05)低于对照组;0.10 mg·g-1亚精胺组胸腺组织IFN-γ表达量显著(P0.05)高于对照组;0.05 mg·g-1亚精胺组鼠脾脏组织TNF-α和IL-1β表达量显著(P0.05)低于对照组,0.10 mg·g-1亚精胺组脾脏组织IL-6和IFN-γ表达量均显著(P0.05)高于对照组,0.15 mg·g-1组脾脏组织TNF-α表达量显著(P0.05)低于对照组。由此可见,亚精胺对炎症因子表达具有组织特异性和剂量依赖性。低浓度亚精胺能抑制炎症因子表达发挥抗炎作用,随着亚精胺浓度增加则表现为诱导炎症。     

免疫去势与手术去势对SD雄鼠骨骼肌沉积的差异影响机制

【目的】试验旨在以SD雄鼠为模型探讨免疫去势与手术去势对公畜骨骼肌沉积的差异影响机制。【方法】对比分析免疫去势与手术去势对雄鼠腓肠肌重量、组织学及其沉积相关激素及基因表达的影响。【结果】相较于免疫去势，雄鼠手术去势后血清IGF1降低，皮质酮升高，腓肠肌肌肉生长抑制素基因（Mstn）表达上调，血清尿素氮水平升高。【结论】相对较低的IGF1和较高的皮质酮是手术去势较免疫去势导致公畜骨骼肌分解萎缩更显著的重要原因。     

Ki-67、Bcl-2和Bax蛋白在不同睾酮水平鼠前列腺中的表达及相关性

将32只SD大鼠随机分为正常对照组(N组)、去势组(C组)、输精管结扎组(V组)和睾酮组(T组),用去势、输精管结扎和注射丙酸睾酮建立不同睾酮水平大鼠模型,采用放射免疫法检测大鼠体内性激素水平,用免疫组化法检测前列腺组织Ki-67、Bcl-2和Bax表达程度,并与正常组对照.结果表明:C组、V组血清睾酮和前列腺睾酮水平...     

艾纳香总黄酮对大鼠皮肤创伤愈合的作用及机制研究

探讨艾纳香总黄酮对大鼠皮肤创伤愈合的影响及其作用机制。取大鼠150只,随机分为模型组、京万红组和艾纳香总黄酮高、中、低组,建立大鼠背部双侧圆形创伤模型,连续给药10 d,测定创面面积,计算愈合率;于术后的1、3、5、7、10 d检测创缘组织IL-1、TNF-α表达量并切取创伤边缘皮肤全层,制片,HE染色后镜下观察创面组织形态学的改变。结果表明:艾纳香总黄酮随药物剂量的增加而提高创面愈合百分率,缩短愈合时间,创伤早期增强创面IL-1、TNF-α的表达。艾纳香总黄酮促进大鼠皮肤创伤的愈合机制之一可能是增强创伤早期炎症因子的分泌,从而促进创面的修复愈合。     

左归丸对去势大鼠钙转运通路相关蛋白的影响

目的 探讨左归丸去势大鼠骨密度和骨、肾组织中钙转运通路相关蛋白的影响。方法 选取48只雌性SD大鼠,随机分为正常组,假手术组,模型组,西药组,中药低、高剂量组。除假手术组和正常组,其余组切除大鼠卵巢,造模成功后3个月进行各组干预。3个月后处死大鼠,检测大鼠骨密度（BMD）;Western blotting法检测钙转运通路（肾组织）蛋白表达;免疫组化检测去势大鼠骨组织中新型上皮钙通道5（TRPV5）蛋白的表达。结果 与模型组相比,左归丸高剂量组与西药组大鼠骨密度均有改善（P<0.05）;与假手术组比较,模型组各蛋白表达均有不同程度下降（P<0.01,P<0.05）;尼尔雌醇和左归丸均能不同程度上调去势大鼠肾组织中TRPV5蛋白、钠钙交换器（NCX1）蛋白、钙结合蛋白-D28K（CaBP-D28K）和细胞膜钙汞（PMCA1b）蛋白表达,差异均具有统计学意义（P<0.05,P<0.01）;免疫组化显示模型组较假手术组的TRPV5蛋白表达率增加（P<0.05）,而西药组和中药高、低剂量组较模型组蛋白表达率均下降（P<0.05）。结论 左归丸可通过上调肾钙转运通路中相关蛋白的表达和降低大鼠破骨细胞中TRPV5蛋白的表达,而发挥骨质疏松症治疗作用,肾、骨组织中钙转运过程相关蛋白可能成为骨质疏松症治疗的新方向、新靶点。     

