人参的组织培养及快繁体系的建立

[目的]建立人参的快繁体系。[方法]应用MS培养基添加激素培养法,对人参的茎尖、根尖和幼芽进行愈伤组织诱导,并进行芽分化、芽的继代增殖和生根培养。[结果]结果表明,对诱导芽分化较好的培养基是BA与NAA的组合,最佳培养基激素浓度是MS+BA2.0 mg/L+NAA0.5 mg/L。愈伤组织诱导仅出现在MS+BA1.0 mg/L+2,4-D2.0 mg/L和MS+KT0.2 mg/L+2,4-D1.0 mg/L的培养基中,但这两种培养基对芽没有诱导。以MS+BA2.0 mg/L+NAA0.5 mg/L的培养基,其继代培养效果较好。[结论]采用组织培养快速繁殖人参,可有效去除病毒,增加繁殖数,确保遗传性状的稳定。     

灯盏花组培快繁与植株再生

[目的]建立较为系统的灯盏花组培体系,培育、壮大和发展灯盏花这一独具特色和优势的产业。[方法]以灯盏花（Erigeron breviscapus）的叶片为外植体,用不同浓度的激素6-BA、2,4-D、KT和NAA对其进行愈伤组织的诱导和再生植株的研究。[结果]诱导愈伤组织最佳的培养基是MS＋KT0．5mg／L＋2,4-D10mg／L和MS＋2,4-D0．5mg／L＋6-BA0．5mg／L,诱导率为100％;二者相比,前者长出的愈伤组织较为紧密,而后者松散性好;MS＋6-BA0．5mg／L＋10％香蕉汁是诱导芽最佳的培养基,达87％;加入0．3mg／L NAA的1／2MS培养基对生根最有利,生根率达83％。[结论]生长素与细胞分裂素的合理配比有利于快速构建灯盏花培养体系。     

唐菖蒲球茎芽高频再生体系的建立

将带芽的唐菖蒲子球茎切块接种在附加2,4-D3．0mg／L的MS基本培养基上诱导愈伤组织的发生。愈伤组织转至MS＋6-BA0．5mg／L＋NAA0．1mg／L诱导芽的分化。丛生芽继代增殖在MS＋6-BA0．5mg／L＋NAA0．1mg／L上,增殖系数最高。生根培养以1／2MS＋NAA0．1mg／L效果最佳。     

菊苣组织培养及无性系建立的研究

以具有有利变异性状的菊苣叶柄为材料,进行了组织培养及无性系建立的研究。结果证明：MS＋BA0．4mg／L＋2,4-D丁酯1．6mg／L是诱导叶柄形成具有分化能力愈伤组织的理想培养基：1／2MS＋AgNO3 20．5mg／L＋BA0．3mg／L＋NAA0．1mg／L是愈伤组织和不定芽分化的理想培养基;1／3MS＋IAA0．2～0．4mg／L是变异菊苣不定芽生根的理想培养基;炉灰渣是菊苣试管苗移栽的理想基质。     

荷兰月季快繁技术研究

[目的]探讨荷兰月季快速繁殖技术。[方法]以荷兰月季一年生枝条为试材,以MS为基本培养基,添加不同浓度激素,组配成具有不同激素组合的12种培养基,研究不同浓度的激素组合对无菌芽诱导、丛生芽增殖、成愈率、分化率及生根的影响,筛选出适合无菌芽诱导、丛生芽增殖和诱导愈伤的培养基和适合愈伤分化的培养基。[结果]在12种培养基中,适合无菌芽诱导的培养基为MS＋BA1．0mg／LBA＋0．2mg／LNAA,腋芽诱导率最高达68．0％;适合丛生芽增殖培养基为MS＋1．0mg/L BA＋0．1mg/L NAA,增殖倍数为3．6倍;适合产愈培养基为MS＋3．0mg／LBA＋0．2mg／L NAA,产愈率最高达41．6％;适合分化培养基为MS＋2．0mg／LBA＋0．2mg/L NAA,分化率最高为21．1％;适合生根培养基为MS＋0．1mg／L NAA＋2．0g／L活性炭,小苗移载成活率高达90％以上。[结论]该研究为实现荷兰月季工厂化育苗奠定了基础。     

