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变性梯度凝胶电泳(DGGE)技术目前已被广泛应用于环境微生物领域。介绍了DGGE的基本原理和技术步骤,分析了该方法的主要影响因素及其优点和存在的问题;概述了PCR-DGGE技术在环境微生物领域,包括在微生物处理技术、微生物生态多样性研究和功能菌种优化筛选中的应用现状,并展望了其应用前景。 相似文献
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结合笔者等多年积累的经验详细介绍环境微生物学研究中变性梯度凝胶电泳(DGGE)技术应用全步骤:从环境样品中直接提取总DNA,利用5′端含GC夹子的引物PCR 16S rDNA的部分片段,将PCR产物在含有浓度线形递增的变性剂的聚丙烯酰胺凝胶中进行电泳分析,使不同来源的DNA片段在电泳胶中分离,从胶中切出分离的DNA片段测定碱基序列,进行分类分析。PCR-DGGE技术能够检测不可培养的微生物基因,而DGGE技术与克隆等其他技术结合更能发挥其分离作用。 相似文献
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分子技术的快速发展,特别是PCR-DGGE技术的出现,给水产品养殖、微生物研究带来了新的发展方向,这种技术主要用于水产品保存条件和食谱分析。本文根据PCR-DGGE的技术优点、原理,对水产养殖中PCR-DGGE技术的运用进行分析。 相似文献
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PCR-DGGE技术用于猪场沼气池细菌群落分析的条件优化 总被引:2,自引:0,他引:2
本研究采用变性梯度凝胶电泳(PCR-DGGE)技术研究猪场沼气池细菌群落,对基于16S rDNA V3区的PCR-DGGE电泳的最佳变性剂梯度范围、电泳时间、染色时间进行优化.研究结果表明,最佳变性剂梯度范围为35%~60%,电泳时间为12 h,SYBR(R)Green Fluorescent Dye染料的染色时间是30 min,优化后的PCR-DGGE确保了实验的准确性、灵敏度和可重复性.运用此优化后的PCR-DGGE技术对5个猪场沼液细菌群落进行了研究,获得了较丰富的多样性.该实验为深入研究畜禽养殖粪污治理的菌种筛选奠定了基础. 相似文献
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变性梯度凝胶电泳在环境微生物学中是一种被普遍接受的研究方法,在环境微生物多种领域中被广泛运用.本文主要从水体、土壤以及作物不同体系,综述了变性梯度凝胶电泳技术在环境微生物生态中的应用. 相似文献
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立足应用型高校人才培养实际,以徐州工程学院国家级“卓越计划”实施专业食品科学与工程专业微生物学教学改革实践为基础,讨论了开展面向“卓越工程师”培养的微生物学教学改革措施,以为相关课程的改革提供参考. 相似文献
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《食品微生物》情境教学法的实践与探索 总被引:1,自引:0,他引:1
情景教学法建立在建构主义学习理论基础之上;食品微生物教学中通过实物演示、模拟、实验操作、多媒体运用、实地参观、想象情境、语言情境等,有利于学生对新知识的迁移,实现意义建构。 相似文献
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信息技术与食品微生物学的整合研究与实践 总被引:1,自引:0,他引:1
本文在总结多次开设农业和食品微生物学教学实践尝试,探讨在新的教育思想与教学理论的指导下,应用信息技术优势与农业和食品微生物学课程有效整合的新型教学模式、旨在提高教学效果的有益探索。 相似文献
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PCR-DGGE指纹技术与分离技术结合筛选藏灵菇奶发酵过程的优势菌 总被引:24,自引:1,他引:24
【目的】获得藏灵菇发酵奶发酵过程的优势菌,并开发出纯培养发酵剂替代藏灵菇进行这类新型发酵奶的工业化生产。【方法】将PCR-DGGE指纹技术和传统培养方法结合,对藏灵菇发酵奶中微生物种群结构进行研究。【结果】DGGE指纹图谱显示混合菌群中细菌有4条条带无对应的纯菌株,而纯菌株中有2株在混合菌群的图谱上没有相应的条带。通过对150株分离菌的PCR-DGGE指纹图谱分析,获得了8组乳酸菌和5组酵母菌,进一步的序列分析和相似性比较,确立了藏灵菇发酵奶中的优势菌为肠膜明串珠菌、乳酸乳球菌、开菲尔乳杆菌、干酪乳杆菌和克鲁维酵母,单孢酵母、啤酒酵母、假丝酵母发酵后期成为优势菌。【结论】本研究建立了一种基于分子生态的微生物高效筛选技术,为藏灵菇纯培养发酵剂的开发提供了理论依据及丰富的菌种资源。 相似文献
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根据学校特点和食品微生物学实验课程的需要,为培养学生实际操作能力、创新能力以及综合能力,从实验大纲、教学方式和考核方式几个方面提出了食品微生物学实验教学改革的思路和建议。 相似文献
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不同施肥处理对毛竹根际微生物影响及其PCR-DGGE分析 总被引:2,自引:0,他引:2
采用PCR-DGGE技术对不同施肥处理毛竹根际微生物多样性特征进行研究.结果表明:采用改进的蛋白酶K-CTAB法提取的毛竹土壤DNA经PCR扩增的产物经DGGE检测后得到的电泳条带清晰且分离效果好,可以明显反映出毛竹根际微生物多样性的变化.根际微生物种群组成特征受施肥量、肥料种类影响很大,施肥能够增加毛竹根际微生物的多... 相似文献