螺旋藻小分子多肽制备工艺的研究

碱性蛋白酶水解螺旋藻蛋白制备多肽粗品。根据中心组合试验设计原理,在单因素试验的基础上,以水解度为响应值,利用响应面法对影响螺旋藻蛋白水解的各种影响因素如温度、pH、酶解时间和加酶量进行了系统研究,得到最佳工艺条件为：pH值7.0、反应温度55℃、酶解时间160 min、酶底比4 300 U/g,水解度可达到26.8%。超滤截取相对分子量小于5 kD以下的组分,冷冻干燥后过SephadexG-25凝胶柱层析收集螺旋藻小分子肽段。根据标准蛋白色谱层析检测所得制品为相对分子量在307～1 450 D范围的螺旋藻小分子肽段。     

响应曲面法研究白果蛋白的酶解工艺

[目的]确定白果蛋白的最佳酶解条件。[方法]分别采用木瓜蛋白酶,2709碱性蛋白酶,中性蛋白酶对白果蛋白进行酶解,并对酶解效果较好的碱性蛋白酶进行单因素试验,考察各因素对酶解效果的影响;采用Designexpert软件设计试验、创建模型,采用响应曲面法分析试验结果。[结果]碱性蛋白酶对白果蛋白的水解度最大（50.50%）;酶解温度为50℃时蛋白水解度最大,酶用量为3g和酶解时间为6h时蛋白水解度达到稳定点;据模型分析,各因素对酶解效果的影响依次为：pH值〉温度〉底物浓度,最佳酶解条件为：时间6h,酶用量2g,pH值9.0,温度47℃,底物浓度2.17%。[结论]最佳酶解条件下白果蛋白的水解度可达67.75%,水解液过膜后干燥可得粗多肽1.3g（占干燥白果粉的6.51%）。     

木瓜蛋白酶水解罗非鱼蛋白质的工艺研究

[目的]探讨采用木瓜蛋白酶水解罗非鱼蛋白质制备多肽水解液的方法。[方法]通过单因素试验研究了不同因素对木瓜蛋白酶水解罗非鱼蛋白质的影响,并以水解度为指标通过正交试验确定了木瓜蛋白酶水解罗非鱼的最佳水解工艺。[结果]单因素试验表明,在酶解时间约5h、底物浓度为4%、加酶量约5500U/g、pH值为7.0～7.5范围内,温度为50℃时,木瓜蛋白酶水解罗非鱼效果较好。正交试验表明,3因素的影响顺序为:加酶量>底物浓度>水解时间;最佳水解工艺为:水解液pH值7.5,加酶量为5500U/g,底物浓度为4%,温度50℃,水解6h,在此条件下水解度可达到37.89%。[结论]采用木瓜蛋白酶进行水解可获得较高水解度的酶解液,且鱼香浓郁,颜色正常,可用于制作调味品、口服液等。     

Alcalase蛋白酶水解大豆分离蛋白的研究

[目的]研究Alcalase蛋白酶对大豆分离蛋白的水解作用及水解物的性质。[方法]通过单因素试验,研究pH值、温度、酶浓度、底物浓度等因素对Alcalase蛋白酶酶解大豆分离蛋白的影响,通过正交试验确定Alcalase蛋白酶水解大豆分离蛋白的最佳水解条件。[结果]Alcalase蛋白酶水解大豆分离蛋白的最佳水解条件是pH值8.0、温度60℃、酶浓度1000U/g、底物浓度3%,水解时间2h,大豆分离蛋白水解度为46.13%。[结论]酶解后大豆分离蛋白的水解度达到了制备大豆多肽的要求。     

酶法制备驴骨多肽的工艺研究

[目的]研究酶法水解驴骨蛋白制备骨多肽的工艺,可为充分挖掘骨蛋白资源及开发骨蛋白深加工产品提供理论依据,具有重要的科学意义。[方法]以水解度和氮溶出率为考察指标,对驴骨进行高温高压蒸煮、不同食品级蛋白酶水解及酶解条件的研究。[结果]提取驴骨蛋白的最佳蒸煮条件为：温度121℃,压力0．1MPa,蒸煮时间4h;木瓜蛋白酶的水解产物具有较高的水解度和氮溶出率,为最佳水解酶;驴骨粉经121℃加热预处理30min可提高酶解效果;木瓜蛋白酶的最佳水解条件为：水解时间5h,底物浓度8％．pH值6．0,加酶量7000U／g,温度55℃;木瓜蛋白酶水解驴骨蛋白的酶解产物pH值在5～9时,氮溶解指数高于88％,三氯乙酸氮溶解指数达84％。[结论]该酶水解的产物具有较高的溶解性,大部分为低分子肽,可直接应用于食品中。     

