均匀正交设计在百合组织培养中的应用

利用UL9(34)均匀正交设计分析比较了2,4-D,NAA,BA 3种激素浓度及其组合对百合愈伤组织诱导增殖的影响.经直观分析、方差分析和多重比较进行综合评价,确定百合愈伤组织诱导的最优培养基为MS+2,4-D 0.1mg/L+NAA 1 mg/L+BA 0.1 mg/L;百合愈伤组织增殖的最优培养基为MS+2,4-D 0.1 mg/L+NAA0.1 mg/L+BA 0.5 mg/L.     

红姬凤梨离体培养植株再生关键技术研究

[目的]建立红姬凤梨组织培养快繁体系。[方法]以MS培养基为基本培养基添加植物生长调节剂,对红姬凤梨叶片进行愈伤组织诱导,并进行芽分化、芽的继代增殖和生根培养。[结果]叶鞘愈伤组织诱导以MS＋2,4-D0．5mg／L＋BA3．0mg／L＋KT2．0mg／L培养基最好、愈伤组织诱导率和分化率分别达82．4％和40．2％;丛生芽诱导以MS＋2,4-D0．2MG/L＋NAA0．05mg／L＋BA3．0mg／L＋KT2．0mg／L培养基增殖效果最佳,增殖倍数迭9．72;生根诱导以1／2MS＋NAA3．0mg/L培养基诱导生根效果最好,平均每株生根12．12条。[结论]采用组织培养可有效去除病毒,增加繁殖系数。     

西伯利亚百合鳞片组织培养和快速繁殖研究

用西伯利亚百合的鳞片为试材,采用正交试验法,进行了最佳诱导培养基和最佳增殖培养基筛选。结果表明,西伯利亚百合鳞片最佳诱导培养基为MS＋6-BA2．0mg／L＋2,4-D0．1mg／L＋NAA0．3mg／L;最佳增殖培养基为MS＋6-BA2．0mg／L＋2,4-D0．1mg／L＋NAA0．5mg／L。     

唐菖蒲球茎芽高频再生体系的建立

将带芽的唐菖蒲子球茎切块接种在附加2,4-D3．0mg／L的MS基本培养基上诱导愈伤组织的发生。愈伤组织转至MS＋6-BA0．5mg／L＋NAA0．1mg／L诱导芽的分化。丛生芽继代增殖在MS＋6-BA0．5mg／L＋NAA0．1mg／L上,增殖系数最高。生根培养以1／2MS＋NAA0．1mg／L效果最佳。     

文冠果细胞悬浮培养技术研究

[目的]建立文冠果体细胞胚胎发生和快速成苗的悬浮培养体系,为文冠果的产业化和规模化发展提供参考。[方法]以文冠果新旧种子为材料,诱导体胚发生,进行文冠果细胞悬浮培养。[结果]适合胚性愈伤诱导的最佳培养基为MS＋6-BA1．0mg／L＋NAA0．5mg／L＋2,4-D0．5mg／L＋3％蔗糖;适合胚性愈伤组织不定芽诱导培养的最佳诱导培养基为MS＋6一BA1．0mg／L．4-NAA1．0mg／L＋3％蔗糖,且萌芽率最高;适合单细胞团再生植株培养的最佳培养基为MS＋6-BA0．5mg／L＋NAA0．2mg／L＋3％蔗糖。[结论]NAA和2,4-D混合使用有利于胚性愈伤组织的形成;一定浓度的NAA对文冠果愈伤组织萌芽培养有较大的促进作用。     

激素对也门铁叶片愈伤组织的诱导效果

[目的]寻求诱导也门铁叶片愈伤组织的最佳激素配方。[方法]以也门铁无菌苗叶片为外植体,以MS为基本培养基,分别添加不同浓度的2,4-D、BA和NAA,配制成24种激素组合,通过离体组织培养,探讨不同激素配比对也门铁叶片愈伤组织的诱导效果。[结果]当NAA为0 mg/L,2,4-D与BA 2种激素以不同浓度组合,在2,4-D浓度是BA浓度的1.0~1.5倍时,也门铁愈伤组织诱导效率较高,但质量较差。当2,4-D为0 mg/L时,BA与NAA 2种激素组合的诱导率为0。当2,4-D、NAA与BA 3种激素组合且2,4-D与NAA的浓度比值为1时,也门铁愈伤组织的诱导时间短,愈伤组织质量较好。也门铁叶片愈伤组织诱导的最佳培养基配方是MS＋0.5 mg/L2,4-D＋0.5 mg/L NAA＋1.0 mg/L BA,诱导率为44.4%。[结论]该研究为探索高效的也门铁组培快繁新方法提供科学依据。     

