蚯蚓蛋白酶解工艺及其产物分析

采用Asl.398枯草蛋白酶制备蚯蚓肽,通过单因素与正交试验设计(L9(34)),以氨基氮数,多肽浓度为衡量指标,对最佳酶条件进行筛选研究,并分析了酶解液氨基酸含量和相对分子量的分布。结果表明:最佳酶解条件为pH 6.5、酶浓度为1%、温度50℃反应、时间8 h,在此条件下,酶解蚯蚓蛋白的水解液氨基氮数可以达到16.55 mmol/100 mL,水解液多肽浓度达9.22 mg/mL,酶解液分子量大部分是在5 000以下的多肽、小肽及氨基酸的混合物,其中分子量在220以下的占了72.09%,氨基酸组成平衡,含量丰富,可用来制取新型氨基酸微量元素及小肽添加剂。     

蚯蚓小分子多肽提取物的制备及抗氧化活性

研究了自溶酶解制备蚯蚓小分子多肽提取物的工艺,并对其抗氧化活性进行了初步研究。通过单因素和正交试验法,以肽的得率为评价指标,确定了最佳制备工艺:反应时间1 h,料液比1.0 g∶1.5 m L,温度35℃,p H值6.76。在此工艺条件下,1.7 kg鲜蚯蚓制自溶酶解,酶解液经分子膜截留并冷冻干燥,共得到了103.39 g蚯蚓小分子多肽提取物。该产品为微黄色粉末,略带独特香味,主要为相对分子质量3 000以下的小分子多肽和氨基酸。在浓度为10、30 mg/m L时,蚯蚓小分子多肽提取物对DPPH自由基和超氧阴离子自由基的清除率分别为91.1%、53.0%。     

超滤对罗非鱼下脚料蛋白水解液分离特性的影响

通过对罗非鱼下脚料蛋白水解液经超滤处理,去除杂质和大分子物质,通过葡聚糖凝胶柱层析法测定其分子量,研究了超滤对水解液分离特性的影响.结果表明:超滤处理有效地截留原酶解液中的起浑物质起到了澄清作用,可以在透过液中保留原酶解液的鲜味和甜味,有效去除了腥味.超滤后的酶解产物中含有多肽混合物,其中58.30％的多肽分子量大于4 467,27.0％的多肽分子量介于759 ～4 467之间,小于759的肽占14.71％.表明超滤后的肽的分子量基本上是小于6 000的.酶解液中蛋白肽的分子量控制在6 000以下,有利于人体对多肽的消化吸收.     

响应面优化南极磷虾粉肽制备工艺及α-葡萄糖苷酶抑制活性分析

该研究以南极磷虾粉为原料,α-葡萄糖苷酶抑制率为指标,在确认最佳生物酶的基础上,通过单因素实验和响应面优化酶解工艺条件,并用超滤和G-25进行分离纯化,凝胶色谱法探究酶解液和多肽的分子量及其分布情况。结果表明：复合蛋白酶酶解效果最佳;最佳酶解条件为酶解时间5.9 h、料液比3.75:1、酶添加量0.062 g/g(原料);酶解液的分子量集中分布在3000 u以下,占98.63%;经超滤C4（<3 ku）组分对α-葡萄糖苷酶抑制率IC50为（14.89±2.15） mg/mL;G-25纯化C4-2组分对α-葡萄糖苷酶抑制率IC50为（4.64±0.15） mg/mL。C4-2组分中<1000 u的多肽占97.6%,其中C4-2-1、C4-2-2、C4-2-3的分子量分别为597 u、335 u、246 u。本文第一次研究了南极磷虾粉制备α-葡萄糖苷酶抑制活性肽的方法,为南极磷虾资源的综合利用提供了依据。     

