不同理化因子对青钱柳愈伤组织生长和黄酮类化合物合成的影响

研究不同理化因子对青钱柳愈伤组织生长和黄酮类化合物合成的影响。结果表明:(1)青钱柳第8代愈伤组织生长量最大,增长倍数为13.29,第10代愈伤组织的总黄酮达到最大值,黄酮含量为2.02%。(2)3种光照处理中,12 h.d-1光照的愈伤组织增长量、黄酮含量最高。(3)当pH为5.8时,愈伤组织增长量最大,增长倍数达17.32;当pH为6.0时,黄酮含量最高,为2.40%。(4)3种碳源差异极显著,以附加3%分析纯蔗糖的愈伤组织生长量和黄酮含量最高;4种添加物中5 mg.L-1E物质愈伤组织增长量最大,黄酮含量也是最高。(5)以5月中旬采集的材料诱导出的愈伤组织继代生长后,增长量最大;从黄酮含量上比较,以7月中旬最高。     

5种大量元素对青钱柳愈伤组织生长及黄酮类化合物积累的影响

以MS为基本培养基,研究不同浓度的5种大量元素对青钱柳愈伤组织生长及黄酮类化合物积累的影响.结果表明:MS培养基中NH4 NO3、KN03浓度分别降至1/2C时,有利于愈伤组织生长和黄酮积累;当KH2P04浓度为3/2C时,愈伤组织生长量与黄酮含量均达到最大值,分别为0.53g/瓶和4.67%;MgSO4浓度在3/2C时,愈伤组织生长良好,而1/2C有利于黄酮积累;CaCl2在一定范围内不会影响愈伤组织生长,适当提高Ca2+浓度有利于黄酮积累.     

培养基及培养条件对甘草愈伤组织生长和黄酮类化合物合成的影响

以MS，B5，N6，NN，6，7-V，WP为基本培养基，分析了不同类型培养基对甘草愈伤组织生长及黄酮类化合物生物合成的影响，并考察了培养基中添加的激素种类和浓度以及培养基酸碱度的作用。结果表明：在6种基本培养基中，以B5培养基最利于生物量的积累，异甘草素含量最高WP培养基最利于甘草素的合成，其次是6，7-V培养基，以N6培养基最差；当培养基中添加0．1mg／L NAA时，甘草素含量最高，达57．24μg/g，当培养基中添加1．0mg/L NAA时，异甘草素含量最高，达36．45μg/g；pH值为6时，甘草愈伤组织生物量积累最高，同时对黄酮类化合物甘草苷和甘草素的生物合成也最为有利，尤其是甘草苷，积累量最高，达46.88μg/g，比其它pH值处理高152．8％～245．5％。     

青钱柳愈伤组织增殖

为获得大量优质愈伤组织,以青钱柳(Cyclocarya paliurus)叶片为外植体诱导出的愈伤组织为材料,研究了基本培养基、蔗糖质量浓度、植物生长调节剂和镧稀土对愈伤组织增殖的影响。结果表明,综合愈伤组织增长率以及愈伤组织的颜色和状态因素,以MS基本培养基的增殖效果最佳;蔗糖质量浓度为20.00 g/L时愈伤组织增长率最高;植物生长调节剂对愈伤组织增殖的最佳组合为KT0.20 mg/L+2,4-D0.20 mg/L,平均增长量、增长率分别为4.38 g/瓶和1 024.51%。稀土对愈伤组织增殖的最佳质量浓度为0.50 mg/L。研究结果为进一步建立青钱柳悬浮培养体系和次生代谢调控的研究提供基础,同时也为青钱柳组培快繁技术的研究提供依据。     

