钩端螺旋体七日热血清型(56610)特异性单克隆抗体的研制

钩端螺旋体七日热血清型（５６６１０）培养物，经甲醛灭活后免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，取其脾细胞与ＳＰ２／０骨髓瘤细胞融合获得６株阳性杂交瘤，分别定名为１Ａ９、１Ｂ８、１Ｆ９、２Ｄ１０、２Ｅ４、３Ｅ８，其中１Ａ９、１Ｆ９、２Ｄ１０、２Ｅ４为特异性抗５６６１０杂交瘤．抑制试验结果表明，多抗血清能够有效地抑制这些特异性单抗，这些特异性单抗被鉴定为ＩｇＧ１亚类．     

鸡传染性支气管炎病毒单克隆抗体的研制与鉴定

用经蔗糖密度梯度离心纯化的鸡传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ，Ｍ４１）作为抗原免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，通过常规淋巴细胞杂交瘤技术产生杂交瘤细胞，经ＥＬＩＳＡ筛选，获得了４株能分泌特异性抗ＩＢＶ单克隆抗体的细胞系，分别命名为４ＡＣ１、４ＡＦ１、６ＤＨ８及２ＤＨ１０。４株单抗的亚类都属于ＩｇＧ２ｂ，在Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｔｉｎｇ试验中，４ＡＦ１、６ＤＨ８２株单抗特异性地识别ＩＢＶ的核衣壳蛋白（Ｎ）；经ＥＬＩＳＡ测定，各株单抗４０ｈ培养上清效价达１０－２～１０－４，第７天腹水效价达１０－５～１０－６，４ＡＦ１、６ＤＨ８与所试７个ＩＢＶ标准株及２个ＩＢＶ分离株都发生反应     

鸡传染性支气管炎病毒单克隆抗体的研制与鉴定

用经蔗糖密度梯度离心纯化的鸡传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ，Ｍ４１）作为抗原免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，通过常规淋巴细胞发校瘤技术产生杂交瘤细胞，经ＥＬＩＳＡ筛选，获得了４株能分泌特异性抗ＩＢＶ单克隆抗体的细胞系，分别命名为４ＡＣ、４ＡＦ１、６ＤＨ及２ＤＨ１０。４株单抗的亚类都属于ＩｇＧ２ｂ，在Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔｔｉｎｇ试验中，４ＡＦ１、６ＤＨ６２株单抗牧场卉性地识别ＩＢＶ的核衣壳蛋白（Ｎ）；经ＥＬＩ     

蚕豆萎蔫病毒单克隆抗体研制

用蚕豆萎蔫病毒（ＢＢＷＶ）提纯病毒粒子免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠,取其脾细胞与ＳＰ２／０骨髓瘤细胞融合,用纯化的ＢＢＷＶ病毒对杂交瘤细胞及时筛选,阳性孔经三次有限稀释法克隆,成功获得２株ＢＢ－ＷＶ特异性单克隆抗体的细胞株,分别命名为４Ｄ１１,３Ｇ１２．２株单抗腹水间接ＥＬＩＳＡ效价高达１∶６４００００,抗体类型均为ＩｇＧ１,经Ｗｅｓｔｅｒｎ－ｂｌｏｔｉｎｇ分析表明,２株单抗均是针对ＢＢＷＶ４４．７ｋＤ的外壳蛋白大亚基的特异性抗体．单抗抗原结合位点分析表明４Ｄ１１和３Ｇ１２两单抗作用于同一抗原决定簇     

减蛋综合征病毒单克隆抗体的生物学特性鉴定

该研究在建立分泌减蛋综合征病毒单克隆抗体杂交瘤细胞株的基础上，鉴定了１０株杂交瘤细胞所分泌的单克隆抗体（４Ｂ１，１Ｄ４，２Ｄ６，３Ｄ６，２Ａ１，３Ａ５，３Ｃ６，３Ｃ１，１Ｂ３和２Ｃ５）和生物学活性，这１０株杂交瘤细胞分泌的抗体有高度的特异性，只特异地作用于减蛋综合征病毒，微量血凝抑制试验（ＨＩ）发现４Ｂ１，３Ｃ１，２Ｃ５和３Ｃ６有血凝抑制活性，腹水效价分别为２４（ｌｏｇ２），４（ｌｏｇ２），７（ｌ     

