花生蛋白酶解特性研究

采用中性蛋白酶对花生蛋白进行酶解,利用单因素及正交试验对各种酶的最佳酶解条件进行了研究.结果表明,酶浓度、温度、底物浓度、时间4个因素对酶水解的影响顺序为:酶浓度＞温度＞时间＞底物浓度;最佳水解条件为:酶浓度6%,pH值7.0,温度55℃,底物浓度1%,时间3 h.在此条件下进行酶解,花生蛋白的水解度最高,产生的酶解液苦味最小.     

鲢鱼蛋白质酶水解最佳工艺条件的研究

以酸法提取的鲢鱼蛋白为原料,采用复合蛋白酶进行酶解,研究了底物浓度、酶解时间、酶解温度及反应pH对蛋白酶水解鲢鱼蛋白的影响,通过正交试验确定最佳酶解条件优化水解工艺。结果表明:复合蛋白酶水解鲢鱼蛋白的最适条件为:底物浓度2%,温度55℃,pH值7.5,酶解时间55 min,优化后的水解液蛋白质回收率约为50.88%。     

鲮鱼蛋白酶解条件的研究

采用木瓜蛋白酶水解鲮鱼鱼蛋白,对酶解的工艺条件进行优化研究,分析酶浓度、底物浓度、温度、pH值、反应时间等因素对鲮鱼蛋白水解的影响。试验结果表明,木瓜蛋白酶水解鲮鱼蛋白的最佳条件为:酶浓度1.5%,底物浓度2.5%,酶解温度60℃,pH值6.0,反应时间3 h,在此条件下木瓜蛋白酶酶解鲮鱼蛋白所得酶解液中游离氨基态氮含量为585.20 mg/L。     

木瓜蛋白酶水解制备乳酪蛋白肽工艺条件的研究

研究了木瓜蛋白酶水解制备乳酪蛋白肽的工艺条件。通过正交试验,确定其最优工艺条件为：底物浓度4.0%,酶比底物值[E/S]0.15,pH 6.0,酶解时间4 h,酶解温度55℃,其水解度达到42.9%。     

胃蛋白酶水解乳清蛋白技术条件的优化

以浓缩乳清蛋白为原料,选择胃蛋白酶,采用均匀实验设计安排多因素多水平,寻求酶解乳清蛋白的最佳优化条件,利用DPS数据处理软件对试验结果进行回归分析,得到了具有拟合度较高的回归方程.确定胃蛋白酶酶解乳清蛋白的最佳水解条件为:酶解温度40.5 ℃、pH 2.5、酶和底物比1/25、底物浓度5.25%、酶解时间187 min,水解度16.98%.     

木瓜蛋白酶水解罗非鱼蛋白质的工艺研究

[目的]探讨采用木瓜蛋白酶水解罗非鱼蛋白质制备多肽水解液的方法。[方法]通过单因素试验研究了不同因素对木瓜蛋白酶水解罗非鱼蛋白质的影响,并以水解度为指标通过正交试验确定了木瓜蛋白酶水解罗非鱼的最佳水解工艺。[结果]单因素试验表明,在酶解时间约5h、底物浓度为4%、加酶量约5500U/g、pH值为7.0～7.5范围内,温度为50℃时,木瓜蛋白酶水解罗非鱼效果较好。正交试验表明,3因素的影响顺序为:加酶量>底物浓度>水解时间;最佳水解工艺为:水解液pH值7.5,加酶量为5500U/g,底物浓度为4%,温度50℃,水解6h,在此条件下水解度可达到37.89%。[结论]采用木瓜蛋白酶进行水解可获得较高水解度的酶解液,且鱼香浓郁,颜色正常,可用于制作调味品、口服液等。     