碱性蛋白酶酶解核桃粕蛋白产物抗氧化特性研究

采用碱性蛋白酶对核桃粕蛋白进行酶解,测定了不同酶解时间下的酶解液抗氧化性;用葡聚糖凝胶分离活性肽段并测定其抗氧化性。结果表明,酶解条件为酶用量3 000 U/g底物、底物质量浓度为40mg/mL、pH为8.5、温度为50℃下酶解210 min,酶解液的抗氧化活性较高,OH.清除率为72.3%,氧自由基清除率为83.1%,DPPH.清除率为102.6%,总抗氧化能力为162.986 U/mL;通过葡聚糖凝胶分离并与已知标准品对照表明碱性蛋白酶酶解核桃粕蛋白产物抗氧化活性多肽的分子量主要集中在1 321~607 u,该多肽片段对OH.清除率为70.23%,氧自由基清除率为62.57%,DPPH.清除率为99.56%,总抗氧化能力为118.987 U/mL。     

鹿角盘蛋白质酶法水解作用研究

研究鹿角盘中蛋白质酶法水解条件。用胰酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶在相同条件下水解鹿角盘蛋白质,比较氨基氮生成率,选择适宜酶类。用所选定的酶在不同温度(T)、不同底物浓度比(E/S)和不同水解时间(t)水解鹿角盘蛋白质,以氨基氮生成率为指标确定最佳水解条件。胰蛋白酶为适宜酶,最佳水解条件为:温度45℃,pH 8.0,底物浓度7.5%,酶与底物浓度比6 000μ/g,时间6h。胰蛋白酶是水解鹿角盘蛋白质较适宜的酶,在上述最佳条件下,水解鹿角盘蛋白质,氨基氮生成率达42%,氮溶解指数达93%,水解液中蛋白质绝大多数为低肽分子,更有利于机体消化吸收。     

超滤在猪血红蛋白酶解液中的应用研究

采用6～10 kD和3 kD超滤膜对猪血红蛋白水解液进行浓缩实验,对超滤前后的多肽类蛋白质、氨基氮、血红素的变化进行分析.实验结果表明:采用3 kD超滤膜对酶解液的浓缩效果较好,浓缩倍数分别达到2.3、2.0、1.9,经冷冻干燥得产物蛋白质多肽含量91%,血红素含量2.9%混合营养物,可以用来制备含量较高的富含血红素肽的混合营养物.     

梅花鹿茸蛋白质酶法水解研究

目的研究梅花鹿茸蛋白质酶法水解条件。方法用胰酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶在相同条件下水解梅花鹿茸蛋白质,比较氨基氮生成率,选择适宜酶类。用所选定的酶在不同温度(T)、不同底物浓度(S)、不同酶与底物浓度比(E/S)和不同水解时间(t),水解梅花鹿茸蛋白质,以氨基氮生成率为指标确定最佳水解条件。结果胰蛋白酶为适宜酶,最佳水解条件为:温度45℃、pH8.0、底物浓度7.5%、酶与底物浓度比6000u/g、时间6h。结论胰蛋白酶是水解梅花鹿茸蛋白质较适宜的酶,在上述最佳条件下,水解梅花鹿茸蛋白质,氨基氮生成率达43.52%,氮溶解指数达93%,水解液中蛋白质绝大多数为低肽分子,更有利于机体消化吸收。     

微波辐射辅助木瓜蛋白酶水解大豆蛋白的研究

【目的】针对常规酶解反应所需时间较长,研究了微波辐射对蛋白酶水解蛋白质的影响,为蛋白的工业化快速酶解提供技术支持。【方法】根据木瓜蛋白酶水解大豆蛋白的最佳工艺条件,用自行设计的微波辐射蛋白酶催化反应器,在不加微波和480 W微波功率条件下（微波功率密度为4 W/g）,采用木瓜蛋白酶水解大豆蛋白,用甲醛滴定法测试水解液中氨基酸含量,比较2种条件下的水解效果,并用高效液相色谱法分析了2种条件下水解液中氨基酸的组成。【结果】不加微波条件下氨基氮含量达到0.535 5 g/L需要水解5 h,而在480 W微波辐射下水解1 h,氨基氮含量就达到了0.568 7 g/L,反应速率提高了5倍以上。高效液相色谱分析表明,于常规条件下水解5 h和480 W微波辐射辅助水解1 h,木瓜蛋白酶水解大豆蛋白的酶解液中游离氨基酸含量和总氨基酸含量基本相同。【结论】微波辐射可以加快蛋白酶水解反应,提高反应速率。     

