禾谷镰刀菌接种小麦幼芽及致病力鉴定的初步研究

 由镰刀菌引起的赤霉病是危害小麦、大麦、燕麦、黑麦等禾谷类作物的一种重要病害,广泛分布于世界温暖潮湿地区。在我国赤霉病发病区,禾谷镰刀菌(Fusarium graminearum Schwabe)是主要致病菌。     

禾谷镰刀菌培养性状与致病力的相关性分析

选择来自我国12省市有代表性的101株禾谷镰刀菌菌株,比较它们在PDA培养基上的表型性状以及在CMS液中的产孢量;并于田间小麦开花期,用单花剪滴法接种3个抗赤霉病性不同的小麦品种,鉴定其致病力,用SAS软件进行统计分析。结果表明,菌落扩展速度不同的菌株问,其致病力差异显著;相关分析证实,菌落扩展速度与致病力之问呈极显著线性正相关(P=0．0003),菌丝生长状况与致病力之间呈极显著非线性相关(P=0．0083),而基质颜色和产孢量与致病力没有相关性。这些结果说明,禾谷镰刀菌菌落的扩展速度及菌丝生长状况与致病力之间具有共同的遗传基础或遗传相关性。     

红枣黑斑病链格孢属真菌的生物学特性

为研究新疆红枣中链格孢毒素的产生规律，对从南疆不同枣园黑斑病‘骏枣’中分离纯化的10株链格孢属真菌（5株链格孢菌和5株细极链格孢菌）的菌落生长速率、产孢量、孢子萌发率、菌苔致病力、毒素产生种类及含量等生物学特性进行研究，结果表明：（1）各菌株在红枣培养基上的生长速率、产孢量等都优于PDA培养基，但是产毒种类及含量却普遍低于PDA培养基；（2）在红枣培养基和PDA培养基上，链格孢菌（Alternaria alternata）均比细极链格孢菌（Alternaria tenuissima）的生长速率更快、产毒种类及含量更多；（3）综合考虑产孢量、孢子萌发率和致病力，JZAa05为优势菌株。     

玉米穗腐病样品中层出镰刀菌的分离与鉴定

为了解豫西南玉米穗腐病的病原菌,于2009年9月在河南省南阳市6个县区采集玉米穗腐病样品,进行病原菌的分离与单孢纯化.依据致病性、形态及分子检测结果进行病原菌鉴定.研究结果表明,分离得到的105株镰刀菌中,层出镰刀菌Fusarium proliferatum为70株,占分离镰刀菌的66.7％,属优势种群.在基于核糖体基因内转录间隔区(rDNA-ITS)与翻译延长因子1α基因(tef)序列构建的系统发育树中,3株代表菌株Fp1、Fp2和Fp3分别与GenBank登记的层出镰刀菌在自举值89％和91％水平相聚同一群.层出镰刀菌的生长温度为13～34℃,最适温度为28℃;在pH5.0和6.0各有1个生长高峰;碳源对该菌营养生长的影响较为稳定,而氮源对其营养生长影响的变幅较大.     

K88 ad ETEC菌毛蛋白亚基基因faeC的克隆、表达及多克隆抗体的制备

为研究毒素源性大肠杆菌(ETEC)菌毛蛋白分子装配机理，从K88 ad ETEC中PCR扩增出K88菌毛蛋白小亚基基因片段facC，然后将其克隆到大肠杆菌表达载体pET-30a( )中，获得重组质粒pET30C，并将该质粒转入大肠杆菌表达菌株BL21(DE3)中；重组菌株经IPTG诱导后，经过SDS-PAGE分析表明该菌株可以表达FaeC蛋白(16.9kDa)，且重组蛋白主要以包涵体形式存在，约占菌体蛋白的30％。用分离纯化的重组FaeC蛋白免疫小鼠，获得FaeC的鼠抗血清，经免疫学分析表明，利用此重组蛋白制备的抗血清与FaeC重组蛋白及K88 ad ETEC的菌毛蛋白都能发生特异性抗原-抗体反应。     

小麦和玉米籽粒赤霉菌产毒类型的PCR检测

为了建立一种准确、快速鉴定赤霉菌毒素的方法,根据赤霉菌毒素生物合成调控路径T ri5-T ri6基因保守序列,设计了一对通用引物,用于检测和鉴别产生脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)和雪腐镰刀菌烯醇(N IV)毒素的赤霉菌特异DNA片断。结果表明,产生毒素DON的赤霉菌具有一个300 bp的特异DNA片断,而产生毒素N IV的则为360 bp。PCR检测与HPLC或GC/M S化学分析结果完全一致。利用这一方法分析检测了小麦、玉米籽粒中赤霉菌产毒类型,发现除健康籽粒外,在所有轻微、中度、严重感染赤霉病的小麦或玉米籽粒中,均同时检测到DON及N IV的两种DNA片断,表明这一对通用引物对两种毒素特异DNA片断的扩增效率相同。这些结果说明,该技术是一种经济、快速、可靠的PCR检测技术,可广泛用于赤霉菌及其毒素检测鉴定中。     

2套小麦鉴别寄主对我国代表性禾谷镰刀菌的抗性反应

 麦类赤霉病是我国长江流域中、下游地区以及东北地区麦类作物的主要病害,近年来在黄河流域也时有发生,并有逐渐向北扩展蔓延之势。     

镰刀菌毒素及其分子生物学研究进展

综述了近年来国内外关于小麦赤霉菌主要致病菌种禾谷镰刀菌毒素的形成与致病力的关系、毒素生物检测及免疫化学检测方法、脱毒技术及毒素代谢途径的分子生物学研究的一些进展。     

量子点荧光免疫法快速测定氧氟沙星

研究建立了基于量子点(quantum dots,QDs)的间接荧光免疫吸附测定技术(competitive fluorescence linked immunosorbent assay,cFLISA),并应用于牛奶中的氧氟沙星(ofloxacin,OFL)抗生素残留检测中.首先将量子点同抗氧氟沙星抗体通过生物素-亲和素系统进行连接,优化连接条件进行并测定连接效率.其次对cFLISA测定条件进行了优化,并确定了合适的检测时间≤60min.所建立方法的最低检测限(IC90值)和IC90值分别为0.25 ng·mL-1和1.16 ng·mL-1.cFLISA针对实际牛奶样品中氧氟沙星抗生素残留回收率测定结果为88.2%～105.3%,Cv值为7.3%～10.9%,同传统酶联免疫吸附测定(ELISA)方法相比十分接近.结果表明,本研究所建立的cFLISA方法可以替代传统的ELISA方法应用于牛奶中氧氟沙星抗生素残留的实际测定中.更重要的是,新方法对于针对不同药物残留的多重测定技术的建立具有一定的参考价值.     

利血平分子印迹聚合物在饲料检测中的应用

以获得的利血平（Reserpine,RES）分子印迹聚合物为填料,制备出分子印迹固相萃取小柱,对饲料中的利血平进行富集、纯化;结合高效液相色谱法,建立了基于分子印迹技术的检测饲料中利血平的新方法,灵敏度达0.05μg/g,回收率达80%以上,可应用于实际检测。