鹿血血红蛋白酶水解工艺条件的优化

以静脉采集的抗凝梅花鹿血为材料,考察了蛋白酶种类、酶解条件对鹿血中血红蛋白水解度、氮收率和血红素含量的影响,优化了碱性蛋白酶(Alcalase)和风味蛋白酶(Flavorzyme)的分步酶解工艺,以获得具有良好感官品质和富含血红素的鹿血酶解产品.结果表明:蛋白酶种类和酶解方式对鹿血血红蛋白水解效果有明显影响,采用Alcalase和Flavorzyme分步水解的效果最好.Alcalase和Flavorzyme的最适酶解温度分别为55℃和50℃,最适酶解起始pH值分别为8.0和6.5,2种酶的适宜底物浓度为8%(m/m),适宜加酶量为6 000U/g.采用分步酶解工艺时,在底物浓度8%、酶解温度55℃、起始pH值8.0的条件下,先用4 500 U/g的Alcalase酶解1 h,再用1 500 U/g的Flavorzyme酶解3 h,可获得最高的水解度、氮收率和血红素含量,其值分别为27.95%、73.75%和3.326 mg/mL.     

中性蛋白酶分步酶解花生分离蛋白制备花生短肽的研究

【目的】为了充分利用花生榨油之后的副产物,提高产品附加值,建立花生短肽制备工艺,研发功能性花生短肽产品。【方法】通过比较酶种类、底物浓度、酶解温度、酶解时间对水解度与短肽得率的影响,采用二次回归正交旋转组合设计优化分步酶解制备花生短肽的最佳工艺。【结果】中性蛋白酶分步酶解花生分离蛋白制备短肽的最佳工艺参数为：Neutrase水解花生分离蛋白2.04 h后加入Protamex继续酶解1.96 h,Neutrase添加量为5 200 U•g-1底物,Protamex添加量为422.32 U•g-1 底物,水解温度44.83℃,底物浓度8%,在此条件下,短肽得率为83.93%,水解度为38.25%,花生短肽纯度为93.85%±0.44%。经高效液相色谱测定,分子量小于1 000 D的水解产物占98.88%。【结论】采用Neutrase与Protamex分步酶解花生分离蛋白制备花生短肽,与现有碱性蛋白酶酶解制备花生短肽方法相比,避免了后续脱盐步骤,简化了工艺,且具有制备条件温和,DH和TCA-NSI高,纯度高,分子量集中分布于1 000 D以下等特点。     

菜籽粕蛋白肽制备工艺条件优化

试验改进了菜籽粕蛋白的酶解工艺,并对改进后的工艺条件进行了优化。采用2709碱性蛋白酶水解菜籽粕蛋白,分别考察了pH值、酶用量、酶解时间、温度、底物浓度对蛋白回收率的影响规律,在此基础上,利用响应面分析法对菜籽粕蛋白的酶解条件进行了优化。结果表明,2709碱性蛋白酶水解菜籽粕蛋白的较优条件为pH11.5、温度50℃、底物浓度4%、水解时间173min、酶用量5778U·g-1,此时蛋白回收率可达87.18%。     

不同蛋白酶水解猪血红蛋白制备血红素的对比研究

通过正交试验,研究了不同酶种类、底物浓度、酶浓度和水解时间对水解猪血红蛋白制备血红素的影响,结果表明:碱性蛋白酶是制备血红素的最佳酶,最优组合是:碱性蛋白酶+底物浓度4%+酶浓度2000U/g+水解时间10h。     

全蛋液酶改性工艺及蛋乳发酵酸奶的研制

试验对鸡蛋中蛋白质进行适当水解,将水解液与牛奶混合,经乳酸菌发酵制成具有清新蛋香和乳香味的蛋乳制品。结果表明,全蛋合理酶解条件为底物浓度3%,酶解温度50℃,酶解时间2 h,酶用量5 000 U·g-1。水解度27.22%,鸡蛋水解液中肽的Mr在1 000左右。水解液有明显蛋香味,无苦味。蛋乳酸奶合理工艺条件为配方鸡蛋水解液20%,糖8%,脱脂乳粉1%,其余用71%的牛奶补齐。发酵条件为菌种配比(Lb:St)1:1,添加量4%,发酵时间4 h,发酵温度42～43℃。制备的蛋乳酸奶色泽淡黄,具有明显的蛋香和乳香,产品凝固状态良好,口感细腻。     

