兔肺炎克雷伯氏菌的分离与鉴定

重庆市某兔场洪灾后发生了以呼吸道症状和腹泻为主要特征的疾病,通过细菌分离培养、染色镜检、生化试验、动物接种试验、16S rRNA V3可变区基因扩增及测序,结果表明,该菌属兔肺炎克雷伯氏菌,其基因序列同源性与肺炎克雷伯菌高达99％.该菌对头孢噻肟、菌必治高度敏感.选用头孢噻肟对发病兔群紧急防治,并采取消毒、隔离等综合防治措施,使疫情得到有效控制.     

兔源肺炎克雷伯氏菌的生物学特性研究

为探究兔源肺炎克雷伯氏菌的生物学特性,本研究对从病兔中采集的病料进行细菌的分离培养、细菌特征性基因(Khe基因)的PCR检测、生化鉴定、药敏试验、致病性试验、毒力基因的扩增及序列分析对细菌分离株进行分析。结果显示麦康凯平板上生长有奶油状菌落且镜检为革兰氏阴性菌;Khe基因扩增为阳性;生化鉴定结果表明分离菌为肺炎克雷伯氏菌;药敏结果显示该菌对诺氟沙星、氧氟沙星、头孢曲松等9种药物高敏,对链霉素、卡那霉素、头孢呋辛等5种药物中敏,对先锋V、庆大霉素等7种药物不敏感甚至耐药;致病性结果显示,分离株能使小白鼠在24h内死亡;分离株携带有wabG、uge和fimH三种毒力基因。本研究结果表明该肺炎克雷伯氏菌具有很强的致病性,是导致兔死亡的主要病原菌。     

兔源肺炎克雷伯氏菌重组酶聚合酶扩增检测方法的建立

为建立一种检测兔源肺炎克雷伯氏菌(Klebsiella pneumoniae)重组酶聚合酶扩增方法(recombinase polymerase amplification,RPA),根据肺炎克雷伯氏菌的phoE基因保守序列设计引物,扩增片段大小为277 bp,并对反应条件进一步优化,最终建立了适宜于快速准确检测兔源肺炎克雷伯氏菌的重组酶聚合酶等温扩增方法。该方法可特异性检测出兔源肺炎克雷伯氏菌,最低检出细菌量为8.3×10~1 CFU/mL,灵敏度比传统PCR高100倍。本研究建立的肺炎克雷伯氏菌RPA检测方法特异性强、操作简单,从而为生产中的兔源肺炎克雷伯氏菌现场快速检测提供了一种新方法。     

山瑞鳖源肺炎克雷伯菌的分离鉴定及其药敏特性分析

从患病山瑞鳖的肝脏和肺脏分离纯化到1株革兰阴性杆菌GX120222,经细菌培养特性观察和VITEK 2compact全自动微生物鉴定系统对理化特性进行鉴定,结果与肺炎克雷伯菌肺炎亚种(Klebsiella pneumoniae ss pneumonia)特征相符;将该菌16SrRNA基因序列(KP091888)与GenBank中的序列进行BLAST比对并构建系统发育树,结果表明其与肺炎克雷伯菌的16SrRNA基因序列同源性最高(100%),在系统发育树上与肺炎克雷伯菌肺炎亚种的菌株聚为一簇,且与肺炎克雷伯菌肺炎亚种标准菌株ATCC43816KPPR1(CP009208)的亲缘关系最近,进一步确定菌株GX120222为肺炎克雷伯菌肺炎亚种。人工感染试验结果显示,该菌对供试的山瑞鳖有较强致病性,半数致死量(LD50)为3.8×10~7 CFU/mL;药敏试验显示,GX120222对头孢西叮、舒普深和阿米卡星敏感,对特治星中度敏感,对所测的其他26种抗菌素耐药。上述结果表明,肺炎克雷伯菌GX120222是导致此次山瑞鳖发病死亡的病原菌,且具有多重耐药性。     