索拉亚百合茎尖组织培养研究

以索拉亚百合的茎尖为外植体，成功建立了快速无性繁殖体系。茎尖愈伤组织诱导培养基为：MS BA3mg／L NAA0．3mg／L；愈伤组织最佳芽分化诱导培养基为：MS BA1．5mg／L NAA0．5mg／L；芽继代增殖的最佳培养基为MS BA1．5mg／L IBA0．05mg／L。KT对芽的增殖效果不如BA，IBA的效果明显好于IAA。此外，激素的比例对不定芽的生长也有影响，最关键的因素是IBA的使用浓度，以0．05mg／L左右为宜。生根培养基为：MS IAA0．5mg／L NAA0．5mg／L AC1mg／L生根率达100％，平均生根数为5．88/苗。移栽成活率可达95％。     

培养基与植物生长调节剂对牡丹叶片愈伤组织诱导的影响

以牡丹“凤丹”种子无菌组培苗的幼叶为材料,研究培养基与植物生长调节剂对其叶片愈伤组织诱导的影响。结果表明：改良MS培养基为牡丹叶片愈伤组织诱导的最佳培养基,在未添加任何植物生长调节剂时无法诱导出愈伤组织,单独添加生长素或细胞分裂素均能诱导出愈伤组织,但诱导率有差异,最佳的生长素是2,4-D0．2mg／L,最佳的细胞分裂素是TDZ2．0mg／L。用2,4-D,NAA,TDZ正交试验得到最佳组合为改良MS＋2,4-D0．2mg／L＋NAA0．2mg／L＋TDZ3．0mg／L,愈伤诱导率高达87．8％。     

人参组织培养的多因子正交试验研究

采用L9(34)正交设计分析比较了2.4-D,BA,NAA,KT 4种激素浓度及其组合对人参组织培养的影响。经直观分析、方差分析和多重比较进行综合评价,确定人参愈伤组织诱导的最优培养基为MS 2.4-D3 mg/L BA 0.5 mg/L NAA 0.5 mg/L KT 0.5 mg/L,人参愈伤组织生长的最优培养基为MS 2.4-D 3 mg/L KT 1 mg/L,人参不定芽发生的最优培养基为MS BA 1 mg/L。     

红花长寿花愈伤组织的诱导和植株再生研究

试验采用红花长寿花茎段和叶片作为外植体,在附加不同植物激素组合的培养基中对愈伤组织的诱导和植株再生进行研究。结果表明:不带叶柄的叶片在MS 2,4-D1.0mg/L BA0.5mg/L的培养基上对愈伤组织的诱导和增殖效果最好;在MS BA0.25mg/L 2,4-D1.5mg/L GA0.6mg/L的培养基上有利于愈伤组织转绿分化;在MS NAA0.25mg/L BA1.5mg/L GA0.6mg/L的培养基上有利于丛生芽诱导和增殖;在1/2MS NAA0.3mg/L IBA0.7mg/L培养基中生根效果最好。     

非洲菊花瓣的离体培养

试验以不同花色非洲菊的花瓣为材料 ,在添加不同浓度的 2 ,4-D和 6-BA的培养基上进行愈伤组织诱导和芽的分化。结果表明 :不同花色愈伤组织的诱导率存在差别 ;不同浓度的 2 ,4-D和BA对愈伤组织的诱导和分化的效果明显不同 ,2 ,4-D和BA浓度过高对诱导和分化均有抑制作用 ;诱导花瓣形成愈伤组织的最佳培养基为MS +2 ,4-D 2 .0mg/L +NAA 0 .2mg/L +BA0 .1mg/L ,花瓣不定芽分化的最佳培养基为MS +BA 8.0mg/L +NAA 0 .1mg/L。     

除虫菊愈伤组织诱导研究

以除虫菊种子获得的无菌苗的不同器官为外植体,研究几种基本培养基及NAA、2,4-D或其与BA、KT的组合对愈伤组织的诱导效果,结果表明：不同类型基本培养基中MS有利于子叶、真叶和下胚轴,White有利于根愈伤组织的诱导和生长。不论除虫菊的哪一部分作为外植体,培养基pH值均为5.8较为合适。不同器官外植体诱导愈伤组织的最适植物生长调节剂组合不同,子叶为1.0 mg/L 2,4-D＋0.5 mg/L KT,真叶为1.0-2.0 mg/L 2,4-D＋0.5 mg/LKT,根为0.5 mg/L 2,4-D＋0.5 mg/L BA或KT,而下胚轴在1.0-2.0mg/L 2,4-D＋0.5 mg/L BA,0.5-1.0 mg/L 2,4-D＋0.5 mg/L KT,1.0 mg/L NAA＋0.5 mg/L BA,0.5mg/L NAA＋0.5 mg/L KT,0.5 mg/L 2,4-D＋0.5 mg/L BA或KT均可100%诱导愈伤组织。     

天蓝刺头组织培养及无性系建立

以生长旺盛的天蓝刺头生长点为外植体,以附加不同浓度的BA、IAA、IBA、NAA、2,4-D、GA的1/2 MS或1/3 MS为培养基,进行了天蓝刺头生长点生长、不定芽分化、试管苗生根、试管苗移栽与扦插和试管苗移植的研究.结果表明:1/2MS+BA 0.2 mg/L+NAA 0.1 mg/L是芽生长的理想培养基;1/2MS+AgNO31.2 mg/L+BA 0.9 mg/L+NAA 0.1 mg/L是天蓝刺头分化培养的理想培养基;1/3MS+IAA 0.3 mg/L是天蓝刺头试管苗生根培养的理想培养基;炉灰渣和河沙是试管苗移栽和扦插的理想基质;移植于山坡上的试管苗生长旺盛,根系发达.     