法氏囊三肽囊素(Bursin)的研究 Ⅱ.Bursin在鸡体免疫器官中免疫组织化学的定位

以抗Ｂｕｒｓｉｎ单抗２Ｆ９－４，用免疫组织化学方法，检测Ｂｕｒｓｉｎ在鸡胚胎期及出壳后１～９周龄雏不同免疫器官中的定位分布。结果表明：胚胎期１２日龄囊（上皮芽、上皮）、骨髓呈阳性；１４日龄囊（上皮芽、芽突）、胸腺髓质有阳性细胞；２０日龄胸腺有阳性细胞。新生雏囊单层或假复层上皮ＦＡＥ和ＩＦＳＥ呈阳性、髓质有稀少ＤＲＥＣ阳性、ＣＭＥ弱阳性。出壳１～３周ＤＲＥＣ与哈德氏腺阳性，反应随周龄增加有所增强，胸腺髓质呈阳性，３周脾脏极少数散在阳性细胞。４周ＣＭＥ、ＤＲＥＣ、ＩＦＳＥ与ＴＤＩＡ的基底膜有阳性细胞。６周ＦＡＥ、ＦＡＥＳＣ、ＣＭＥ、ＤＲＥＣ、ＩＦＳＥ与ＴＤＩＡ的基底膜有阳性细胞。８周ＦＡＥ、ＦＡＥＳＣ、ＣＭＥ、ＤＲＥＣ呈阳性。９周ＣＭＥ、ＤＲＥＣ呈阳性。４，６，８，９周Ｈａｓａｌ小体、６，９周骨髓呈阳性；４，６周脾脏散在阳性细胞；４，６，９周哈德氏腺有阳性细胞。     

蚕豆萎蔫病毒单克隆抗体研制

用蚕豆萎蔫病毒提纯病毒粒子免疫ＢＡＬ Ｂ／ｃ小鼠,取其脾细胞与ＳＰ２／０骨髓瘤细胞融合,用纯化的ＢＢＷＶ病毒对杂交瘤细胞及时筛选,阳性孔经三次有稀释法克隆,成功获得了２株ＢＢＷＶ特异性单克隆抗体的细胞株,分别命名为４Ｄ１１,３Ｇ１２．２株单抗腹水间接ＥＬＩＳＡ效价高达１：６４００００,抗体类型均为ＩｇＧ１,经Ｗｅｓｔｅｒｎ－ｂｌｏｔｔｉｎｇ分析表明,２株单抗均是针对ＢＢＷＶ ４４．７ｋＤ的外壳蛋白     

2,4-D和6-BA对提高钝顶螺旋藻(Spirulina platensis Geitler)生物产量的效应

２．４－Ｄ和６－ＢＡ对于钝顶螺旋藻藻株Ｄ和藻株Ｅ的生物产量具有明显的提高趋势。其最适浓度为：６－ＢＡ１０ｍｇ／Ｌ,２．４－Ｄ０．１ｍｇ／Ｌ（对藻株Ｄ）和１ｍｇ／Ｌ（对藻株Ｅ）。藻株Ｆ的生物产量基本上不受２．４－Ｄ和６－ＢＡ的影响。     

2,4—D和6—BA对提高钝顶螺旋藻（Spirulina platensis Geit …

２．４－Ｄ和６－ＢＡ对于钝顶螺旋藻株Ｄ和灌株Ｅ的生物产量具有明显的提高趋势。其最适浓度为：６－ＢＡ１０ｍｇ／Ｌ,２．４－Ｄ０．１ｍｇ／Ｌ（对藻株Ｄ）和ｍｇ／Ｌ（对藻株Ｅ）。藻株Ｆ的生物产量基本上不受２．４－Ｄ和６－ＢＡ的影稀?     

NDV单抗针对多肽抗原的鉴定

经对液氮保存的抗鸡新城病毒单抗杂交瘤细胞株进行复苏，再克隆，并用ＥＬＩＳＡ和ⅡＦ筛选，得到２４株分泌力较强的细胞株。将这些细胞株再接种ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠，取其胜利水进行预处理，测春ＥＬＩＳＡ效价、ＩＩＦ效价，并用Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｔｉｎｇ测定它们所针对的中国标准强毒株Ｆ４８Ｅ８的多肽原表位。测得的结果均为针对血凝素－神经氨酸酶的单抗。     

抗鸡IgC单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立

利用纯化鸡血清ＩｇＣ免疫的Ｂａｌｂ／ｃ小鼠脾细胞与ＳＰ２／０骨髓瘤细胞进行融合，用ＥＬＩＳＡ间接法和夹心法作阳性抗体检测，经有限稀释法克隆，结果筛选出１株可持续分泌抗鸡ＩｇＣ单克隆抗体（ＭｃＡｂ）的杂交瘤细胞株３Ｅ３，其培养上清和诱生Ｂｌａｂ／ｃ小鼠腹水的ＭｃＡｂ效价分别为１：４×１０＾２－１．２８×１０＾４和１：８×１０＾５－１×１０＾１０，经染色体分析可见到两种形态的染色体，该细胞株经体连续     

