一起猪圆环病毒和肺炎双球菌混合感染的诊治与防控

为了明确延边朝鲜族自治州图们市某养殖场猪群发病原因,试验通过流行病学调查、临床症状观察、病理剖检、病死猪病料直接涂片观察、细菌学检测及酶联免疫吸附试验(ELISA)分别对猪瘟病毒(CSFV)、猪圆环病毒(PCV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪蓝耳病毒(PRRSV)及猪流行性腹泻病毒(PEDV)进行检测,并根据诊断结果进行治疗与防控。结果表明:试验成功分离鉴定出1株肺炎双球菌,ELISA检测为猪圆环病毒呈阳性(OD值为0.499和0.990),诊断该养殖场猪群所患疾病为猪圆环病毒和肺炎双球菌的混合感染。用药治疗后,治愈29头,死亡24头,疫情得到有效控制。说明诊断正确,治疗与防控方法恰当。     

一例多种病毒混合感染的实验室诊断及综合防制措施

2016年3月,彭州某猪场出现疑似猪蓝耳病病毒(PRRSV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪流行性腹泻病毒(PEDV)和猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)混合感染严重疫情,猪群发病率和死亡率较高。为进一步确诊和提供科学的防控依据,采集10头繁殖障碍母猪(未曾注射PRRSV疫苗)血样,用IDEXX试剂盒进行猪瘟病毒(CSFV)、PRRSV和PRVgE抗体检测。同时采集2头流产胎儿(对应2头流产母猪)组织分别进行CSFV、PRRSV的RT-PCR检测和PRV gE的PCR检测,采集2头腹泻同时伴随神经症状的仔猪组织进行TGEV、PEDV、猪轮状病毒(RV)的RT-PCR检测和PRV gE的PCR检测。结果显示,母猪CSFV抗体阳性率达90%,对应流产胎儿未检出CSFV,表明无CSFV感染,免疫合格;PRRSV和PRV gE抗体阳性率达100%,对应流产胎儿均测出PRRSV和PRV,表明这两种病毒感染情况严重;2头仔猪PCR和RT-PCR结果提示均有PRV、PEDV和TGEV野毒感染,并根据以上检测结果提出紧急防控措施。     

多重PCR对猪病毒性繁殖障碍疾病的调查分析

为了解猪群中病毒性繁殖障碍疾病的流行状况,用多重PCR诊断方法,对太原市附近14个养猪场和门诊病例共1068份样品进行了猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）、猪瘟病毒（CSFV）、猪细小病毒（PPV）、猪伪狂犬病病毒（PRV）、猪圆环病毒2型（PCV-2）的检测,其平均感染率分别为：PRRSV 32%、CSFV 40%、PPV 20%、PRV 12%、PCV-2 27%。其中混合感染2种病毒的猪群为39%,感染2种病毒的猪为24%。用RT-PCR试剂盒对山西省11个地市66个猪场及121个散养户的1572份血样进行了PRRSV和CSFV的检测,结果PRRSV感染率为33%,CSFV感染率为46%。用间接血凝试验对61个县38个乡136个村179户的1593份血样进行了猪瘟免疫抗体的检测,平均合格率为43.9%,从而为防控此类疫病的发生,制定综合防制措施提供试验数据。     

冀鲁豫交界地区PCV-2和CSFV血清抗体调查

调查了冀鲁豫三省交界地区规模养殖场猪群圆环病毒2型(PCV-2)抗体阳性率与其他地区的差异和流行病学特点、PCV-2抗体阳性率对猪瘟病毒(CSFV)抗体的影响。在该地区选择了7个猪场采集了222份血清,用ELISA试剂盒检测PCV-2型和CSFV的抗体水平并进行统计学分析。检测结果表明,7个养猪场的猪群都感染过PCV-2,发生疑似感染的猪病例中PCV-2的平均抗体阳性率在62.2%~72.0%之间,高于其他地区。而猪瘟免疫合格率仅有32.4%~42.4%。PCV-2抗体水平高的猪,猪瘟抗体水平低。表明该地区PCV-2的感染情况比较严重。     