柳枝稷的组织培养技术研究

[目的]探索柳枝稷的不同组培条件,优化其诱导和分化培养基。[方法]以柳枝稷幼穗为外植体进行组织培养获得组培苗,建立相应的植株再生系统。[结果]愈伤组织诱导培养基为MS＋5．00mg／L2,4-D＋0．15mg／L6．BA＋3．00％蔗糖＋0．75％琼脂;继代与增殖培养基为MS＋4．00mg／L2,4-D＋3．00％蔗糖＋0．75％琼脂;分化培养基为MS＋0．2mg／L KT＋3．00％蔗糖＋0．75％琼脂;生根培养基为1／2MS＋0．80％蔗糖＋0．70％琼脂。愈伤组织诱导和继代培养阶段培养温度为24℃,在分化和生根培养阶段培养温度为28℃。幼穗外植体的出愈率达95％,愈伤组织增殖率在800％-1000％以上,分化率达80％以上,生根率在98％以上。经炼苗后,获得的组培苗的移栽成活率达95％以上。[结论]采用优化激素搭配的培养基可得到高效的诱导率、分化率和生根率。     

观赏茄花药离体培养研究

以观赏茄品种“金蛋”为材料，通过花药愈伤组织的诱导、分化和不定芽的生根培养，获得了一定数量的单倍体植株。结果表明，以MS为基本培养基诱导花药愈伤时，2，4-D的添加是必须的，KT的附加对愈伤的诱导有促进作用。最适愈伤诱导培养基为MS 2,4-D 0．5mg／L KT 0．25mg／L LH 1000mg／L Gln 500mg／L，诱导不定芽分化最佳培养基为MS ZT 1．0mg／L NAA 0．005mg／L GA3 0．5mg／L LH 1000mg／L；随后将产生的不定芽转到1／2MS附加NAA 0～0．005mg／L、蔗糖20g／L的生根培养基中生根良好，移栽存活率达90％以上。     

文冠果细胞悬浮培养技术研究

[目的]建立文冠果体细胞胚胎发生和快速成苗的悬浮培养体系,为文冠果的产业化和规模化发展提供参考。[方法]以文冠果新旧种子为材料,诱导体胚发生,进行文冠果细胞悬浮培养。[结果]适合胚性愈伤诱导的最佳培养基为MS＋6-BA1．0mg／L＋NAA0．5mg／L＋2,4-D0．5mg／L＋3％蔗糖;适合胚性愈伤组织不定芽诱导培养的最佳诱导培养基为MS＋6一BA1．0mg／L．4-NAA1．0mg／L＋3％蔗糖,且萌芽率最高;适合单细胞团再生植株培养的最佳培养基为MS＋6-BA0．5mg／L＋NAA0．2mg／L＋3％蔗糖。[结论]NAA和2,4-D混合使用有利于胚性愈伤组织的形成;一定浓度的NAA对文冠果愈伤组织萌芽培养有较大的促进作用。     

地锦组织培养及无性系建立研究

以生长旺盛的地锦嫩茎为材料,进行了愈伤组织的诱导和分化、不定芽的分化及试管苗的生根、移栽、扦插和移植的研究。结果证明：MS＋BA0．4～0．6mg／L＋2,4-D1．5～2．0mg／L是诱导嫩茎形成具有分化能力愈伤组织的理想培养基;MS＋AgNO3 0．8mg／L＋BA 0．6mg／L＋NAA 0．1mg／L是诱导愈伤组织分化培养的理想培养基;B5＋BA 0．5mg／L＋NAA 0．1mg／L是不定芽分化培养的理想培养基;B5＋IAA 0．2mg／L＋NAA 0．1mg／L是试管苗生根继代培养的理想培养基;移植的试管苗具有生长旺盛整齐、根系发达、开花结果时间推迟15d左右的特点。     

瑞昌山药组培快繁研究

[目的]探讨瑞昌山药组培快繁的技术环节。[方法]以瑞昌山药茎段为外植体,通过组织培养试验研究了不同激素及其浓度对愈伤组织形成、丛生芽诱导和生根的影响。[结果]70％乙醇和0．1％HgCl2结合对外植体的的消毒效果最佳。培养基Ms＋6-BA2．0mg／L＋NAA0．2mg／L中的腋芽生长最好,培养基MS＋6一BA1．0mg／L＋NAA0．2mg／L、MS＋6一BA1．0mg／L-I-NAA0．5mg／L、MS＋6一BA2．0mg／L＋NAA0．2mg／L和MS＋6一BA2．0mg／L-I-NAA0．5mg／L中腋芽的诱导率分别为52％、43％、84％和48％。在继代培养中,采用原诱导培养基诱导丛生芽的效果较差,降低6一BA的浓度有利于丛生芽的诱导。培养基1／2MS＋IBA1．5mg／L＋NAA0．3mg／L4-活性炭0．2mg／L中幼苗的生根效果较好。[结论]该研究为组织培养技术在种苗繁育中的应用奠定了基础。     