大豆降压肽的生产工艺研究

应用4种蛋白酶酶解大豆分离蛋白,研究其水解效果和降压活性。实验选定碱性蛋白酶为生产大豆降压肽的最适酶,并对其酶解条件进行了优化,确定生产大豆降压肽的最佳条件为：温度60℃,pH8.0,底物浓度4%,碱性蛋白酶浓度4%,水解度14.4%,优化后的ACE抑制率可达到84.1%。     

微波辅助酸水解法制备丝素肽的研究

[目的]建立并优化快捷、高效制备丝素肽的微波辅助酸水解工艺。[方法]以家蚕废丝为原料,比较在碱液脱胶、磷酸酸解、石灰水沉淀除盐、活性炭脱色的工艺流程中酸水解的优化方案,并探讨亚硫酸和磷酸混合酸解对后继脱色工段的影响。[结果]微波辅助磷酸水解丝素蛋白最佳工艺条件为：磷酸浓度85%,温度70℃,功率150W,酸料比4∶1,水解90min,产品回收率达到69.0%,比磷酸水浴水解方案高约15%,且节省了4～5h的水解时间;在微波辅助水解条件下,亚硫酸和磷酸混合酸解比单独用磷酸酸解所得水解液颜色浅,色值可降低65.46%。[结论]对于丝肽的酸水解法制备,微波辅助能大大降低能耗,节省成本;混合酸酸水解法能降低酸解液色值。     

沙蚕不同酶解产物抗氧化效果研究

海洋生物蛋白资源是海洋生物资源的重要组成部分,对其进行高值化加工利用是海洋生物技术研究的重要内容,酶解是提高海洋蛋白功能性的有效方式,但酶种类不同,其作用位点不同,可能对酶解产物的活性有一定影响。为了探究了沙蚕不同酶解产物的抗氧化性,采用6种蛋白酶（碱性蛋白酶、中性蛋白酶、胃蛋白酶、木瓜蛋白酶、风味蛋白酶、胰蛋白酶）酶解沙蚕,测定了不同酶解时间下的水解度、分子量分布、3种自由基（DPPH、O-2·、·OH）的清除率等反映抗氧化水平的指标。结果表明：胰蛋白酶小分子肽得率最高,为70.47%;胃蛋白酶次之,为68.12%。酶解液浓度为5 mg·mL-1时,胃蛋白酶和木瓜蛋白酶酶解4 h时,DPPH清除率效果较好,分别为90.87%和90.52%。胃蛋白酶酶解3 h时,O-2·清除率效果最佳,为89.78%;木瓜蛋白酶酶解3 h时,O-2·清除率效果次之,为57.99%。碱性蛋白酶酶解4 h和胃蛋白酶酶解2 h时,·OH清除率效果较好,分别为85.07%和83.37%。胰蛋白酶和胃蛋白酶对提高酶解液水解度和小肽生成作用明显,胃蛋白酶的酶解产物对3种自由基清除率较好,更适用于制备沙蚕抗氧化肽。     

响应面分析法优化大豆抗氧化肽水解条件的研究

利用响应面法对大豆抗氧化肽酶解反应进行了优化研究。采用5因素5水平的正交旋转组合设计研究了酶解条件对水解液抗氧化性的影响。各因素对抗氧化性的影响依次为pH〉温度〉底物浓度〉加酶量〉时间。采用降维分析方法进行了底物浓度与酶解时间以及加酶量与酶解时间的交互效应分析。优化后的条件为：酶解温度56℃,pH7.0,底物浓度5.0%,加酶量4%,酶解时间4h。在该水解条件下,水解液的抗氧化值达到4120.33μmol·L^-1。为工业化生产提供了工艺参数的参考。     