猪瘟疫苗在猪圆环病毒2型阳性猪场的免疫效果观察

为了研究猪圆环病毒2型(PCV-2)感染对猪瘟疫苗免疫效力的影响,对PCR证实为PCV-2阳性的试验猪进行猪瘟疫苗的免疫,分别在免疫后第1、3、7、14、21、28和63天对试验猪进行猪瘟病毒(CSFV)和PCV-2的抗体检测。检测结果表明PCV-2阳性猪在猪瘟疫苗免疫后均未能产生有效的CSFV抗体,从免疫猪的血液和内脏组织中也未能检测到CSFV核酸。虽然只能从1头PCV-2阳性猪的血清中检测到PCV-2抗体,但是却能从全部实验猪的淋巴结中检测到PCV-2的核酸。试验猪的病理组织学观察和白细胞计数也表明PCV-2阳性猪的淋巴结呈典型的PCV-2感染的病理变化,且白细胞数量显著低于健康猪。表明PCV-2的感染会对猪的免疫系统造成损害从而抑制猪瘟疫苗的免疫效果。     

贵州省规模化养猪场繁殖障碍性疾病的血清学调查

采用间接酶联免疫吸附试验(ELISA)和乳胶凝集试验(LAT),对贵州省4个地区6个规模化猪场240份血清进行猪瘟病毒(CSFV)、猪细小病毒(PPV)、猪伪狂犬病毒(PRV)、猪繁殖障碍与呼吸综合征病毒(PRRSV)及猪圆环病毒2型(PCV2)抗体水平检测。结果:CS-FV、PPV和PRV免疫抗体阳性率分别为64.2%、77.9%和59.2%;PRRSV、PCV2抗体阳性率分别为10.4%和32.5%。上述结果表明,猪细小病毒病、猪伪狂犬病和猪瘟免疫效果比较理想,但6个规模场存在PRRSV和PCV2混合感染,应引起各养殖场高度重视。     

猪瘟病毒、猪圆环病毒2型与猪伤寒沙门氏菌混合感染的诊治

运用针对不同病毒的特异性引物,对广东某地区发病猪群采集的痛料进行PCR和RT-PCR检测,结果发现CSFV和PCV2为阳性.无菌条件下分离的细菌可于普通琼脂、伊红美兰和麦康凯琼脂培养基上生长,革兰氏染色为阴性,经生化试验和药敏试验鉴定为沙门氏菌,并结合临床症状、病理特征,确诊为猪瘟病毒、猪圆环病毒2型与猪伤寒沙门氏菌混合感染.     

我国部分地区4种猪病毒病感染的血清学调查

为了解我国部分地区猪群中猪瘟病毒(CSFV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪蓝耳病病毒(PRRSV)和猪圆环病毒2型(PCV2)的流行与分布情况,研究采用ELISA(酶联免疫吸附试验)方法分别对2013—2014年采自河北、河南、山东、江苏等部分地区规模化养殖场和散养户的882份发病猪血清样品进行CSFV、PRV、PRRSV、PCV2抗体检测。结果显示,两年CSFV平均抗体阳性率为72.8%,PRV平均抗体阳性率为72.6%,PRRSV平均抗体阳性率为78.5%,PCV2平均抗体阳性率为61.5%。CSFV、PRV、PRRSV抗体阳性率2014年较2013年有下降的趋势,PCV2抗体阳性率2014年较2013年有略微上升的趋势,CSFV、PRV、PRRSV、PCV2的2种、3种及4种病原混合感染抗体阳性率2014年较2013年有上升的趋势,表明我国猪群中CSFV、PRV、PRRSV、PCV2的混合感染现象日益突出,应引起对这4种猪病的重视,加强这4种猪病疫苗的免疫接种,有效控制猪病的发生和流行。     

屠宰猪常见病毒隐性感染情况的监测与分析

为评估常见猪病原的隐性感染情况,使用荧光PCR检测技术对采自13个屠宰场的1 224份健康猪淋巴结、1 194份健康猪扁桃体进行高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HPPRRSV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪瘟病毒(CSFV)、猪伪狂犬病毒(PRV)等主要猪病病原进行核酸检测。结果显示,屠宰场内健康猪群中的病原阳性率分别为PRV 7.5%、PRRSV 4.5%、HPPRRSV 1.4%、CSFV 0.2%,表明健康猪群中有部分猪携带有致病性病原。     