抗小鹅瘟病毒中和性单克隆抗体研制及实验防治效果

用淋巴细胞杂交瘤技术研制出１１株抗小鹅瘟病毒（ＧＰＶ）单克隆抗体。这些单抗仅与ＧＰＶ反应，与其它细小病毒（ＣＰＶ、ＦＰＶ、ＰＰＶ）和其它禽病毒（ＮＤＶ、ＩＢＤＶ、ＤＨＶ、ＤＰＶ）均不反应。腹水单抗的ＥＬＩＳＡ效价达１０－５～１０－７，琼扩沉淀效价达１∶２０～１∶５１２，鹅胚中和效价达１∶３０～１∶１２２，鹅体中和效价为１∶５４～１∶９６。ＧＰＡ１和ＧＰＣ５２株单抗对人工感染ＧＰＶ的雏鹅具有良好防治效果。     

鸡T细胞特异性单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立

以鸡胸腺细胞免疫ＢＬＡＢ／ｃ小鼠,进行细胞融合,获得了１５株杂交瘤克隆株,其中有５株（１Ｂ６、１Ｃ５、３Ｅ４、９Ｈ６、５Ｅ１０）杂交瘤克隆抗体（ＭｃＡｂｓ）只对鸡胸腺细胞和外周血Ｔ细胞发生特异性反应。ＷｃｓｔｅｒｎＢｌｏｔ分析表明,这组ＭｃＡｂｓ反应的膜抗原分子量为６０～６５ＫＤ,该抗原分布于６３３～７２４％的胸腺细胞、１７３％～２４５％的脾细胞,２３％～２７％的外周血淋巴细胞,而法氏襄细胞的反应性不超过１３％。以此ＭｃＡｂｓ作诊断试剂,对禽类Ｔ细胞分离、纯化及Ｔ细胞亚类鉴定提供了重要的研究手段。     

沙门氏菌鞭毛蛋白属共同抗原表位的定位

用淋巴细胞杂交瘤技术研制成４株沙门氏菌属特异单抗ＣＢ８，ｄｅ７，ｃｃ６，ＤＤ４，在免疫转印试验中，证实它们所识别的抗原表位位于鞭毛蛋白上，ＥＬＩＳＡ相加试验及竞争试验显示，ＣＢ８和ｃｃ６与ｄｅ７，ＤＤ４识别的抗原表位不同，表明鞭毛蛋白的属共同抗原具有多种表位的特性。用胰蛋白酶消化鞭毛蛋白，ＳＤＳ－ＰＡＧＥ结果出现两条新带，分子量分别为４２０００（Ｆ４２），２７０００（Ｆ２７），长时间消化，最终只剩下Ｆ２７条带，它可抵制该酶的消化。对该酶切样品的免疫转印结果表明，沙门氏菌鞭毛蛋白属共同抗原表位出现于Ｆ４２和Ｆ２７上，而相应的沙门氏菌分型Ｈ抗原单抗或因子血清识别的表位也在Ｆ４２和Ｆ２７上都得到了证实。这为沙门氏菌鞭毛蛋白抗原的多样性及结构和功能研究提供了证据。     

家蚕核多角体病毒Lef—1和DA26基因的克隆及部分序列分析

ｌｅｆ－１和ＤＡ２６基因分别位于ｅｇｔ基因的上游和下游．从ｐＵＡｃ－ｅｇｔ中分离出ＥｃｏＲＩ－ＸｂａＩ１．１ｋｂ的ｅｇｔ基因片段，进行缺口平移标记，获得探针。与ＢｍＮＰＶＤＮＡ经ＨｉｎｄⅢ酶切、电泳、转移至ＮＣ膜的ＤＮＡ进行Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ杂交，发现ＢｍＮＰＶＤＮＡ的ＨｉｎｄⅢＤ片段呈阳性。从ＢｍＮＰＶ基因组中分离出１０．４ｋｂ的ＨｉｎｄⅢＤ片段，用ＥｃｏＲＩ酶切得到ＨｉｎｄⅢ－ＥｃｏＲＩ２．２ｋｂ、ＥｃｏＲＩ１．４ｋｂ和ＥｃｏＲＩ－ＨｉｎｄⅢ６．８ｋｂ３个片段，分别克隆于ｐＵＣ１９中，命名为ｐＵＨＥ２．２、ｐＵＥ１．４和ｐＵＥＨ６．８。经双链测序并与ＡｃＮＰＶ相关基因序列进行比较，发现ｌｅｆ－１基因被克隆于ｐＵＨＥ２．２中，ＤＡ２６基因克隆于ｐＵＥＨ６．８中。从所测定的ｌｅｆ－１和ＤＡ２６基因的启动子及５＇端部分序列来看，它们在ＡｃＮＰＶ和ＢｍＮＰＶ之间有极高的同源性。     