灭幽汤对幽门螺杆菌感染性胃炎 小鼠胃组织IKK(3表达的影响

〔摘要〕目的探讨IKB分子的上游蛋白激酶(IKK日)在幽门螺杆菌相关性胃炎(HAG)病理变化的可能作用 机制及灭幽汤的影响效应〔方法建立HAG模型,将造模成功的小鼠按体质量随机分为模型组、丽珠得乐组,灭 幽汤组〔采用免疫组化法检测胃熟膜组织中核转录因子((NF-KB),IKK(3的蛋白表达情况〔HE染色观察胃组织病 理变化〔结果灭幽汤组能明显减轻胃组织的炎症反应,灭幽汤组胃熟膜炎症程度低于模型组,差异有统计学意义 (P<0.05);能抑制HAG胃组织中NF-KB ,IKK(3蛋白的活性,灭幽汤组NF-KB ,IKK(3表达强度明显低于模型对照 组,差异有统计学意义(P<0.05)〔结论NF-KB和IKK(3在HAG的炎症反应中发挥重要的作用,灭幽汤治疗HAG的 可能作用机制是通过抑制IKK日的激活,阻i1=其活化     

脑缺血大鼠凝血酶原和PAR-1的变化及滋阴活血解毒方的干预作用

目的观察局灶性脑缺血模型大鼠脑组织凝血酶原(prothrombin , F2) mRNA和蛋白酶激活受体一I (PrO-tease-activated receptor-1 ,PAR-1)mRNA表达变化及滋阴活血解毒方的千预作用方法将24只大鼠随机分为假手术组,模型组、滋阴活血解毒方组、阿加曲班4组,每组分1,3 d两个时相点〔制备大脑中动脉闭塞(MCAO)模型,检测各组大鼠脑组织中凝血酶原mRNA及PAR-1mRNA的表达水平、结果与假手术组比较,模型组脑组织中凝血酶原mRNA ,PAR-1mRNA表达明显增强(P<0.01) ,滋阴活血解毒方组和阿加曲班组能明显下调凝血酶原mRNA,PAR-1mRNA表达(P<0.01)〔结论局灶性脑缺血大鼠凝血酶原mRNA和PAR-1mRNA的表达增强,滋阴活血解毒方能抑制其表达,减轻凝血酶的毒性反应、     

降糖益肾方干预胰岛素信号通路改善转基因 2型糖尿病1VIKR鼠肾损伤的研究

目的观察降糖益肾方对高脂饮食转基因2型糖尿病MKR鼠血糖、血胰岛素及肾皮质中胰岛素受体、磷脂酞肌醇-3一激酶蛋白表达的影响、方法选取MKR鼠40只经鉴定后,随机分为MKR鼠组、MKR鼠高脂组、降糖益肾方组和糖适贝那组〔MKR鼠组用基础饲料喂养,MKR鼠高脂组、降糖益肾方组和糖适贝那组用高脂饲料喂养,连续喂养8周后,降糖益肾方组给予降糖益肾方,糖适贝那组给予糖适平加贝那普利,同时MKR鼠组和MKR鼠高脂组分别给予蒸馏水灌胃4周〔4周后处死小鼠收集标本,免疫组织化学SABC法检测肾小球中胰岛素受体1(IRS-1),磷脂酞肌醇-3一激}(PI-3K)的蛋白表达〔结果降糖益肾方明显降低高脂饮食MKR鼠肾小球中IRS-1和PI-3 K的蛋白表达水平,与MKR鼠高脂组比较,差异有统计学意义(P<0.01)、结论降糖益肾方改善糖尿病肾病系膜细胞增殖的机制可能与千预胰岛素信号通路有关、     

卵巢移植对雄性受体鼠精子及生殖能力的影响

将1日龄小鼠卵巢移植入成年受体雄鼠肾囊下,分别于移植后21d(A组)和28d(B组),回收卵巢移植体和卵母细胞,采集附睾尾精子,并对睾丸及精子进行形态学检测,计算畸形精子数.移植受体雄鼠的繁殖能力将依据与雌鼠合笼交配后的窝产活仔记录进行评价.结果表明,卵巢移植体生长并有卵泡发育,A、B组回收卵母细胞数组间无显著差异(P0.05);移植组不同时期卵巢移植体对雄鼠睾丸及精子形态无明显影响,其畸形率与对照组(正常雄鼠)相比差异不显著(P0.05);移植受体雄鼠与母鼠配种的窝产活仔数与对照组无显著差异(P0.05).初步证实在卵巢异性移植构建雌、雄性腺同体的生理环境中,卵巢移植体对受体雄鼠精子及生殖能力无明显影响.     