双酶水解法制备大豆多肽的研究

[目的]研究酶解法制备微苦大豆多肽的新方法,为其在食品和药品领域的广泛应用提供参考。[方法]选择Alcalase蛋白酶和Flavourzyme酶对大豆分离蛋白进行分步水解。采用单因素分析法和正交试验设计,研究pH值、温度、酶浓度和底物浓度等因素对Alca-lase蛋白酶水解效果的影响,确定其最佳的水解条件。并且,对Flavourzyme酶的脱苦作用进行了研究。[结果]Alcalase蛋白酶水解大豆分离蛋白的最佳水解条件是pH值8.0,温度60℃,酶浓度1000U/g、底物浓度3%,水解时间2h,此时的大豆分离蛋白水解度可达46.13%。Flavourzyme酶可明显降低大豆多肽的苦味。[结论]采用Alcalase蛋白酶和Flavourzyme酶分步酶解法制备的大豆多肽无明显苦味,可被广泛应用于食品生产中。     

碱性蛋白酶水解螺旋藻蛋白的研究

[目的]研究碱性蛋白酶水解螺旋藻蛋白的工艺条件。[方法]采用L9（34）正交试验方法,研究了碱性蛋白酶对螺旋藻蛋白进行水解的最适温度、酶与底物的比（E/S）、pH等反应条件;并且以蛋白质的水解度为指标,优化出最佳工艺条件。[结果]在酶与底物比为5%、pH为8.5、温度为50℃的最佳工艺条件下,蛋白质水解度可达31.2%。[结论]该研究为螺旋藻进一步开发奠定了基础。     

土鳖虫多肽的制备工艺及抗凝血的作用研究

[目的]采用木瓜蛋白酶对土鳖虫蛋白质进行酶解,制备土鳖虫多肽,并对获得的多肽进行抗凝血的作用研究。[方法]利用酶解法制备土鳖虫多肽,以水解度为考察指标,确定多肽的最佳制备工艺;通过试剂盒测定不同浓度的多肽对小鼠凝血酶时间(TT)、凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血激酶时间(APTT)的影响。[结果]木瓜蛋白酶水解制备土鳖虫多肽的最佳工艺条件为pH 8.0,酶用量1.0%,酶解温度55℃,酶解时间3.5 h;获得的土鳖虫多肽显著延长了小鼠TT和APTT,对PT无明显影响。[结论]在最佳酶解条件下获得了土鳖虫多肽,且证明其具有抗凝血作用。     

木瓜蛋白酶水解制备乳酪蛋白肽工艺条件的研究

研究了木瓜蛋白酶水解制备乳酪蛋白肽的工艺条件。通过正交试验,确定其最优工艺条件为：底物浓度4.0%,酶比底物值[E/S]0.15,pH 6.0,酶解时间4 h,酶解温度55℃,其水解度达到42.9%。     

鹿茸胶原多肽复合酶水解工艺研究

【目的】对鹿茸胶原多肽进行复合酶水解,优化水解工艺,并测定水解液分子量分布。【方法】以碱性蛋白酶和胰蛋白酶为供试酶类,选用酶解时间、pH值、酶解温度、加酶量为影响因素,采用响应面试验设计优化单酶水解条件,根据响应面试验所得到的单酶水解的最适条件,确定双酶复合水解方案。通过Sephadex G25测定鹿茸胶原多肽的分子量分布。【结果】碱性蛋白酶最优水解条件为:酶解时间3.6h,pH值10.50,酶解温度55℃,加酶量4%,水解液的水解度为22.03%;胰蛋白酶最优水解条件为:酶解时间3.2h,pH值8.00,酶解温度50℃,加酶量4.4%,水解液的水解度为15.81%。复合酶水解条件:酶解温度为52.5℃,调节pH值为10.50,加入4%的碱性蛋白酶酶解3.6h;调节pH值至8.00,加入4.4%的胰蛋白酶酶解3.2h,所得水解液的水解度可达33.42%。复合酶水解胶原多肽的分子量分布在400~1 400u。【结论】确定了鹿茸胶原多肽碱性蛋白酶和胰蛋白酶复合水解的工艺条件。     

复合酶水解鸡肉工艺条件的优化

[目的]为进一步改善鸡胸肉的加工工艺奠定基础。[方法]以蛋白水解度、水解液的鸡香和苦味为指标,比较P+N复合酶、胰蛋白酶、Alcalase、木瓜蛋白酶和精制中性蛋白酶在各自适宜条件下对鸡肉的水解效果。研究液固比、初始pH值、反应温度和反应时间对P+N复合酶水解度的影响,探索P+N复合酶水解鸡肉的最佳工艺条件。[结果]P+N复合酶为水解鸡肉的最佳酶,其水解效果明显优于单酶。各因素对水解度影响程度依次为反应温度>反应时间>液固比>初始pH值,而反应温度对水解反应的影响显著。P+N复合酶水解鸡肉的最佳工艺条件为:加酶量0.2%、反应温度50℃、液固比31:、初始pH值7.0、反应时间8 h。[结论]在该条件下,鸡肉水解蛋白液的水解度达51%～54%,且鸡香浓郁、无苦味。     