套膜海葵总蛋白的提取和酶解条件优化及其杀虫活性

【目的】明确套膜海葵总蛋白的提取工艺、最优酶解条件及其杀虫活性,为拓展和开发海葵酶解多肽的应用提供理论依据。【方法】采用裂解液法提取海葵总蛋白,结合单因素试验对其酶解条件进行优化;同时采用昆虫注射法研究酶解海葵多肽的杀虫活性。【结果】从套膜海葵中提取海葵总蛋白的分子量主要为31.0～43.0kDa,20g套膜海葵可提取海葵总蛋白160mg,蛋白浓度为0.5mg/mL;海葵总蛋白的最优酶解条件为pH 8、碱性蛋白酶(最佳水解酶)4 000U/g、温度60℃、酶解6h,在此条件下酶解得率为9.145%;昆虫注射海葵酶解多肽1.0μg/mg时死亡率达90%。【结论】获得海葵总蛋白酶解的最佳蛋白酶及其最优酶解条件,成功制备具有杀虫活性的海葵酶解多肽,为深入开发海葵酶解多肽的杀虫活性奠定了基础。     

一株黑曲霉菌株所产菊粉酶的酶学性质

对筛选得到的一株黑曲霉菌株(Aspergillus,niger inu-8)所产菊粉酶的酶学性质进行了研究.结果表明,菊粉酶的最适作用温度为45～55℃,在30～60℃范围内该酶能保持较高的活性,但超过60℃后其活性迅速下降;在80℃水浴下处理0.5 h,酶活性丧失80%;该酶的适宜pH值相对偏酸,在pH值4.0～6.0时有很好的稳定性,在pH值5.0时表现为一个活性高峰;Ca2+对该酶具有明显激活作用,Hg2+和EDTA(乙二胺四乙酸)是该酶的强烈抑制剂;菊粉酶可水解菊粉但不水解棉子糖,对蔗糖酶的活性较低,I/S为52,对菊粉的米氏常数Km为0.34 mol·L-1,最大反应速度Vmax为0.53 mg·L-1·min-1.     

荞麦淀粉酶水解工艺条件研究

为探索荞麦淀粉酶水解特性及工艺条件,试验采用中温α-淀粉酶、真菌α-淀粉酶及其不同组合对荞麦淀粉进行水解,并在水解温度、pH、底物浓度及酶用量等单因素试验的基础上进行了二次回归正交旋转试验,确定了荞麦淀粉酶解工艺条件。结果表明,真菌α-淀粉酶适用于荞麦淀粉水解,其淀粉转化率和DE值均较高;各因素对真菌α-淀粉酶水解荞麦淀粉影响程度大小依次为pH>水解温度>酶用量>底物浓度;真菌α-淀粉酶水解荞麦淀粉的适宜工艺条件为:水解温度54℃,pH 6.0,底物浓度50 g/L,酶用量100~130 U/g,水解时间为75 m in,在此工艺条件下荞麦淀粉酶水解度为66.05%。     

双酶法提取肌肽的工艺研究

以牛肉为原料,采用胃蛋白酶、胰蛋白酶双酶法提取肌肽。结果表明,通过正交试验获得的最佳提取工艺为:胃蛋白酶用量为2.0%,其酶解时间为7 h;胰蛋白酶用量为2.0%,其酶解时间为4 h。     

