枇杷胚性愈伤组织的诱导和保存

不同的基本培养基对枇杷胚愈伤组织的诱导有较大影响 ;不同品种的鱼雷形胚的愈伤组织的诱导率有明显差异 ;不同生长调节剂组合和碳源对愈伤组织的形成有较大的影响 .比较而言 ,以 B5为基本培养基并添加 0 .5mg· L-12 ,4 - D和 1mg· L-1BA组合诱导的愈伤组织的质量最佳 .蔗糖作为碳源 ,有利于愈伤组织生长 ,而山梨醇则对细胞分化有利 .附加 0 .1mg· L-12 ,4 - D和 0 .5mg· L-1BA的 B5培养基有利于胚性愈伤组织的继代、增殖 ,低温和弱光照有利于胚性愈伤组织的保存 .     

百合基因转化胚性愈伤组织受体系统的建立

为建立稳定高效的胚性愈伤组织基因转化受体系统,以麝香百合Liliumlongiflorum花丝为外植体进行了愈伤组织诱导、植株再生研究以及抗生素敏感性试验。结果表明:愈伤组织诱导增殖培养基为MS+NAA1 0mg·L-1+BA0 5mg·L-1,分化培养基为MS+KT1 0mg·L-1+NAA0 2mg·L-1。抗生素敏感性试验表明,百合基因转化胚性愈伤组织的卡那霉素选择压为75mg·L-1,潮霉素的选择压为20mg·L-1,头孢霉素选择压为250mg·L-1。表4参10     

紫花苜蓿愈伤成苗高频再生体系的建立及其影响因子的研究

 对秘鲁苜蓿等品种的子叶和下胚轴愈伤再生植株过程进行了系统研究。经筛选获得了以改良的SH大量元素 +MS微量元素及铁盐 +水解酪蛋白 +VB19.9mg·L-1+VB69.5mg·L-1+尼克酸 4 .5mg·L-1+琼脂 8g·L-1为基本成分的愈伤成苗高频再生体系。其中 ,诱导愈伤和保持愈伤的培养基加 2 .0mg·L-12 ,4 -D +0 .0 2 5mg·L-1KT ;诱导再生植株分化的培养基加 0 .4mg·L-1KT +2 0g·L-1的蔗糖 ;诱导生根的培养基为 1/ 2MS ,其中蔗糖浓度为 10 g·L-1。秘鲁苜蓿子叶愈伤组织分化率达 10 0 % ,下胚轴愈伤组织分化率达 92 %以上。以该体系完成苜蓿愈伤植株再生具有高效、快速的特点 ,完成植株再生仅需 6 0～ 70d。     

日本结缕草成熟种子愈伤组织诱导及植株再生的影响因子分析

 【目的】优化日本结缕草的组织培养体系，提高其植株再生率，建立高频植株再生体系。【方法】以日本结缕草的成熟种子为外植体，分析激素、基本培养基、培养条件、脯氨酸、Cu2+等因子对愈伤组织诱导及植株再生的影响。【结果】（1）培养基中添加脯氨酸能提高愈伤组织诱导率，而BA降低愈伤组织的诱导率，低浓度的NAA(0.1～0.2 mg·L-1)能促进愈伤组织的形成，愈伤组织诱导的最佳培养基为ND＋2,4-D 3.0 mg·L-1＋NAA 0.2 mg·L-1+L-Pro 500 mg·L-1，愈伤组织诱导率达57.3%；（2）愈伤组织继代的最佳培养基为MSD+ 2,4-D 1.0 mg·L-1；（3）愈伤组织分化的最佳培养基为MSD＋NAA 0.3 mg·L-1+KT 0.5 mg·L-1+BA 0.05 mg·L-1 + L-Pro 500 mg·L-1，分化率达36.7%。【结论】优化了日本结缕草的组织培养体系，初步找到了影响其成熟种子愈伤组织诱导及植株再生的主要因子。     

籼稻成熟胚愈伤组织诱导及不定芽分化

以不同籼稻品种的成熟胚为研究材料,通过对比实验,结果表明,采用DNB为诱导愈伤组织培养基,DMS与DNB培养基交替继代,籼稻愈伤组织诱导率高、质量较好;采用MSRc3(MS+casamino acids 500mg·L-1+gluttamine 300mg·L-1+proline 500mg·L-1+mannitol 36.4g·L-1+maltose 30g·L-1+TDZ 0.2mg·L-1+phytagel 5g·L-1pH 5.8)为分化培养基,愈伤组织不定芽分化率在90%以上,较对照MSR1提高300%～500%.     