青岛地区兔肺炎克雷伯氏菌分离鉴定

对青岛地区某兔场病死兔的病变器官组织进行细菌分离和纯培养,对所分离的细菌进行形态特征、理化性质和16SrRNA序列的分子鉴定和测序,人工感染以及药敏试验,判定为肺炎克雷伯氏菌。代表菌株16SrRNA序列长度1414bp,与GeneBank登录号为EU360123.1的肺炎克雷伯氏菌16SrRNA序列同源性100%,人工感染小鼠24h全部死亡,对供试的诺氟沙星等药物高度敏感,对供试的强力霉素等中毒敏感,对头孢拉定等耐药。应用筛选的敏感药物,并采取综合防治措施,使疫情得到了有效控制。     

兔源肺炎克雷伯氏菌诊断及耐药性分析

2018年冬,山西省某獭兔养殖场出现獭兔呼吸急促、腹泻,从发病到死亡,不到两天时间,通过对死亡兔进行肺部病灶的微生物分离培养及生化试验、染色镜检鉴定,并对其进行了9种药物的敏感性试验。在13只病死兔的肺脏中均分离出肺炎克雷伯氏菌,敏感药物筛选试验结果显示,13株肺炎克雷伯氏菌对多种药物呈现出耐药性,其中对四环素耐药率最高,达100%,呈绝对耐药;对链霉素、庆大霉素、阿米卡星、诺氟沙星、氧氟沙星、氨苄西林、头孢曲松的耐药率均在40%以上,对阿莫西林的耐药率最低,为15.3%。结果表明,克雷伯氏菌为该兔场因腹泻腹胀、呼吸困难而死亡的主要致病菌,其对9种抗生素产生了普遍的耐药性,建议进一步扩大药物的筛选范围,选择更多的合适药物进行治疗。     

一例种兔巴氏杆菌和肺炎克雷伯氏菌混合感染的病例报道

山东某种兔场仔兔突然出现呼吸困难、鼻腔有异物等临床症状。采集兔肝、肺、肾等样品,应用细菌分离、药敏试验及PCR方法进行实验室检测,结果表明,该兔场为巴氏杆菌和肺炎克雷伯氏菌混合感染。通过采取综合防控措施,病情得到有效控制,减少了该兔场的经济损失。从发病情况、临床症状、实验室诊断、治疗、防控措施等方面进行介绍,以期为养殖户及基层兽医对巴氏杆菌和肺炎克雷伯氏菌的综合防治提供借鉴。     

流产奶牛胎儿肺炎克雷伯氏菌的分离与鉴定

从流产奶牛胎儿组织中分离到1株革兰氏阴性短杆菌,采用细菌分离纯化、生化试验、16S rRNA和16S～23S rRNA测序、药敏试验和小鼠致死性试验对其进行了鉴定。结果显示,该分离菌与GenBank中肺炎克雷伯氏菌16S rRNA和16S～23S rRNA基因序列一致性分别高达99%和96%,16S～23S rRNA基因被扩增出3条不同长度条带;该菌生化特性均符合肺炎克雷伯氏菌的生化反应特性;对头孢曲松、阿米卡星、多粘菌素等敏感,对多西环素、四环素、卡拉霉素等中度敏感,对青霉素、红霉素、米诺环素等耐药;对小鼠有很强的致病性。以上结果表明,该分离细菌为肺炎克雷伯氏菌。     

一株兔源耐药性肺炎克雷伯氏菌的分离与鉴定

本试验旨在对从患呼吸道感染和腹泻的仔兔血液中分离的1株疑似病原菌进行鉴定。采用分离培养、镜检、生化检测、荚膜染色、16S rDNA序列测序、药敏试验和动物体内感染等方法,对该疑似菌进行了分析。结果显示,该疑似菌呈杆状、含有丰富的荚膜多糖,其16S rDNA序列与肺炎克雷伯氏菌标准菌株序列相似性达到99%,且对链霉素、庆大霉素、氨苄青霉素、硫酸庆大霉素、硫酸卡那霉素和氯霉素均表现出不同程度的显著抗性。腹腔注射该菌(10⁹ CFU/mL),仔兔全部死亡;而口腔灌喂,仔兔有较强的耐受性(无死亡)。结果表明,从患病仔兔血液中分离到1株肺炎克雷伯氏菌且具有致病性。     