不同浓度的激素组合对猕猴桃愈伤组织诱导及芽分化的影响

[目的]寻求代替ZT提高猕猴桃愈伤组织诱导及芽分化的最佳激素组合。[方法]以美味猕猴桃离体茎段为外植体,以MS为基本培养基,附加2,4-D0.5、1、2.0mg/L和NAA0.1、0.3、0.5mg/L与6-BA0.5mg/L分别组成诱导愈伤组织的6个激素组合,并以同样浓度的2,4-D和NAA与6-BA1.0mg/L分别组成分化芽的6个组合激素,研究不同浓度的激素组合对猕猴桃愈伤组织诱导及芽分化的影响。[结果]6种不同浓度的激素组合对猕猴桃茎段愈伤组织均有一定的诱导作用,其中2,4-D1.0mg/L+6-BA0.5mg/L的组合有利于愈伤组织诱导,诱导率达86.1%;绿色愈伤组织在MS培养基附加激素2,4-D+6-BA组合中芽的分化率很低,而在附加NAA+6-BA组合中芽的分化率较高,其中,NAA0.1mg/L+6-BA1.0mg/L的组合有利于芽分化,芽分化率为75.2%。[结论]2,4-D与6-BA组合对猕猴桃绿色愈伤组织的芽分化有一定抑制作用。     

红掌组织培养再生体系的建立研究

[目的]建立红掌的组织培养再生体系。[方法]以红掌幼嫩叶柄为材料,筛选红掌愈伤组织诱导、不定芽分化、生根时的最佳激素配比。[结果]红掌叶柄愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L 2,4-D,此时愈伤组织诱导率可达80.0%;不定芽分化的最佳培养基为MS+1.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L 2,4-D+1.5 mg/L KT,此时分化率可达96.7%;生根的最佳培养基为MS+1.0mg/L IBA,此时生根率可达86.7%。[结论]为红掌的快速繁殖提供了技术依据。     

亳菊叶片组织培养技术优化的研究

[目的]研究不同植物生长物质对诱导亳菊叶片愈伤组织诱导和不定芽分化的影响。[方法]以亳菊组培苗的叶片作为外植体,使用正接和背接2种方式接种于正交设计的培养基中,诱导叶片形成愈伤组织;再将愈伤组织接种于新配制的培养基中,对愈伤组织诱导率和芽分化率进行方差和极差分析。[结果]诱导亳菊叶片形成愈伤组织最佳的培养基组合为MS＋2.0 mg/L 2,4-D＋2.0 mg/L 6-BA＋0.2 mg/L NAA;诱导愈伤组织分化成不定芽的最佳培养基是MS＋2.0 mg/L 6-BA＋0.5 mg/LNAA。[结论]为亳菊的遗传转化体系构建和诱变育种提供了高效的操作系统。     

濒危药材金线莲愈伤组织诱导及分化成苗研究

[目的]建立有效的濒危药材金线莲的再生体系,为其工厂化生产奠定技术基础。[方法]选取福建金线莲的叶片、茎片、带节茎段、不定芽为外植体,建立无菌体系,而后以愈伤组织的诱导率为指标,采用正交设计优化不同外植体各阶段(愈伤组织的诱导和分化)培养基中激素的种类及浓度。[结果]在试验的福建金线莲4种外植体中,不定芽的愈伤组织诱导率最高,可达96.67%,其最适培养基配方为MS+0.5 mg/L NAA+4.0 mg/L BA+0.3 mg/L KT。在此培养基上,诱导的愈伤组织在分化培养基MS+0.5 mg/L NAA+2.0 mg/L BA和增殖培养基MS+0.2 mg/L NAA+2.0 mg/L BA上继代形成了无根试管苗。[结论]该研究建立的无菌繁殖体系,解决了前人所指出的金线莲愈伤组织诱导率极低的瓶颈问题,组培成苗的效率有较大提高。     