抗生素对悬铃木体外植株再生影响的研究

研究了卡那霉素(Kanamycine,简写为Ka)和头孢霉素(Cefotaxime,简写为Cef)对悬铃木外植体再生的影响.试验结果表明,Ka和Cef对悬铃木叶片愈伤组织诱导、芽分化和幼芽根形成都能产生抑制作用.在幼芽生根和叶片分化培养基中分别加入质量浓度为15mg·L-1和40mg·L-1Ka,叶片愈伤组织,幼芽和根的诱导率分别为0;在分化和生根培养基中分别加入质量浓度为500mg·L-1和800mg·L-1的Cef则可使愈伤组织、幼芽和根的诱导率为0.在叶片分化培养基中同时加入这2种抗生素,愈伤组织和幼芽诱导率为0的Ka+Cef的组合的质量浓度为30mg·L-1+400mg·L-1.试验结果对悬铃木基因工程操作有一定的参考价值.     

不同浓度IBA和6-BA对百合组织培养的影响

研究了不同IBA,6 BA对百合组织培养过程愈伤组织增殖、芽的分化和生根的影响。结果表明:MS+0 5mg·L-16 BA+0 4mg·L-1培养基对愈伤组织增殖效果最好;最佳的分化和生根培养基分别为MS+0 3mg·L-1IBA+1 5mg·L-16 BA和1/2MS+0 6mg·L-1IBA。     

培养基及培养条件对青钱柳愈伤组织生长和黄酮含量的影响

在固体培养条件下,研究了不同外植体来源、培养基、植物激素、接种量、培养时间对青钱柳愈伤组织生长和黄酮含量的影响.结果表明:①不同外植体来源的愈伤组织增长量茎段大于叶片,而黄酮含量叶片大于茎段;②8种基本培养基中,改良MS培养基上的愈伤组织增长量及黄酮含量均显著高于其它培养基;③促进青钱柳愈伤组织增长量和黄酮含量积累的最佳激素组合为:1.0 mg.L-1KT+0.5 mg.L-12,4-D+0.3 mg.L-1NAA;④愈伤组织增长量最大时的接种量为0.65 g;⑤愈伤组织培养至12 d增长量最大,培养16 d,黄酮含量达最高值.     

魔芋愈伤组织诱导、分化及植株再生的初步研究

采用白魔芋(Amorphophallusalbus)块茎为外植体,以MS培养基为基本培养基,在不同生长调节剂组合的诱导培养基和分化培养基上进行培养。试验结果显示,在MS+0.5mg·L-16 BA+0.5mg·L-1NAA、MS+0.5mg·L-16 BA+0.5mg·L-12,4 D及MS+1.0mg·L-16-BA+1.0mg·L-12,4 D的培养基上容易诱导愈伤组织(诱导效率分别为92%、96%和93%),且愈伤组织容易分化;在分化培养基MS+1.0mg·L-16 BA+0.1mg·L-1NAA及MS+1.0mg·L-16 BA+0.5mg·L-1NAA上,愈伤组织容易分化(分化效率分别为86%和52%)。将在MS+1.0mg·L-16 BA+0.1mg·L-1NAA培养基上分化出的不定根和不定芽转至MS培养基上,30d后培养出完整植株。     

果蔗组织培养快繁技术研究

采用蔗株的茎尖培养出绿苗或茎梢嫩叶诱导出愈伤组织,再分化出绿苗,均有较好效果.茎尖培养用MS+6-BA2. 0 mg·L-1+NAA 0.3 mg·L-1附加活性炭0.05%;MS+2,4-D 1.0～3.0 mg ·L-1对诱导愈伤组织效果较佳,但含2,4-D 1.0 mg·L-1的处理对黑皮果蔗仅能诱导生根而无法诱导出愈伤组织;MS +6-BA 1.0 mg·L-1+KT 1.0 mg·L-1+NAA 0.3 mg·L-1对分化绿苗及其增殖效果最好;生根培养基选用1/2MS+IBA 1.0 mg·L-1+NAA1.0 mg ·L-1附加活性炭0.05%.具有根系的完整植株的组培苗移到苗圃假植,待苗高20 cm 以上,分单株定植大田,成活率90%以上,若将丛苗再分单株袋栽成活后定植大田,成活率可达100%.     