兔肺炎克雷伯氏菌病的诊治

兔肺炎克雷伯氏病是由肺炎克雷伯氏菌引起的以肺炎和其他器官化脓性炎症为特征的散发性疾病。青年兔、成年兔以肺炎及其他器官化脓性病灶为主要病变特征,幼兔以腹泻为特征。     

鲤鱼肺炎克雷伯氏菌分离与鉴定

初步了解肺炎克雷伯氏菌在鲤鱼鱼体中的发病机制并筛选防治药物,为预防和治疗该病提供准确实验数据。对发病鲤鱼进行细菌分离纯化,通过革兰氏染色反应,生理生化反应测定单菌落特性,进行细菌回归试验和药敏试验。对注射菌液后发病的鱼进行细菌再分离,得到革兰氏阴性菌,并且与七叶苷及其它17种指标反应呈阳性,与戊二酰-甘氨酸-精氨酸-AMC及其它11种指标反应呈阴性,注射该菌液48 h后鱼体出现与疑似病例相同病症。分离得到的细菌,按《伯杰氏细菌鉴定手册》进行鉴定,确定为肺炎克雷伯氏菌。药敏试验结果表明该菌对亚胺培南等6种药物高度敏感。本试验首次从鲤鱼体内分离出肺炎克雷伯氏菌,并得到6种高度敏感的药物,同时阐明了肺炎克雷伯氏菌在鲤鱼中发病症状。     

兔源性肺炎克雷伯氏菌的研究现状及进展

肺炎克雷伯氏菌是一种能引起人和多种动物患病的条件致病菌,在自然界中广泛分布,主要存在于人和动物的肠道、呼吸道以及泌尿生殖道中。该菌会引起宿主感染肺炎、败血症、肝脓肿等。近年来,随着养兔业的快速发展,各种抗生素在养殖业的广泛应用甚至滥用,肺炎克雷伯氏菌在兔中的发病率呈现上升趋势,对兔的危害日益严重,给兔养殖业带来了较大的经济损失。本文从肺炎克雷伯氏菌的流行病学特征、毒力特征、耐药性、分离鉴定、以及防治手段等方面进行探讨,为实际生产和科学研究提供参考依据。     

18种中药水煎剂及其提取物浓缩粉对貂源肺炎克雷伯菌的体外抑菌作用研究

为研究连翘、白头翁、丹皮等18种中药水煎剂及其提取物浓缩粉对貂源肺炎克雷伯菌的抑菌作用,试验采用琼脂平板打孔法测定抑菌圈直径观察药物的体外抑菌作用。结果表明:中药水煎剂中,黄连、黄芩和薄荷对肺炎克雷伯分离株的抑菌效果最好,抑菌圈直径达10 mm以上,属于中度敏感。中药提取物浓缩粉中,丹皮酚对肺炎克雷菌的抑制作用最强,达到高度敏感。黄连、连翘、山豆根、白芍、薄荷和黄芪多糖6种中药提取物浓缩粉对肺炎克雷伯菌也具有较强的抑菌作用,抑菌圈直径达10 mm以上,属于中度敏感。说明18种中药水煎剂及其提取物浓缩粉对肺炎克雷伯菌有不同程度抑菌作用。     

羊源肺炎克雷伯氏菌的分离与鉴定

本研究通过病死羊的肺脏中进行细菌分离、形态学观察、生化试验、致病性试验、药敏试验和16S rRNA扩增。结果从肺中分离到1株具有致病性的革兰氏阴性短杆菌。生化试验鉴定结果符合肺炎克雷伯氏菌的特征。分离株对头孢噻肟、阿米卡星、头孢曲松和链霉敏感外,对强力霉素等12药物具有耐药性。16S rRNA测序结果分析显示分离株与肺炎克雷伯氏菌的核苷酸同源性为97.1%~99.0%,在核苷酸进化树上与肺炎克雷伯氏菌属于同一分支。结果表明本研究从病死羊的肺脏中分离到1株肺炎克雷伯氏菌。     