双酶水解制备大豆玉米活性多肽的研究

[目的]研究双酶水解大豆玉米分离蛋白以制备大豆玉米活性多肽的最佳试验条件。[方法]以大豆蛋白和玉米蛋白为主要原料,配制不同浓度的大豆玉米分离蛋白溶液,经预处理后,分别用风味蛋白酶、复合蛋白酶、中性蛋白酶、木瓜蛋白酶和菠萝蛋白酶水解,通过测定水解度和酶活力,确定试验用酶。并将所选酶按一定比例两两混合,采用正交试验确定双酶水解的最佳条件。[结果]最佳水解条件为大豆玉米分离蛋白溶液浓度2%,风味蛋白酶与复合蛋白酶的比例1∶1,pH 7.0,水解时间8 h;在该条件下,大豆玉米分离蛋白的水解度可达75.14%。[结论]该研究为大豆玉米活性多肽的开发与应用奠定了基础。     

酶法水解螺旋藻蛋白研究

[目的]研究木瓜蛋白酶对螺旋藻蛋白的水解作用。[方法]采用正交试验设计分析温度、酶浓度、pH值、水解时间对水解度的影响,利用葡聚糖凝胶柱Sephadex G-25层析测定螺旋藻多肽分子量。[结果]木瓜蛋白酶水解螺旋藻蛋白的最适宜工艺参数为:温度55℃,酶与底物比0.4%,时间3 h,pH值6.0。[结论]当水解度为82.6%时,2个螺旋藻多肽洗脱峰的分子量分别为2 992和231 Da。     

中性蛋白酶酶解绿豆蛋白制备寡肽的研究

[目的]利用中性蛋白酶将绿豆蛋白质水解成肽和氨基酸,通过优化酶解条件得到水解度较高的绿豆肽。[方法]选用中性蛋白酶对绿豆分离蛋白进行酶法水解以制备寡肽。在单因素考察的基础上,采用四因素三水平的正交试验设计优化酶解条件。[结果]试验得出,最适的反应条件为温度50℃、pH值6.5、底物浓度7%、酶浓度6000 U/g、水解时间240 min。[结论]绿豆分离蛋白在此条件下酶解,水解度的平均值可达28.82%。     

乌贼内脏酶解多肽的制备和抗氧化活性研究

[目的]探讨乌贼内脏酶解多肽的制备和抗氧化活性。[方法]以乌贼内脏为原料,用胰蛋白酶对其进行水解,采用单因素和正交试验方法研究酶解温度、酶解时间、加酶量和pH对水解度和抗氧化性的影响;通过检测羟自由基清除率、DPPH清除率和还原力评价不同分子量水解物多肽的抗氧化性。[结果]当酶解温度为35℃,时间为5 h,加酶量为5 000 U/g,pH为7.5时,水解度最大;当酶解温度为40℃、时间为7 h、加酶量为4 500 U/g,pH为8.0时,水解物对羟自由基清除率最大。超滤后不同分子量多肽对羟自由基的清除率为3～5 kD3 kD以下5～10 kD;DPPH清除率:3～5 kD3 kD以下5～10 kD;还原力:3 kD以下3～5 kD5～10 kD。[结论]乌贼内脏酶解多肽具有较好的抗氧化活性,不同分子量多肽的活性不同。     

响应面法优化酶解海洋低值鱼肉制备抗氧化肽工艺

[目的]优化碱性蛋白酶制备海洋低值鱼抗氧化肽的工艺。[方法]以DPPH自由基清除率为指标,在酶解温度、pH、加酶量、底物浓度等条件下进行单因素试验,在此基础上运用响应面法优化碱性蛋白酶酶解低值鱼肉制备抗氧化肽的工艺条件。[结果]在温度54℃、pH 8.8、底物浓度200 g/L、加酶量2 500 U/g的条件下酶解3 h,得到抗氧化肽的DPPH自由基清除率理论值为62.66%,实际值为61.87%,相对误差为1.26%。[结论]该研究为低值鱼抗氧化肽的开发利用提供理论依据。