玻璃化法超低温保存荔枝胚性愈伤组织及其植株再生

采用玻璃化法对荔枝胚性愈伤组织超低温保存及植株再生进行了初步探讨.将继代保存15 d的荔枝胚性愈伤组织转接到预培养基[MS+50 mL.L-1二甲基亚砜(DMSO)+1 mg.L-12,4-D+20 g.L-1蔗糖+6 g.L-1琼脂糖]中,在5℃低温下预培养.将预培养后的愈伤组织于常温下用体积分数为60%玻璃化溶液(2PVS2)装载20 min,再于0℃下用PVS2溶液平衡40 min;换新鲜的PVS2溶液,迅速投入液氮中保存.1周后取出,于40℃温水浴中化冻,弃PVS2,用1.2 mol.L-1蔗糖液+MS基本培养基的洗涤液洗涤3次,再接种到新鲜的培养基中恢复培养,恢复培养后的胚性愈伤组织能正常进行体细胞胚胎发生、成熟和植株再生.     

烟草体细胞胚胎发生再生植株

以烤烟K326、红大、云85叶片诱导的愈伤组织为材料,在含不同激素配比的培养基上进行试验,研究其体细胞胚胎的发生能力.结果表明:不同品种之间体胚的发生能力存在较大差异,不同激素配比诱导体胚发生的频率也不同,K326、红大、云85体胚最高的发生频率分别为8.3%、47.4%和61.1%;最佳激素配比分别为2.0mg·L-1NAA+0.5mg·L-1BA、2.0mg·L-1NAA+0.2mg·L-1BA和2.0mg·L-1NAA+0.5mg·L-1BA.试验中观察到烟草体胚发育的各阶段,并最终再生成完整植株.     

蔗糖与麦芽糖质量浓度及添加成分对水稻成熟胚培养的效应

以IR54、639、金糯2号、特优63等4个水稻品种的成熟胚为外植体,以MS为基本培养基,研究了蔗糖与麦芽糖质量浓度及不同添加成分对水稻成熟胚培养的影响.结果表明,在这2种糖质量浓度及其配比试验中,在麦芽糖与蔗糖总量为60 g.L-1下,麦芽糖与蔗糖质量浓度比为1∶2时,愈伤组织诱导率、愈伤组织分化率、绿苗分化率均最高;0.5 mg.L-12,4-D和2 mg.L-1KT配合使用,比使用其他激素配比效果好;不同水稻基因型在不同培养基中的诱导效应存在差异.     

南方红豆杉愈伤组织诱导和继代培养体系的建立

以南方红豆杉为材料,建立了其愈伤组织诱导与保持的技术体系,主要为:(1)南方红豆杉侧芽是诱导愈伤组织的最佳外植体;(2)南方红豆杉愈伤组织诱导的最佳培养基为:B5+2.0 mg.L-12,4-D+1.0 mg.L-1NAA+0.2 mg.L-1IAA;(3)南方红豆杉愈伤组织增殖的培养基为:B5+4.0 mg.L-1NAA+0.5 mg.L-12,4-D+0.2 mg.L-1GA+500 mg.L-1AC+2000 mg.L-1LH.并在培养基中同时添加AC、LH和GA33种抗褐物质,取得较好的抗褐化效果.     