培养条件对三角枫愈伤组织生长及总黄酮含量的影响

以MS为培养基,研究了光照、温度、植物生长调节剂等条件对三角枫愈伤组织诱导生长和总黄酮含量的影响。结果表明:光照对愈伤组织中总黄酮的积累有极显著影响,对愈伤组织鲜重生长有显著影响,对愈伤组织干重生长影响较小。与暗条件相比,连续光照不利于愈伤组织形成,但有利于愈伤组织中总黄酮积累,间断性光照有利于愈伤组织形成,但不利于总黄酮积累;黑暗不利于愈伤组织中总黄酮积累。三角枫愈伤组织生长及黄酮类化合物生物积累的适宜温度为25℃,与之相比,低温(15℃)或高温(35℃)培养时愈伤组织生长及总黄酮积累均受到抑制,变温(15℃转25℃、25℃转35℃)培养减弱愈伤组织生长,不利于黄酮的积累。4种供试植物生长调节物质对三角枫叶愈伤组织生长和总黄酮积累的影响均达到了极显著水平,愈伤组织生长的最佳生长调节剂组合是0mg/L2,4-D+1.0mg/L6-BA+0.5mg/LNAA+0.5mg/LIBA;促进总黄酮积累的最佳生长调节剂组合是0mg/L2,4-D+1.5mg/L6-BA+1.0mg/LNAA+1.0mg/LIBA。     

3种抗氧化剂对青钱柳愈伤组织褐化的影响

褐变是导致青钱柳组织培养失败的主要原因之一。研究维生素C(VC)、植酸(PA)和柠檬酸(CA)3种抗氧化剂对青钱柳愈伤组织生长、褐化及其生理生化特性的影响。结果表明,适当浓度的抗氧化剂处理能有效抑制愈伤组织褐化率,促进愈伤组织生长,抑制培养过程中细胞质膜透性的增加。其中VC的处理效果较为明显,PA其次;最适浓度分别为VC 100 mg·L-1、PA 250 mg·L-1和CA 50~100 mg·L-1。VC 100 mg·L-1处理的愈伤组织鲜重增长率比对照增加73.88%,褐化率和细胞膜透性分别比对照低56.52%和45.75%,均达到显著或极显著水平。适当浓度的抗氧化剂使苯丙氨酸解氨酶(PAL)的活性在一定程度上受到抑制,但对多酚氧化酶(PPO)活性的抑制作用总体上不明显。总之,适当浓度的3种抗氧化剂处理能有效降低青钱柳愈伤组织褐化及其产生的伤害,促进生长,对PPO活性的调控可能不是其控制褐化的主要方式,有关机制尚待进一步探讨。     

青钱柳愈伤组织诱导

为获得优质的愈伤组织,以青钱柳嫩茎和叶片作为外植体诱导愈伤组织,研究了不同的消毒方法、基本培养基和植物生长调节剂对青钱柳叶片和茎段愈伤组织诱导的影响.结果表明,以青钱柳茎段为外植体诱导愈伤组织,最佳的消毒组合为70％酒精10 s+0.1％升汞4min,污染和死亡率最低(18.0％),诱导率最高(95.0％).以青钱柳叶...     

青钱柳愈伤组织培养条件研究的优化

本试验研究了青钱柳愈伤组织培养中0．1％升汞溶液的最佳消毒时间、最佳外植体选择和最适基本培养基。结果表明：以叶片做为外植体,0．1％升汞溶液的消毒时间应掌握在3～4min之内,以茎段做外植体,消毒时间应掌握在14min左右。从愈伤组织诱导率上看,以当年生幼嫩茎段做外植体诱导效果更佳。MS和改良后的MS在特定的激素配比下均可诱导出健康的愈伤组织,以改良MS培养基＋2．0mg／L6-BA＋0．1mg／LNAA愈伤组织诱导率最高达83．33％,更适合青钱柳茎段的培养。     

生长素对银杏愈伤组织细胞生长和黄酮糖苷含量的影响

银杏（ＧｉｎｋｇｏｂｉｌｏｂａＬ．）是裸子植物银杏纲中唯一存留下来的古老树种,素有“活化石”之称。６０年代以来,国内外学者对银杏叶的化学成分、药理作用以及应用做了大量研究工作。研究证明,银杏叶中含有多种药用活性成分和营养物质,其提取物能治疗冠心病、心绞痛、高血压等心血管疾病。近年来,随着分离纯化技术的进一步发展,银杏叶成分的应用范围不断扩大［１］。许多发达国家已开发出系列的银杏叶制剂,其产品包括药剂、保健食品和化妆品。随着生物技术的发展,用组织培养产生有用的次生物已取得相当大的成绩［２］,利用细…     