云南省某规模化猪场三种主要病毒抗体检测与分析

为了解云南省某规模化猪场猪瘟(CSF)、猪繁殖与呼吸障碍综合征(PRRS)、猪伪狂犬(PR)的免疫水平及感染状态,试验采用酶联免疫吸附测定试剂盒分别对各阶段猪群随机采集130份血清进行三种主要病毒性疾病抗体检测。结果表明,该猪场的猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)、猪伪狂犬病毒(PRV)野毒的抗体阳性率分别为94.57%、86.96%和0%,猪伪狂犬病防控较好,猪瘟和蓝耳病防控存在一定的问题,应及时调整免疫程序,加强猪场管理,重视生物安全,稳定生产。     

广西田东县部分猪场四种疫病病原及三种疫病血清学的检测与分析

为了解广西田东县部分猪场猪瘟?高致病性猪繁殖与呼吸综合征(猪蓝耳病)、猪圆环病毒2型和猪伪狂犬病的流行情况，采用RT-PCR方法及PCR方法检测组织样品，对各猪场送检的162份组织样品进行猪瘟病毒(CSFV) 高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP-PRRSV)、猪圆环病毒2型(PCV-2)和猪伪狂犬病病毒(PRV)核酸检测。采用ELISA方法对送检临床健康猪群400份血清样品进行CSFV、HP-PRRSV、PRV-gE抗体检测。病原检测结果显示：病料CSFV核酸检测为阴性；HP-PRRSV、PCV2、PRV核酸总阳性率分别：6.79%、40.74%、1.23%;对不同猪群各种病原核酸阳性率分析发现，育肥猪HP-PRRSV阳性率最高，为11.53%,保育猪PCV2阳性率最高，为51.9%,种母猪PRV阳性率最高，为6.45%。抗体检测结果显示：CSFV抗体阳性率为87%,HP-PRRSV抗体阳性率77.5%,PRV-gE抗体阳生率为12.25%。本研究表明，CSFV免疫效果好，并有效地控制了该病在本区域的发生与流行。HP-PRRS、PCV2、PR这3种疫病仍在猪群中散发流行，需要加强防控...     

猪瘟、猪蓝耳病双重RT-PCR检测方法的建立与应用

为了方便、快速检测猪瘟和猪蓝耳病混合感染病例,试验根据GenBank登录的猪瘟病毒(CSFV)和蓝耳病病毒(PRRSV)基因序列,分别设计合成1对引物,建立检测猪瘟、猪蓝耳病的双重RT-PCR方法,并对引物浓度、退火温度进行优化。对优化后的RT-PCR方法进行特异性和敏感性试验,同时对临床样品进行检测。结果表明:采用建立的RT-CPR方法对CSFV、PRRSV进行扩增,分别扩增出508 bp和320 bp特异性片段,最佳引物浓度为0.4 pmoL/μL,最佳退火温度为55℃。采用该方法对猪伪狂犬病病毒、猪细小病毒、猪圆环病毒、猪口蹄疫病毒、猪流行性乙型脑炎病毒不能扩增出任何片段,特异性良好。对CSFV和PRRSV最低核酸检出含量分别为32.4 ng和2.4 ng,具有较好的敏感性。对贵阳市某规模化猪场采集的临床疑似病料检出率为100%。说明成功建立了一种快速鉴别诊断猪瘟和猪蓝耳病的双重RT-PCR方法,该方法具有较好的特异性、灵敏性和临床应用性,为猪瘟和猪蓝耳病的快速、准确鉴别诊断和防控提供了有效手段。     