文蛤闭壳肌酶法水解工艺研究

[目的]探讨文蛤闭壳肌酶法水解蛋白液制备的最佳工艺。[方法]以加酶量(木瓜蛋白酶)、pH、温度为因素采取3因素3水平的设计方法对文蛤闭壳肌进行水解。[结果]以水解率为指标,得到各因素对文蛤闭壳肌酶法水解影响的大小顺序为加酶量﹥pH﹥温度。最佳水解工艺条件为加酶量8 000 U/g原料,pH 5.5,温度50℃,优化方案的水解率为32.4%。[结论]研究为文蛤闭壳肌的综合利用提供了一定的科学依据。     

高汤中木瓜蛋白酶酶解条件的研究

[目的]摸索高汤中木瓜蛋白酶最佳酶解条件,为高汤的工业化生产奠定基础。[方法]以木瓜蛋白酶为研究对象,以鸡架骨为主要酶解对象,在传统的高汤熬制过程中引进现代生物工程——酶解技术,研究酶解pH值、酶解温度、酶解时间对木瓜蛋白酶水解的影响,并探索木瓜蛋白酶酶解条件的改变对高汤口味以及原料中蛋白质的利用率等方面的影响。[结果]高汤中木瓜蛋白酶最适宜的酶解条件为:pH值6.0～7.0、酶单位5000U/g,鸡架骨∶水之比为1∶5,在60℃下酶解3h左右。[结论]在高汤的产业化生产中引进酶解工艺对提高原料蛋白质的利用、降低生产成本是十分可行的。     

木瓜蛋白酶水解林蛙皮制备活性肽的工艺研究

[目的]以林蛙皮为原料,利用木瓜蛋白酶水解法制备活性肽。[方法]选取固液比、酶用量、pH、水解时间和水解温度为影响因素,以活性肽的水解度为考察指标,通过单因素试验和正交试验优选木瓜蛋白酶酶解林蛙皮制备活性肽的最佳工艺条件。[结果]最优工艺条件为固液比1∶4,酶用量14 000 U/g,pH 7.0,水解温度55℃,水解时间4 h。[结论]该研究为林蛙资源的综合利用提供了新的途径。     

啤酒废酵母酶解生产橘小实蝇引诱蛋白研究

[目的]优化啤酒废酵母酶解生产橘小实蝇引诱蛋白的条件。[方法]采用室外小笼子生物测定法,通过正交试验设计对啤酒废酵母酶解生产橘小实蝇引诱蛋白的影响因素(酵母浓度、酶量、水解温度、水解时间、水解pH和水解产物pH)进行了优化。[结果]将酵母母液稀释3倍后加入15.0 g/kg木瓜蛋白酶,在pH 6.5、温度67.5℃条件下保温水解24 h得到的水解蛋白于pH 8.5时对橘小实蝇雄性的引诱活性最强,水解27 h对橘小实蝇雌性的引诱活性最强。[结论]为开发橘小实蝇蛋白诱剂提供了理论依据。     

罗汉果蛋白酶对酒糟中蛋白质的水解作用研究

[目的]为酒糟中蛋白质的水解提供新方法。[方法]采用酶解法,用罗汉果蛋白酶提取酒糟中的蛋白质,测定酶解酒糟上清液中蛋白质的含量,计算单位体积蛋白质增量。在加酶量、酶解温度、酶解时间、pH值单因子试验的基础上,采用正交试验确定酒糟中蛋白质的最佳提取条件。[结果]各因素对单位体积蛋白质增量的影响依次为:pH值>水解时间>加酶量>水解温度。酶解酒糟的最佳条件为:pH值8.0,水解时间10 min,加酶量0.75 ml/100 g湿酒糟,温度65℃。在最佳条件下,单位体积蛋白质增量可达98.78%。[结论]该研究确定了酶解法提取酒糟中蛋白质的最优条件,使酶解上清液中蛋白质含量增加了近1倍。     

碱性蛋白酶水解文冠果蛋白酶的条件研究

[目的]研究碱性蛋白酶水解文冠果蛋白的最佳工艺条件。[方法]选取底物浓度、pH、温度、酶用量和水解时间为影响因素,以文冠果蛋白的水解度作为评价指标,进行单因素分析,并以此为依据采用响应曲面分析法确定碱性蛋白酶的最佳水解条件,然后对最佳条件进行验证试验。[结果]碱性蛋白酶水解文冠果蛋白的最佳工艺条件为底物浓度5%,加酶量4%,pH 9.0;在此优化条件下,水解度为19.75%。[结论]为文冠果蛋白的研究开发提供了技术参数。     

双碱配合提取啤酒厂剩余污泥蛋白质的研究

[目的]提高啤酒厂剩余污泥中蛋白质的提取率。[方法]分别选取水解温度、水解时间、NaOH或Ca(OH)2投加率为影响因素,以蛋白质提取率为评价指标,进行正交试验,并以此为依据采用双碱法优化污泥水解的工艺条件。[结果]双碱配合水解污泥提取蛋白质的最佳条件为NaOH投加率(占干污泥的质量分数)8%,Ca(OH)2投加率15%,水解温度80℃,水解时间7 h,此时反应体系pH为13。在最优条件下,蛋白质提取率可达60.03%。[结论]该研究可为啤酒厂污泥的资源化利用提供科学依据。