分泌抗BVDV McAb杂交瘤细胞株的建立

用牛病毒性腹泻病毒（ＢＶＤＶ）感染ＭＤＢＫ细胞,将感染细胞培养物冻融后离心取上汪经ＰＥＧ沉淀浓缩抗原免疫ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠,取血清抗体效价高遥免疫鼠的脾细胞与ＳＰ２／Ｏ细胞在ＰＥＧ作用下融合,产生杂交瘤细胞,用间接ＥＬＩＳＡ法检测杂交瘤细胞生长孔上清,筛选阳性杂交瘤细胞株。以有限稀法克隆２－３次,得到８ 泌抗ＢＶＤＶ的单克隆抗体（ＭｃＡｂ）杂交瘤细胞株。８株ＭｃＡｂ对ＢＶＤＶ,猪瘟均呈阳性反应。杂交     

肉鸭预混料配方筛选试验报告

选８０只樱桃谷肉用仔鸭，对４种（Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ）０～１４日龄和８种（Ａ１、Ａ２、Ｂ１、Ｂ２、Ｃ１、Ｃ２、Ｄ１、Ｄ２）１５～４２日龄肉鸭预混料作对比试验。结果表明：（１）０～１４日龄，Ｂ料增重５８４．９±５６．９ｇ／只，优于Ｃ料（Ｐ＜０．０１）、Ａ料（Ｐ＜０．０５）和Ｄ料（对照组，Ｐ＞０．０５）；（２）１５～４２日龄，Ｂ１料增重２４３７．５±１８０．４ｇ／只，Ａ２料增重２４１０±３１２．７ｇ／只，优于对照组Ｄ１等其他６种供试料，但差异不显著（Ｐ＞０．０５）；（３）除去饲料成本每只鸭毛利，两阶段配方组合Ａ－Ａ２、Ｂ－Ｂ１比对照组Ｄ－Ｄ１分别高１．１６元／只和０．８７元／只，为本次试验筛选出肉鸭最佳预混料配方。     

新颖抗猪流行性腹泻免疫制剂

以新生乳猪增殖猪流行性腹泻病毒（ＰＥＤＶ），通过蔗糖密度梯度离心纯化，获得结构较为完整的病毒颗粒，病毒ＥＬＩＳＡ效价为１：３×１０＾５，蛋白含量为３．９６ｍｇ／ｍＬ。将提纯的ＰＥＤＶ免疫Ｂａｌｂ／Ｃ小鼠，取其脾细胞与ＳＰ２／０骨髓瘤细胞进行融合，融合率为９５．６％。用间接ＥＬＩＳＡ筛选并进行３次再克隆，阳性率达１００％，共获得１５株能稳定分泌特异性抗ＰＥＤＶ单克隆抗体（ＭｃＡｂ）的杂交瘤细胞。其染     

沙门氏菌鞭毛蛋白属共同抗原表位的定位

用淋巴细胞杂交瘤技术研制成４株沙门氏菌属特异单抗ＣＢ８，ｄｅ７，ｃｃ６，ＤＤ４，在免疫转印试验中，证实它们所识别的抗原表位位于鞭毛蛋白上，ＥＬＩＳＡ相加试验及竞争试验显示，ＣＢ８和ｃｃ６与ｄｅ７，ＤＤ４识别的抗原表位不同，表明鞭毛蛋白的属共同抗原具有多种表位的特性。     

黄曲霉毒素B1间接竞争抑制ELISA定量分析法的建立和应用

以合成的黄曲霉毒Ｂ１（ＡＦＢ１）－Ｃ３－羧甲基肟－牛血清白蛋为免疫原,制备了高亲和力的多抗血清,建立了简便、灵敏的ＡＦＢ１间接竞争抑制ＥＬＩＳＡ定量分析法。ＡＦ类似物Ｂ１,Ｂ２,Ｇ１,和Ｇ２与ＡＦＢ１抗体的相对交叉反应率分别为１００％,３．４％,９．１％和小于１．３％。本法测定ＡＦＢ１的线性检测范围为１２．５～２５０ｐｇ,批内和批间平均变异系数分别为５．３％和７．９％,大米和混合饲料中测定ＡＦＢ１