青钱柳愈伤组织诱导与增殖的初步研究

[目的]对青钱柳愈伤组织的诱导与增殖进行初步研究。[方法]以青钱柳茎段和叶片为外植体,利用MS、WPM、改良DKW 3种基本培养基,添加不同浓度配比的6-BA和IBA,来探讨愈伤组织诱导和增殖的最佳培养基配方。[结果]诱导茎段和叶片愈伤组织产生的最佳培养基配方分别为:MS+4.0 mg/L 6-BA+2.0 mg/L IBA和MS+2.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L IBA;愈伤组织增殖时的最佳培养基为:MS+1.0 mg/L 6-BA+1.0 mg/L IBA。200 mg/L Vc对抑制青钱柳愈伤组织褐化效果最好,褐化率仅为5.71%。[结论]为青钱柳组培快繁体系的建立和分子育种研究的开展奠定了一定理论基础。     

不同季节遮荫对青钱柳生长和主要次生代谢物积累的影响

青钱柳是近年来开发利用的我国特有药食同源珍稀植物,其叶中含有的活性次生代谢物对人体健康具有促进作用。探索光照条件和收获季节等环境因子对主要次生代谢物积累的影响以及生长与次生代谢物积累间关系,有助于优化药用青钱柳人工林栽培条件。该文采用遮荫处理,研究不同遮荫水平下6—11月青钱柳叶中黄酮类和三萜类化合物积累、苗高和地径生长的变化,在此基础上分析青钱柳次生代谢与生长间的关系。结果表明:中度遮荫促进了青钱柳苗的高生长,但随遮荫程度加大,地径生长不断下降。黄酮类化合物、总三萜和青钱柳甙Ⅰ的积累受到遮荫处理的抑制,而青钱柳酸B和阿江榄仁酸的含量在遮荫条件下明显高于自然光下。在自然光下,黄酮类化合物的含量在8月和10月明显高于其他季节,呈“双峰型”变化模式。但遮荫处理推迟了黄酮类物质积累的高峰。遮荫处理并未影响三萜类化合物的季节变化模式,总三萜和三萜单体的含量在不同遮荫水平下均在9月达到最大,呈“单峰型”变化模式。相关性分析结果表明,总三萜和阿江榄仁酸的积累与青钱柳生长间存在显著负相关关系。由此可见,遮荫不仅显著降低了黄酮类化合物的积累,而且推迟了其积累高峰;而三萜的季节变异模式未受遮荫影响,但不同三萜单体对光照的响应存在差异。      

青钱柳离体胚的组织培养研究

以青钱柳离体胚为材料,采用正交试验设计方案对影响其萌发和成苗的4种因素进行了研究.结果表明:低温侣(4℃)层积有利于青钱柳离体胚的萌发.基本培养基种类是影响青钱柳离体胚萌发和生长的关键因素,低温层积后的离体胚适宜培养基组合为改良MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA0.5 mg/L、萌发率达97.5%,适宜成苗的培养基组合为改良MS+NAA0.5mg/L、成苗率达93.33%,而6-BA对离体胚成苗则有抑制作用.     

青钱柳叶中黄酮类化合物的地理变异

以青钱柳Cyclocarya paliurus 11个种源1年生苗的叶片为材料。研究青钱柳叶片中黄酮类化合物的地理变异．初步筛选出黄酮类化合物质量分数高的优良药用种源。黄酮类化合物各成分用液相色谱测定．数据采用方差分析、多重比较和相关分析等进行统计分析。结果表明：青钱柳叶中3种黄酮类化合物质量分数紧密相关．其中山奈酚质量分数高于槲皮素和异槲皮苷。研究的各种源中,安徽歙县和广西资源种源的黄酮类化合物的质量分数较高．分别为6．770和6．494mg·g^-1,安徽舒城种源的黄酮类化合物质量分数最低,仅为1．230mg·g^-1;以经纬度为自变量。各成分的质量分数为因变量进行趋势面分析,青钱柳叶中山奈酚质量分数呈经纬度双向变异．但其变化幅度随经度变化幅度不如纬度变化大,其表现出以108°E和27°N交叉区域为中心向东西递增、向南北递减的趋势．而槲皮素和异槲皮苷质量分数的变化没有明显的规律性。青钱柳黄酮类化合物较高的优良药用种源为安徽歙县和广西资源种源。图4表3参15     

不同种源青钱柳叶黄酮类物质含量的动态变化

通过对5个种源青钱柳叶片黄酮类物质生长期动态规律的分析,寻求最适宜的利用时期,并初步筛选优良种源.基于高效液相色谱分析数据,对其功能叶黄酮类物质含量进行统计分析.结果表明:不同月份黄酮类物质含量差异显著,湖南江华和江西庐山种源的最佳采收期为7月,其他种源为10月;不同种源间黄酮类物质含量变异极显著,初步筛选出江华和庐山...     