鼠李糖脂二糖脂强化酶解木质纤维素

将经过纯化的鼠李糖脂二糖脂添加于纤维素酶酶水解试验中,以稻草、竹叶为底物,分析水解过程中纤维素酶酶活(以FPA计)及还原糖浓度的变化特征,探讨和分析鼠李糖脂二糖脂对稻草和竹叶中木质纤维素水解产还原糖能力、纤维素酶活的稳定性、发酵液表面张力和pH值的影响作用.结果表明,添加鼠李糖脂二糖脂对木质纤维素类底物酶水解过程中还原糖浓度的增加、酶活稳定性的提高有明显的促进作用,并且其促进作用随着表面活性剂添加量的适量增加而增强,当添加量为0.24%时,稻草和竹叶还原糖的产量分别提高了17.19%和27.68%.此外,水解反应结束后,加入鼠李糖脂二糖脂的水解液表面张力值显著降低,且随着添加量的增高而降低,当添加量为0.24%时,可分别降至63.4和60.8mN·m~(-1)左右,而pH值的变化微小.     

亚临界流体酶催化制备富含多不饱和脂肪酸的磷脂研究

以亚临界1,1,1,2-四氟乙烷(R134a)为介质,固定化脂肪酶Lipozym TL IM催化鱼油多不饱和脂肪酸与大豆磷脂的酸解反应制备EPA/DHA磷脂,探讨了压力(2～8 MPa)、温度(30～60℃)、水分、接触时间(1～12 h)对酶稳定性的影响,研究了固定化脂肪酶Lipozyme TL IM在亚临界R134...     

高产纤维素酶木霉菌株的筛选

以前期筛选获得的20株木霉菌株为试验对象,通过刚果红羧甲基纤维素钠(CMC-Na)培养基筛选出11株产纤维素酶能力较好的菌株,对其进行酶活性检测,发现菌株SS003产生的纤维素酶活性最高,并研究了温度和pH对该菌株所产的纤维素粗酶活性的影响。结果表明,SS003产生的纤维素酶最适反应温度为55~60℃,最适pH为3.0。     

用复合酶酶解提取海带岩藻聚糖硫酸酯的工艺研究

采用正交试验的方法,研究了用戊聚糖复合酶与复合纤维素酶酶解海带Lam inaria japonica提取岩藻聚糖硫酸酯的工艺参数。结果表明:用戊聚糖复合酶酶解海带的最佳酶解参数为酶加量0.06%,温度为40℃,pH为3.5,酶解时间为30 m in,对岩藻聚糖硫酸酯的提取率为1.845%,粗提物中总硫酸根的质量分数为0.238%;用复合纤维素酶酶解海带的最佳酶解参数为酶加量0.208%,温度为50℃,pH为4.5,酶解时间为50 m in,对岩藻聚糖硫酸酯的提取率为1.279%,粗提物中总硫酸根含量为0.231%。用两种复合酶酶解法提取的岩藻聚糖硫酸酯粗提物提取率均较水煮法高(0.968%)。     

Advance on Production of Human Milk Fat Substitutes （HMFS）

Human milk fat (HMF) is the component that supplies the highest fraction of the infant's required dietary energy. Other sources of fat are necessary and crucial for infants while the breastfeeding is not possible, desirable or sufficient. There is enough scientific evidence that suggests the composition and distribution of the fatty acids affect the absorption of the fat in infants greatly, which influences the growth and health of infants. However, the composition and distribution of the fatty acids in cer...     

山药蛋白酶解液的分离纯化

以山药(Dioscorea opposite Thumb.)为原料,选取碱性蛋白酶酶解山药蛋白粗提物制备山药蛋白酶解液。分别采用纤维素DE-52阴离子交换层析和Sephadex G-50凝胶层析,对酶解制备的山药蛋白酶解液进行分离纯化。结果表明:经过纤维素DE-52阴离子交换层析,得到4个吸收峰,收集每个峰组分,其单位质量的还原能力分别为峰2(P2)>峰1(P1)>峰3(P3)>峰4(P4)。采用Sephadex G-50凝胶分别用蒸馏水和Tris-HCl缓冲液对P1和P2组分继续分离纯化,均能得到2个吸收峰(组分)。