甘农2号杂花苜蓿愈伤组织诱导及体细胞胚和芽分化的研究

以甘农2号杂花苜蓿下胚轴为材料,MS为基本培养基,研究了不同浓度的2,4-D、NAA、KT、BA、蔗糖及2,4-D作用时间对甘农2号杂花苜蓿愈伤组织的诱导、体细胞胚和芽分化的影响.结果表明,3 mg/L 2,4-D+1.5 mg/L NAA为愈伤组织诱导阶段最佳激素组合;2,4-D作用时间以15 d为宜;最佳的芽分化培养基为MS+0.5 mg/L KT+0.1 mg/L NAA+7 g/L琼脂+20 g/L蔗糖.     

激素对杜仲幼茎愈伤组织诱导及生长的影响

以MS为基本培养基,添加不同浓度的2,4-D,NAA,IBA,BA,KT或其组合,研究杜仲嫩茎愈伤组织的诱导及生长情况。结果表明,3种生长素均可100%诱导出愈伤组织,以0.5mg/L2,4-D,0.5～1.0mg/LNAA,1.0mg/LIBA效果较好;2,4-D和BA及KT的组合均不利于愈伤组织诱导,低浓度的BA与NAA和IBA组合能促进愈伤组织的诱导和生长,其中1.0mg/LNAA+0.3～0.5mg/LBA,1.0mg/LIBA+0.5mg/LBA诱导出的愈伤组织生长旺盛,富有光泽,适合进一步继代培养,而高浓度则起抑制作用;KT的加入对愈伤组织的诱导及生长均起抑制作用。     

黄山药愈伤组织的诱导与分化

研究黄山药愈伤组织形成、器官分化和植株再生,结果表明:叶片是诱导黄山药愈伤组织的最佳外植体;含2,4-D2.0 mg/L和BA2.0 mg/L的培养基对愈伤组织诱导效果最好;大多数愈伤组织在含有1.0 mg/LBA、0.5 mg/L NAA和2%蔗糖的培养基(pH值6.4)中能诱导出芽;含有0.5 mg/LBA、0.1 mg/L NAA和3%蔗糖的MS培养基(pH值6.8)能诱导大多数转接芽中根的形成。     

黄芩(Scutellaria baicalensis Georgi)的组织培养快速繁殖

【目的】建立黄芩(Scutellaria baicalensis Georgi)的组织培养快速繁殖体系。【方法】以黄芩的幼茎、幼叶及叶柄为外植体,在MS培养基上添加不同质量浓度的6-BA、2,4-D与NAA诱导愈伤组织及再生芽;在1/2 MS培养基上添加IAA、IBA或NAA激素,单独或者组合使用,诱导黄芩试管苗生根。【结果】幼叶和叶柄容易褐化死亡,而幼茎显示很好的脱分化和再分化效果;BA与NAA组合可以诱导幼茎外植体脱分化与再分化,而BA与2,4-D组合只能诱导愈伤组织发生。IAA诱导生根率最高,但是茎基部会形成愈伤组织,后期无法驯化成活;IBA及NAA均可以诱导根的发生,但是以IBA效果为佳。【结论】幼茎为最佳外植体,MS+BA0.5mg/L+NAA 0.5mg/L为最佳的愈伤组织诱导及再生芽的分化培养基。1/2MS+IBA 0.1mg/L为最佳的试管苗生根培养基,生根率为70.3%。     

花蔺无性系建立的研究

以花蔺根茎为材料,进行了愈伤组织的诱导和继代、不定芽分化、试管苗生根、移栽定植的研究,建立起根茎无性系。结果表明：根茎愈伤组织诱导培养和继代培养的理想培养基是MS＋BA 0.5 mg/L＋2,4-D2.0 mg/L;愈伤组织颗粒团分化培养的理想培养基是MS＋BA0.5~1.0 mg/L＋NAA0.1 mg/L;试管苗生根培养的理想培养基是1/2 MS＋NAA0.1 mg/L＋IAA0.2 mg/L。试管苗定植容易成活,且长势旺盛,并保持了野生植株的所有生物性状。     

野生豆瓣菜嫩茎无性系建立的研究

以野生豆瓣菜的嫩茎为外植体,在附加不同浓度的BA、IAA、NAA和2,4-D的MS培养基上进行离体培养。结果表明:诱导豆瓣菜的嫩茎形成愈伤组织的最佳培养基为MS+BA0.5 mg/L+2,4-D1.5 mg/L;诱导愈伤组织分化的最佳培养基为MS+BA0.5 mg/L;分化不定苗生根的理想培养基是1/2MS+IAA 0.2 mg/L;试管苗移栽和扦插的最佳基质是炉灰渣;地栽试管苗具有较抗寒、抗逆性强的特点。