PCR-DGGE技术用于猪场沼气池细菌群落分析的条件优化

本研究采用变性梯度凝胶电泳（PCR-DGGE）技术研究猪场沼气池细菌群落,对基于16S rDNAV3区的PCR-DGGE电泳的最佳变性剂梯度范围、电泳时间、染色时间进行优化。研究结果表明,最佳变性剂梯度范围为35%～60%,电泳时间为12h,SYBR Green Fluorescent Dye染料的染色时间是30min,优化后的PCR-DGGE确保了实验的准确性、灵敏度和可重复性。运用此优化后的PCR-DGGE技术对5个猪场沼液细菌群落进行了研究,获得了较丰富的多样性。该实验为深入研究畜禽养殖粪污治理的菌种筛选奠定了基础。     

转基因疾病动物模型的研究进展

人类疾病动物模型(animalmodelsofhumandiseases)是为阐明人类疾病的发生机制或建立治疗方法而制作的、具有人类疾病模拟表现的实验动物。疾病动物模型对医学发展做出了很大贡献。但是,许多疾病难以用人工诱发的方法制造动物模型,或许多疾病在实验动物身上不发生或仅仅是高等哺乳类动物才发生,因此难以通过自发或人工定向培育的方法获得动物模型。转基因技术的出现,为人类精确地研究基因与疾病的相关关系提供了可能,而且可以在个体发生的每个阶段中使用任何个体进行遗传功能的分析。因此,转基因疾病动物模型的开发成为转基因动物的热点。文章就转基因疾病动物模型的建立制作及应用前景做一综述。     

原核表达牦牛朊蛋白的纯化及其活性测定

以原核表达的GST-BoPrP(23～242)融合蛋白为抗原,免疫BALB/C小鼠,制备抗牦牛朊蛋白的特异性抗血清。经Western blotting和间接ELISA鉴定,该抗血清可与牦牛重组成熟PrP(23～242)和牛脑组织提取物发生反应,蛋白酶K消化各抗原可消除免疫反应,但不与GST蛋白和E.coli BL21(DE3)的菌体蛋白发生反应,表明该抗血清为抗牦牛重组成熟PrP(23～242)的抗血清,其效价高达1∶12800,并能识别黄牛脑组织中的天然朊蛋白。原核表达的GST-BoPrP(23～242)融合蛋白能有效地刺激免疫动物产生PrP特异性抗体,所制备的抗血清可适用于天然朊蛋白的检测。     

PCR-DGGE技术用于猪场沼气池细菌群落分析的条件优化

本研究采用变性梯度凝胶电泳(PCR-DGGE)技术研究猪场沼气池细菌群落,对基于16S rDNA V3区的PCR-DGGE电泳的最佳变性剂梯度范围、电泳时间、染色时间进行优化.研究结果表明,最佳变性剂梯度范围为35%～60%,电泳时间为12 h,SYBR(R)Green Fluorescent Dye染料的染色时间是30 min,优化后的PCR-DGGE确保了实验的准确性、灵敏度和可重复性.运用此优化后的PCR-DGGE技术对5个猪场沼液细菌群落进行了研究,获得了较丰富的多样性.该实验为深入研究畜禽养殖粪污治理的菌种筛选奠定了基础.     

中国西南地区猪群中TTV分子流行病学调查

为了解西南地区猪群中Torque teno virus(TTV)感染流行情况,以TTV 5′非编码区(5′UTR)保守序列设计引物,建立了猪TTV检测的巢式PCR(nPCR)方法,并对该地区22个规模化养猪场363份血清进行了检测。结果表明,在被检血清样品中TTV1和TTV2感染率为79.6%、87.1%,两者的混合感染率为68.3%。证实TTV在西南地区猪群中广泛存在,提示人们应当重视防止TTV感染的进一步流行。     

保幼激素诱导尖唇散白蚁兵蚁分化的特征及其相关基因的表达谱

为明确保幼激素调控白蚁兵蚁分化的机理，以尖唇散白蚁Reticulitermes aculabialis为研究对象，用保幼激素Ⅲ及其类似物吡丙醚诱导其工蚁向兵蚁分化，并用荧光定量PCR技术对兵蚁分化过程中保幼激素信号相关基因的表达模式进行分析。结果显示，春、夏季节保幼激素Ⅲ和吡丙醚对尖唇散白蚁前兵蚁的诱导率和死亡率均高于秋、冬季节，如在春、夏季的诱导率最高达60.84%，死亡率最高为47.18%；而在秋、冬季的诱导率最高仅为20.00%，死亡率最高为12.50%。相同浓度的保幼激素Ⅲ和吡丙醚诱导尖唇散白蚁时，在前兵蚁阶段Met、Kr-h1、Br-C和USP基因的表达模式基本相似，除了USP外，均有表达高峰；Met在前兵蚁阶段的第5天达到高峰；保幼激素Ⅲ诱导与吡丙醚诱导相比，Kr-h1和Br-C的表达高峰均提前2 d。不同浓度的吡丙醚诱导白蚁时，120 μg/mL和160 μg/mL浓度诱导下Met、Kr-h1和Br-C基因均在第5天出现表达高峰（Br-C的160 μg/mL处理除外，表达高峰推迟2 d）。表明春、夏季保幼激素及其类似物更容易诱导分化出前兵蚁，且保幼激素Ⅲ比吡丙醚对下游基因的影响更明显。     

中草药饲料添加剂与食品安全

从保障食品安全出发，阐述了中草药饲料添加剂的特点、作用、营养功能、安全性及应用中注意的问题。     

猪Torque teno病毒研究进展

1997年,Nishizawa等应用运用代表性差异分析(Representational difference ahalysis,RDA)技术从不明原因的输血后肝炎患者血清中发现一种新的环状单链DNA病毒,并以患者名字将其命名为Torque teno virus(TTV),又因TTV与输血传播病毒(Transfusion transmitted virus,TTV)巧合,因此被许多科学家亦称为输血传播病毒[1].随后国内外学者利用巢式PCR、ELISA、原位杂交等检测手段相继发现在非灵长类动物中也均存在TTV的感染.