仔兔克雷伯菌病的诊治

<正>兔肺炎克雷伯氏病是由肺炎克雷伯氏菌引起的以肺炎和其他器官化脓性炎症为特征的散发性疾病。(一)病原及流行病学肺炎克雷伯氏菌为肠道、呼吸道、土壤、水和谷物等的常在菌,当兔体抵抗力下降或其他原因造成应激时(如忽冷忽热、空气不洁、长途运输、饲料的突然变换等),可促成本病的发生。各种年龄、品种和     

致奶牛乳房炎肺炎克雷伯氏菌的分离鉴定及防治建议

肺炎克雷伯氏菌为革兰氏阴性菌,是重要的条件性致病菌和医源性感染菌之一,也是引起奶牛乳房炎的重要病原菌。本研究对30份奶牛乳房炎乳样进行了病原菌的分离鉴定,并对分离菌进行药物敏感试验;结果表明,本次共分离肺炎克雷伯氏菌3株,遗传进化树关系显示分离菌株KP1、KP3与CP031810株、CP031562株、CP032185株亲缘关系较近,分离株KP2则相对较远。药物敏感试验结果显示,3株分离株均对阿莫西林、头孢他啶、头孢曲松耐药,对链霉素、庆大霉素表现敏感,分离菌株KP1和KP3对青霉素表现中度敏感,菌株KP2则表现耐药。本研究为奶牛场针对该菌的防控提供了基础数据。     

一株湖羊肺炎克雷伯菌的分离与鉴定

从某湖羊养殖场发病死亡的成年湖羊的肾脏中分离到1株革兰阴性短杆菌,形态特征与生化试验结果基本符合肺炎克雷伯氏菌的特征。药物敏感性试验显示,该分离菌株对氨苄西林、哌拉西林、头孢唑啉、头孢哌酮、卡拉霉素、庆大霉素、诺氟沙星、氧氟沙星高敏,而对氟苯尼考、青霉素、苯唑西林、红霉素、四环素、多西环素、万古霉素、复方新诺明等药物具有耐药性。以细菌16S rRNA基因通用引物进行PCR扩增,将所测序列与GenBank中的序列进行BLAST比对,结果其与肺炎克雷伯菌的同源性高达99.9%以上,进一步确定该分离菌株为肺炎克雷伯菌。     

耐药性兔源肺炎克雷伯菌的研究进展

肺炎克雷伯菌属于肠杆菌科克雷伯菌属,为肠道、呼吸道、土壤、水和谷物等的常在菌,是一种条件性致病菌,能引起多种动物和人类感染发病,主要引起肺炎、脑膜炎、肝脓肿、眼内炎、伤口感染、泌尿系统发炎和全身败血症等.近年来,随着养兔业不断发展,规模化生产的普及,抗生素的泛用滥用,使得兔场耐药性肺炎克雷伯氏菌不断出现,给兔场预防和治...     

兔肺炎双球菌病的病原分离鉴定及治疗

2013年山东滨州市某兔场发生仔兔高病死率、母兔流产的疾病。为了诊断治疗该病,本试验采集病死兔肺脏进行病原的分离,通过病原分离、形态学观察、生理生化试验、溶血试验、药敏试验等试验,证实分离菌为肺炎双球菌。该菌具有α-溶血性,对青霉素、头孢吡肟、阿米卡星等药物敏感;动物回归试验成功复制出兔肺炎双球菌病,症状典型,病理剖检变化明显。根据临床症状和药敏试验结果,用青霉素等药物进行治疗,病情得到有效控制。     

肺炎克雷伯氏菌PCR检测方法的建立

依据GenBank中肺炎克雷伯氏菌的部分已知序列,利用Primer Premier 5设计两对引物,通过优化反应条件,建立一种检测肺炎克雷伯氏菌的诊断方法。特异性和敏感性试验显示,该方法能特异地检测肺炎克雷伯氏菌,其最低能检测的细菌浓度为1×10~(-4)Mcf,整个检测扩增在3h内完成。该结果表明本试验所建立的PCR方法的灵敏度及特异性均较好,可用于快速检测肺炎克雷伯氏菌。