电针改善去势雌性大鼠记忆障碍的机制研究

目的 观察电针对去势雌性大鼠记忆、脑内脑源性神经营养因子（BDNF）及其受体酪氨酸激酶受体B（TrkB）表达的影响。方法 将SD大鼠36只随机分为假手术组,模型组和电针组,每组12只。假手术组大鼠仅切开皮肤,其余各组大鼠给予卵巢摘除,15 d后,电针组给予电针刺激,隔日1次,持续45 d。Morris水迷宫测试各组大鼠学习记忆能力,免疫组化法检测各组大鼠海马CA1区BDNF和TrkB蛋白的表达。结果 水迷宫结果显示,与假手术组比较,模型组大鼠的逃避潜伏期明显延长（P<0.05）,穿越平台次数明显减少（P<0.01）。与模型组比较,电针组大鼠的逃避潜伏期明显缩短（P<0.05）,穿越平台次数明显增加（P<0.01）。免疫组化结果显示,与假手术组相比,模型组大鼠海马CA1区BDNF表达明显减少（P<0.01）。与模型组相比,电针组大鼠海马CA1区BDNF表达明显增加（P<0.01）。但各组TrkB表达无显著差异（P>0.05）。结论 电针改善去势雌性大鼠记忆障碍的机制可能与增加海马CA1区BDNF的表达有关。     

心痛舒含药血清预处理对乳鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤及TNF-α、IL-1β的影响

目的观察心痛舒含药血清预处理对缺氧/复氧乳鼠心肌细胞核因子-κBp65(NF-κBp65)及其下游调控因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)的影响,探讨心痛舒对心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用机制。方法原代培养SD乳鼠心肌细胞,建立模拟心肌细胞缺氧/复氧损伤模型,设正常组、模型组、阳性对照组、心痛舒含药血清预处理组共4组。罗丹明B染色法观察心肌细胞形态,ELISA法测定培养液上清TNF-α、IL-1β含量,半定量RT-PCR方法检测NF-κBp65 mRNA表达水平。结果与模型组比较,阳性对照组、心痛舒含药血清预处理组TNF-α、IL-1β水平降低,NF-κBp65 mRNA的表达水平下降,差异有统计学意义(P<0.01);与阳性对照组比较心痛舒含药血清预处理组NF-κBp65 mRNA表达降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论心痛舒含药血清预处理可通过抑制缺氧-复氧心肌细胞炎症反应途径发挥保护作用,其机制与抑制NF-κB活化,从而抑制下游炎性细胞合成有关。 更多还原     

雄性“肾阳虚”亚健康大鼠模型的研究

〔摘要〕目的研究雄性“’肾阳虚”亚健康大鼠模型,为调理男性肾阳虚亚健康找寻科学配方〔方法控制用药剂 量及灌胃时间,用维生素B,建立雄性“’肾阳虚”亚健康大鼠模型,检测腺垂体一辜丸轴激素、氧化损伤因子及抗氧化 损伤因子、辜丸组织微细结构作为判断亚健康组织学依据〔结果与正常大鼠相比较,模型大鼠血清FSH,LH,T均 降低,均有统计学意义;模型大鼠rfn.清SOD卜降,差异有统计学意义(P<0.05 ) ; MDA增加,差异有统计学意义(P< 0.01) ;模型大鼠辜丸组织曲细精管规则,管腔变大,精子尾部有融合现象,生精细胞层次减少,排列较紊乱,出现空 泡现象结论运用维生素B,建立的雄性“’肾阳虚”亚健康大鼠模型成功     

NLRP3/ASC/caspase-1/IL-1β/IL-18轴在大鼠脓毒症急性肾损伤中的作用

[目的]观察盲肠结扎穿孔(Cecal ligation and puncture,CLP)所致的脓毒症诱导急性肾损伤(AKI)后大鼠不同时间点的血清及肾组织中NLRP3/ASC/caspase-1/IL-1β/IL-18的表达情况。[方法]建立大鼠CLP诱导的脓毒症AKI模型,并于手术后不同时间点用ELISA试剂盒方法测定血清尿素氮(BUN)、血清肌酐(Scr)水平及IL-1β/IL-18的表达量;采用Western blotting法检测肾脏组织NLRP3/ASC/caspase-1/IL-1β/IL-18蛋白水平,并对肾脏组织进行HE染色病理分析。[结果]CLP诱导的脓毒症大鼠血清BUN和Scr水平显著增高,肾小管坏死也显著增加,均于CLP术后24 h达到高峰,与假手术组大鼠相比差异显著(P0.05或P0.01);大鼠肾脏组织中NLRP3/ASC/caspase-1/IL-1β/IL-18及血清IL-1β/IL-18水平也随着损伤程度的加重表现出升高趋势,与假手术组相比差异均达到显著水平。[结论]大鼠脓毒症AKI后肾组织或血清中NLRP3/ASC/caspase-1/IL-1β/IL-18蛋白水平表达增加,表明NLRP3炎症小体的激活可能对脓毒症AKI及其病理改变有促进作用。     