栽培基质对一年生青钱柳苗生长的影响

为研究不同栽培基质对青钱柳生长的影响,将青钱柳一年生苗分别种植在园艺营养土、红土、品氏泥炭土等三种栽培基质中,测定其长势、成熟叶产量、叶片化学成分相关指标。结果表明,三种栽培基质对青钱柳株高、地径增长的影响在时间先后上具有区别,但总体增长没有显著差异;红土栽培的青钱柳主干节间距最大;园艺营养土栽培的青钱柳叶片鲜重干重显著高于另两种,并具有最高的叶绿素含量,但导致最低的总黄酮含量。     

青钱柳营养器官总黄酮含量测定及分布规律研究

对不同海拔、不同产地、不同生长月份的青钱柳营养器官中的总黄酮含量进行测定和分析,结果表明:青钱柳的根和茎总黄酮含量都随着海拔的升高呈先升后降之势,均以海拔690 m的含量最高,分别为67.818 4 mg/g、51.254 7 mg/g,叶中总黄酮含量随着海拔的升高呈锯齿形变化,以海拔915 m的含量最高,为46.930 2 mg/g,各营养器官总黄酮含量与海拔的相关性都不显著;不同产地青钱柳根、叶中总黄酮含量差异较大,其中产于靖安的含量最高,根、叶含量分别为59.816 2 mg/g、44.676 1 mg/g,产于修水的含量最低,根、叶含量分别为51.574 5 mg/g、33.721 4 mg/g,不同产地青钱柳茎中总黄酮含量差异不显著;同一植株不同月份青钱柳叶总黄酮含量差异较大,但未发现无明显的变化规律性,其中以7月份含量最高,达到49.347 mg/g.     

青钱柳嫩枝扦插育苗的研究

以青钱柳当年生嫩枝为插穗,分别对不同的育苗基质、不同种类和浓度的生根剂及处理时间进行青钱柳插条生根效应的研究。试验结果表明:扦插时间以5月中旬至6月中旬为最佳时间;扦插基质以蛭石 珍珠岩最合适;生根剂以SJc l对青钱柳扦插苗生根有明显的促进作用,SJc l浓度为250 mg/L,浸泡时间3 h时生根率达最高,生根率为45.6%;健壮当年生的半木质化枝条是青钱柳理想的扦插材料。     

青钱柳嫩枝扦插影响因素的研究

[目的]研究影响青钱柳嫩枝扦插成活率的基本条件,为青钱柳扩繁技术研究提供参考。[方法]以当年生青钱柳嫩枝为插穗,研究不同基质、不同留节数、不同生根剂和茎段类型等因素对其扦插生根的影响。[结果]以蛭石∶珍珠岩（1∶1）为扦插基质,比其他4种基质更能促进青钱柳嫩枝生根,蛭石为扦插基质时效果其次 不同的插穗留节数相比,单节比多节的生根率高了15% 正交设计试验最优结果为：300 mg/L GGR处理1 h后插于蛭石∶珍珠岩（1∶1）的基质中,生根率可达56%。[结论]基质类型对青钱柳嫩枝扦插影响最为明显,其次为生根剂处理的时间和生根剂的种类。     

几种生根剂对青钱柳扦插育苗作用的研究

用GGR6号和SJCL生根剂,IAA(吲哚乙酸)和NAA(萘乙酸)植物激素分别处理青钱柳插穗进行扦插育苗试验,结果表明:在对青钱柳扦插育苗试验中,生根剂SJCL浓度500 mg/L、浸泡时间0.5 h的组合效果为佳,生根率最高为64.57%;不同生根剂和植物激素对扦插苗生根数、根长的影响达到极显著水平;用SJCL生根剂处理的扦插苗在生根数上较IAA和NAA明显提高,用GGR6处理的扦插苗在根长上较IAA和NAA植物激素明显提高。