仙茅地下茎段组织培养研究

[目的]为仙茅的快速繁殖提供借鉴和依据。[方法]以仙茅无菌地下茎段为外植体,在蔗糖浓度为20 g/L,琼脂用量为6.5 g/L,pH值为5.8,温度为25℃的光照条件下,设3组培养基（A愈伤组织诱导培养基MS＋6-BA 0-1.0 mg/L＋NAA 0-1.0 mg/L,B丛生芽诱导培养基MS＋6-BA 0.5-1.5 mg/L＋NAA 0.2-0.8 mg/L,C生根培养基MS＋IAA 0-0.5 mg/L）进行组培试验。[结果]最适合仙茅的愈伤组织诱导培养基为MS＋6-BA 0.2-1.0 mg/L＋NAA 0.1-0.6 mg/L;丛生芽分化培养基为MS＋6-BA 0.8-1.5 mg/L＋NAA0.2-0.5 mg/L;生根培养基为MS＋IAA 0.1-0.3 mg/L。仙茅的愈伤组织诱导率为88%-93%,丛生芽诱导率为93%-96%,生根诱导率为92%-96%。[结论]该研究为仙茅地下茎段的组织培养提供了试验参考和理论依据。     

红菇娘和紫菇娘的组织培养与繁殖

[目的]筛选野生红菇娘(Calyx seu Fructus Physalis)和紫菇娘(Physalis tungkenensis Kuan et Gao)组织培养的最佳培养基。[方法]分别以2种植物的茎、叶为外植体,比较不同取样方式、不同增殖条件及不同生根条件对2种植物组织培养和快速繁殖的影响。[结果]以MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.04 mg/L为最适合红菇娘愈伤组织诱导和分化的培养基,而紫菇娘是MS+6-BA 3.0 mg/L和NAA0.03 mg/L,培养14 d后每个愈伤组织能产生3~5个不定芽。继代和生根培养后,丛生芽的成活率为90%以上。[结论]该研究可为2种酸浆属野生种质资源保存和优质种苗生产提供技术参考。     

玉露的离体培养与快繁研究

【目的】为快速繁殖玉露优良品种,筛选出玉露最佳繁殖方法。【方法】以玉露叶片为外植体,采用不同消毒时间、不同浓度的培养基进行离体培养。【结果】最佳启动培养基为MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.6mg/L,愈伤组织诱导培养基MS+6-BA 0.5mg/L+NAA 0.01mg/L,愈伤组织诱导率达82.3%,分化培养基同诱导培养基,丛芽分化率达44.3%,生根培养基为1/2MS+NAA 1 mg/L+AC 0.5g/L,生根率达98.5%,经炼苗成活率高达91%以上。【结论】该研究为玉露离体培养技术研究提供技术支撑。     

蓬莪术的离体快繁研究

[目的]探索蓬莪术的离体快繁技术。[方法]以蓬莪术嫩叶、块茎和根为外植体,接种在以MS为基本培养基,外加不同浓度激素组合的培养基上进行愈伤组织诱导、增殖和分化培养;以幼芽为外植体,进行幼芽的增殖、生根培养和移栽等。[结果]诱导蓬莪术叶、块茎和根的愈伤组织形成的最适培养基为MS＋2,4-D1.0 mg/L＋6-BA0.5～1.0 mg/L＋NAA0.3 mg/L,其中蓬莪术叶诱导率最高,达96%;愈伤组织增殖和分化培养还有待进一步研究。幼芽最适增殖培养基为MS＋6-BA3.0 mg/L＋NAA0.1 mg/L＋KT1.0 mg/L,其增殖倍数达3.5以上;而生根培养基以1/2 MS＋NAA1.0 mg/L＋6-BA0.5 mg/L为最佳,生根率达100%,其移栽成活率达85%以上。[结论]该研究结果为蓬莪术的快速繁殖及工厂化生产奠定了基础。     

生姜芽的组培快繁

[目的]寻找生姜芽组培快繁的最佳方案。[方法]以MS为基础培养基,设计生姜芽组培快繁的两条途径,选择生姜芽组培快繁的最佳培养基配方。[结果]结果表明,茎尖→芽最适培养基为:改良MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L;茎尖→愈伤组织→芽,茎尖诱导愈伤组织的最适培养基为:改良MS+2,4-D 2.0 mg/L+KT 1.0 mg/L,愈伤组织诱导芽分化的最适培养基为:改良MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L。采用超净工作台上用75.0%酒精30 s+10.0%NaClO 15 min+0.1%HgCl210 min+50 ug/L青霉素与台外消毒相结合对外植体进行表面消毒,去污效果最佳。[结论]对愈伤组织进行切割并继代培养后再诱导芽分化,可获得较大的增殖倍数。