马齿苋多糖对糖尿病小鼠糖脂代谢相关因子的影响

【目的】探讨马齿苋多糖（Polysaccharide of Portulaca oleracea L.,POP）对糖尿病小鼠糖、脂代谢相关因子的影响,为POP的开发利用提供依据。【方法】采用饲喂高糖高脂日粮并注射链脲佐菌素（STZ）的方法,诱导Ⅱ型糖尿病（NIDDM）小鼠动物模型,然后将其分为正常对照组、模型对照组、POP低剂量灌胃组(POP用量100 mg/kg)、POP高剂量灌胃组(POP用量200 mg/kg)和罗格列酮灌胃组(罗格列酮用量3 mg/kg),连续灌胃28 d后,将小鼠断头处死,采集肾组织,检测蛋白激酶B（PKB）、PKC、过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARγ）等糖脂代谢相关因子在糖尿病小鼠肾脏中表达量的变化。【结果】与模型对照组相比,其余各组小鼠肾组织PKB蛋白、PPARγ蛋白表达量均显著增加(P<0.05),正常对照组、POP高剂量灌胃组和罗格列酮灌胃组小鼠肾组织PKC蛋白表达量显著降低(P<0.05)。【结论】POP能上调NIDDM小鼠PKB、PPARγ基因的表达,能下调PKC基因的表达,从而发挥降低血糖的作用。     

丙酸钠对IPEC-J2细胞紧密连接及炎症细胞因子的影响

[目的]本文以猪肠道上皮IPEC-J2细胞为模型,探究不同水平丙酸钠对细胞紧密连接和炎症细胞因子的影响。[方法]分别用1和10 mmol·L~(-1)丙酸钠处理IPEC-J2细胞,以不加丙酸钠处理IPEC-J2细胞为对照组,分别处理12 h和24 h后测定各组细胞活力、跨膜电阻(TEER)值、紧密连接相关蛋白及炎症细胞因子基因表达和细胞上清液中炎症因子浓度。[结果]丙酸钠处理24 h后,处理组细胞活力显著下降(P0.05),细胞的TEER值则显著上升(P0.05)。RT-qPCR结果显示,紧密连接相关蛋白Claudin中,不同浓度丙酸钠处理12和24 h后,显著下调Claudin-1 mRNA的表达(P0.05),但显著上调Claudin-2、Claudin-3和Claudin-4 mRNA的表达(P0.05)。紧密连接相关蛋白ZO中,处理12和24 h时,1和10 mmol·L~(-1)丙酸钠分别显著上调ZO-2 mRNA和ZO-1 mRNA的表达(P0.05),但10 mmol·L~(-1)丙酸钠则显著下调ZO-2 mRNA的表达(P0.05)。不同浓度丙酸钠处理12和24 h均显著上调炎症细胞因子IL-8、IL-18和TNF-αmRNA的表达(P0.05),显著下调IL-6 mRNA的表达(P0.05)。ELISA测定结果表明,丙酸钠显著刺激IL-8和TNF-α的分泌(P0.05),对IL-18和IL-6的分泌则无显著影响(P0.05)。[结论]丙酸钠选择性上调紧密连接蛋白家族相关基因的表达,一定程度上维护小肠上皮细胞屏障功能的完整性,同时调节细胞炎症反应,揭示丙酸在调节小肠上皮细胞屏障功能以及炎症反应过程中发挥重要作用。     

白藜芦醇对快速老化鼠肝脏抗氧化能力的影响

分析白藜芦醇对快速老化鼠(SAMP/8)肝脏抗氧化能力的影响.将4月龄雄性SAMP/8鼠随机分为模型组和白藜芦醇低、中、高剂量组,4月龄正常老化SAMR/1鼠为正常对照组.对照组及模型组用生理盐水灌胃,白藜芦醇治疗组给予25、50和100mg/kg白藜芦醇灌胃.连续给药8周,测定各组小鼠肝组织超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)的含量,以HE染色进行肝组织形态学观察.结果表明:白藜芦醇各剂量组能提高SAMP/8鼠肝组织SOD活性(P<0.01),降低MDA含量(P<0.01),且能改善肝组织形态结构,尤以高剂量组效果显著.因此,白藜芦醇能显著提高SAMP/8鼠肝组织的抗氧化能力,具有一定的延缓衰老作用.