鉴别非洲猪瘟病毒和猪瘟病毒野毒株二重TaqMan MGB实时荧光定量PCR检测方法的建立及初步应用

旨在建立特异、敏感的实时荧光定量PCR(FQ-PCR)方法,用于非洲猪瘟病毒(ASFV)和猪瘟病毒(CSFV)野毒株的快速鉴别检测。针对ASFV的P72基因和CSFV野毒株的5′UTR非编码区序列的保守区域分别设计1对特异性引物和1条探针,经优化反应条件,建立一种基于TaqMan MGB探针技术的FQ-PCR方法,验证方法的敏感性、特异性和稳定性,对50份临床样品进行检测,并与猪瘟国标方法及OIE推荐的非洲猪瘟检测方法进行比较分析。结果显示:建立的鉴别ASFV和CSFV野毒株二重FQ-PCR检测方法在10~0～10~6拷贝·μL~(-1)模板范围内有良好的线性关系;对ASFV和CSFV基因出现阳性扩增信号,但对猪瘟病毒疫苗株、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪伪狂犬病病毒、猪圆环病毒2型、猪细小病毒、猪乙型脑炎病毒、副猪嗜血杆菌等病原对照未出现扩增;批内、批间试验变异系数在1.18%～2.08%,重复性良好;对ASFV和CSFV的最低检测模板浓度均为10拷贝·μL~(-1);利用建立的二重FQ-PCR方法对50份临床样品进行检测,检测结果与猪瘟国标方法及OIE推荐的非洲猪瘟检测方法结果完全一致。本研究成功建立了鉴别ASFV和CSFV野毒株二重TaqMan MGB FQ-PCR方法,为ASFV和CSFV野毒株的鉴别诊断提供了快速、敏感、特异且能满足临床检测需求的检测方法。     

2021 年新疆部分地区规模化猪场猪瘟病毒抗体检测及分析

为了解2021年新疆部分地区规模化猪场的猪瘟病毒(CSFV)抗体水平,本试验采用间接酶联免疫吸附试验(ELISA)对来自新疆6个地区13个规模化猪场的513份血清样品进行猪瘟病毒抗体水平检测。结果显示,CSFV抗体平均阳性率为73.88%(379/513),高于国家规定标准(70%);除1号和3号地区外,其余4个地区的CSFV抗体平均阳性率均达到国家规定标准;61.5%(8/13)规模化猪场的CSFV抗体阳性率高于国家规定水平,有3个养殖场CSFV抗体阳性率较低,且抗体离散度较大。表明新疆部分地区规模化猪场的CSFV整体免疫效果较好,不同地区及不同养殖场间CSFV抗体水平存在明显差异,个别地区和养殖场的CSF发病风险高,需对现有的免疫程序进行调整和完善。本试验可为新疆部分地区的CSFV防控工作提供一定的参考。     

猪瘟病毒和牛病毒性腹泻病毒双重荧光RT-PCR检测方法的建立

为同时检测猪源临床样本中的猪瘟病毒(CSFV)和牛病毒性腹泻病毒(BVDV),基于这两种病毒的5'UTR序列设计特异引物和TaqMan探针,建立了一种检测CSFV和BVDV的双重荧光RT-PCR检测方法,并对该方法的特异性、最低检出限和重复性等进行了评价。结果显示,该方法只对CSFV和BVDV呈现特异性扩增,对猪伪狂犬病病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪传染性胃肠炎病毒、猪流行性腹泻病毒、猪圆环病毒2型不发生交叉反应,对阳性标准对照CSFV-5'UTR-RNA、BVDV-1-5'UTR-RNA和BVDV-2-5'UTR-RNA,最低可分别检出27、36和32拷贝/μL。该方法的组内和组间试验Ct值变异系数介于0.11%～1.20%,具有良好的重现性。对152份猪组织样本用该方法进行CSFV和BVDV核酸检测,结果检出CSFV阳性样本16份,BVDV阳性样本3份,CSFV和BVDV双阳性样本1份,与国标和OIE《陆生动物诊断试验和疫苗》相应的荧光RT-PCR方法阳性符合率为100%。结果表明,本研究建立的双重荧光RT-PCR方法可用于临床样本中的CSFV和BVDV检测,从而为猪瘟防制和净化提供了一种有效的技术手段。     

怀化市屠宰场常见病毒隐性感染情况的监测与分析

为了评估怀化市屠宰场健康猪群病原的隐性感染情况,使用荧光PCR检测技术对市内2个屠宰场共360份健康猪扁桃体进行了口蹄疫病毒(FMDV)、高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP-PRRSV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪圆环病毒2型(PCV2)、猪瘟病毒(CSFV)等主要猪病原进行核酸检测。结果显示,屠宰场内外观健康猪群中的病原阳性率分别为PCV2 82.78%、PRRSV 13.61%、HP-PRRSV 3.89%、PRV 3.89%、FMDV 3.06%、CSFV 0。表明健康猪群中携带PCV2比较普遍,其他病原也有一定的携带率。     