早熟桃胚愈伤组织的诱导与保持

以早熟桃品种西选一号胚为外植体,对愈伤组织的诱导、继代保持和分化进行了研究。结果表明:2,4-D浓度为2.0mg.L-1的MS培养基是愈伤组织诱导的最适宜培养基,诱导率最高,达90.2%,诱导的愈伤组织质量好;将2,4-D浓度降低至1.0 mg.L-1,采用MS、WPM 2种培养基进行交替继代,可以使愈伤组织长期保持,但这种愈伤组织不能分化出芽。     

油木奈成熟胚愈伤组织的诱导与保持

以油木奈成熟胚为材料,对愈伤组织的诱导和保持进行了初步研究。结果表明:以WPM为基本培养基,当2,4-D浓度为2.0 mg.L-1时,成熟胚的诱导率最高,达73.54%;以MS为基本培养基,KT浓度一定时,2,4-D浓度为1.0 mg.L-1时,愈伤组织保持的效果较好。     

黄花水仙和南日岛水仙的组培快繁

以黄花水仙和南日岛水仙为材料,对2个水仙品种的组培快繁技术进行了研究.结果表明:以低温处理1个月的带鳞茎盘基部的鳞片为外植体,接种于MS+0.5 mg.L-1BA+0.1 mg.L-12,4-D的诱导培养基和MS+1.0 mg.L-1BA+0.5或1.0 mg.L-12,4-D的继代增殖培养基中,诱导黄花水仙形成的小鳞茎数量多,增殖率高;南日岛水仙以MS+0.5 mg.L-1BA+2.0 mg.L-1NAA的诱导培养基和MS+1.0 mg.L-1BA+0.5或1.0 mg.L-12,4-D的增殖培养基效果较好.生根培养基为1/2MS+0.05 mg.L-1NAA,移栽后成活率很高.     

百合愈伤组织的诱导及植株再生

试验以东方百合(Oriental hybrids)"bernini"的花柱、花丝、花瓣为外植体,利用组织培养技术,探讨不同外植体愈伤组织的诱导、胚状体发生及植株的再生状况。结果表明,三种外植体均能诱导愈伤组织,花柱和花瓣诱导的愈伤组织为绿色致密的非胚性组织,而花丝诱导的愈伤组织为黄色疏松的胚性组织,将胚性愈伤组织继续培养一个月可发生胚状体。花丝愈伤组织诱导率、分化率以及分化速度均高于花柱和花瓣。诱导愈伤组织的最佳培养基为改良MS(盐酸硫胺素的浓度为4mg·L~(-1))+2,4-D2mg·L~(-1)+水解乳蛋白300mg·L~(-1);最佳分化培养基为MS+KT0.1mg·L~(-1)+BA 0.5mg·L~(-1)+NAA 1mg·L~(-1);最佳生根培养基为MS+IBA 0.5mg·L~(-1)。     

莲雾组织培养和快速繁殖技术

以莲雾未萌发带顶芽茎段为材料研究其组织培养和快速繁殖技术。结果表明:莲雾组织培养的基本培养基为WPM;带顶芽茎段诱导芽的适宜培养基为WPM+0.5 mg.L-16-BA+0.02 mg.L-1NAA;通过腋芽增殖途径的适宜培养基为WPM+0.8 mg.L-16-BA+0.4 mg.L-1IBA;壮苗适宜培养基为WPM+0.2 mg.L-16-BA+0.4 mg.L-1IBA;生根适宜培养基为1/2WPM+0.5 mg.L-1NAA+0.2 mg.L-1IAA。组培苗驯化移栽成活率达90%以上。剪取成活组培苗顶部枝梢进行嫩枝(幼态)扦插生根成苗,能提高繁殖率,降低成本。     

51份龙眼种质的胚性愈伤组织诱导及其离体保存

对福建龙眼的主要栽培品种、地方品种及特异株系共51份种质的幼胚进行培养,诱导胚性愈伤组织作为种质资源离体保存的材料,并进行限制生长保存试验.结果表明:MS+2 mg.L-12,4-D培养基适用于绝大部分品种的不同直径的龙眼幼胚胚性愈伤组织的诱导,平均诱导率为48.3%;直径2-4 mm的幼胚最适宜于胚性愈伤组织诱导.在添加1 mg.L-1活性炭的培养基上进行为期7-10 d的过渡培养,能减少直径<2 mm和直径>6 mm的幼胚因褐变导致的死亡,从而提高愈伤组织诱导率.龙眼胚性愈伤组织在常规继代培养中的周期为20 d左右,且品种间的差异较大.在MS+1 mg.L-12,4-D培养基中附加20 g.L-1甘露醇,于16℃低温下进行限制生长保存,可以使龙眼继代培养周期由原来的20 d延长至60 d.