猪瘟疫疫苗在养殖场的应用效果观察

目的:观察猪瘟疫疫苗在养殖场的应用效果。方法:选取我镇辖区内5家养殖场的215头猪作为本组研究的观察对象,所有养殖场均给予猪瘟疫疫苗预防接种,观察疫苗的猪瘟发生率以及在不同饲养阶段猪群中的发生情况。结果:(1)本组215头猪中,共发生猪瘟19例,发生率为8.83%,免疫效果较为理想。(2)将抗体检测结果按照母猪、仔猪、育肥猪三个饲养阶段进行对比分析,结果发现母猪、仔猪与育肥猪的猪瘟发生率分别为5.43%、11.39%、11.36%,其中母猪的免疫抗体水平明显高于仔猪和育肥猪,具有统计学意义(P0.05)。结论:我镇猪瘟疫疫苗预防效果较为理想,其中母猪猪瘟发生率要明显低于仔猪与育肥猪,在工作中要加强对高危猪群的监管与控制。     

猪蓝耳病毒、猪圆环病毒2型与副猪嗜血杆菌混合感染的实验室诊断及血清抗体检测

为了确定山东省莱西市某猪场送检病猪的发病原因,并调查猪群主要疫病抗体水平以便为猪场疫病防控提供科学参考依据,试验采集送检病猪病料,综合运用临床观察、病理剖检、细菌分离鉴定和病毒核酸检测等技术进行确诊;并对分离菌进行药敏试验;使用ELISA检测试剂盒对猪群的猪圆环病毒2型(PCV-2)、猪蓝耳病毒(PRRSV)、猪瘟病毒(CSFV)和猪伪狂犬病病毒(PRV)4种主要病原进行检测,分析抗体水平。结果表明:送检病料经TSA培养基分离培养可见针尖状菌落,革兰氏染色镜检为阴性杆菌,生化试验鉴定为副猪嗜血杆菌;该分离细菌对大观霉素高度敏感,对头孢噻肟极度敏感;猪群中PRRSV和PCV-2为阳性,未检测出其他病毒;同场猪群的猪瘟抗体水平偏低需加强免疫,猪蓝耳病抗体水平不稳定,存在野毒感染风险。说明送检病例为PRRSV、PCV-2和副猪嗜血杆菌的混合感染,同场猪群需注意加强猪瘟免疫和猪蓝耳病抗体监测。     

CSFV、PRV和PRRSV多重PCR检测方法的建立及其应用

由猪瘟病毒(CSFV)、伪狂犬病病毒(PRV)和猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引起的繁殖障碍性疫病在中国的不断暴发,增加了猪的发病率和死亡率。为了建立同时检测这3种病毒的多重PCR方法,本研究根据GenBank中这3种病毒的参考基因序列设计引物,并对反应中的影响因素进行优化,建立了同时检测CSFV、PRV和PRRSV的多重PCR方法。该方法扩增的基因片段大小分别为570(CSFV),232 (PRRSV)和173bp(PRV)。敏感性和特异性试验结果显示,该方法对3种病毒的核酸最低检出量分别为23.88(CSFV),13.10(PRRSV)和14.60pg(PRV),对大肠杆菌(Ec.oli)、沙门菌(Salmonella)、猪乙型脑炎病毒(JEV)及猪圆环病毒2型(PCV2)的检测结果均为阴性。对2015年5月至2016年1月收集的168份临床样本检测结果显示,CSFV阳性率为24.4%,PRRSV阳性率为21.4%,提示河北省该段时间内引起猪繁殖障碍性疫病的主要病原为CSFV和PRRSV。经多重PCR检测为PRRSV、PRV或CSFV阳性的临床样本,再次使用商品化的试剂盒进行检测,符合率为100.0%。这些结果表明,本试验建立的多重PCR方法省时、高效,可用于PRRSV、PRV和CSFV感染的临床诊断。     

1例保育猪呼吸道疾病的诊断报告

正江西泰和某猪场保育猪发生严重的呼吸道疾病,送检6头已死亡的保育猪。通过临床发病特征、病理剖检等初步诊断,推测导致死亡的可能病原为猪呼吸与繁殖障碍综合征病毒(PRRSV)、猪圆环病毒Ⅱ型(PCV-2)等病毒感染,继发细菌感染。取样送至江西农业大学预防兽医学实验室进行RT-PCR/PCR检测结果表明,发病猪PRRSV、PCV-2和猪瘟病毒(CSFV)阳性,同时,从发病猪肺脏和心