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以转基因香石竹品种Moonlite(月之伊人)为研究对象,通过TAIL-PCR方法,获得外源基因插入位点的左侧旁邻序列。根据旁邻序列设计引物,建立品系特异性定性PCR方法,其扩增片段覆盖了转化载体及香石竹基因组临界序列。本方法特异性好、灵敏度高,可快速、准确、高效地检测转基因香石竹Moonlite品种。 相似文献
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K88 ad ETEC菌毛蛋白亚基基因faeC的克隆、表达及多克隆抗体的制备 总被引:2,自引:0,他引:2
为研究毒素源性大肠杆菌(ETEC)菌毛蛋白分子装配机理,从K88 ad ETEC中PCR扩增出K88菌毛蛋白小亚基基因片段facC,然后将其克隆到大肠杆菌表达载体pET-30a( )中,获得重组质粒pET30C,并将该质粒转入大肠杆菌表达菌株BL21(DE3)中;重组菌株经IPTG诱导后,经过SDS-PAGE分析表明该菌株可以表达FaeC蛋白(16.9kDa),且重组蛋白主要以包涵体形式存在,约占菌体蛋白的30%。用分离纯化的重组FaeC蛋白免疫小鼠,获得FaeC的鼠抗血清,经免疫学分析表明,利用此重组蛋白制备的抗血清与FaeC重组蛋白及K88 ad ETEC的菌毛蛋白都能发生特异性抗原-抗体反应。 相似文献
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利用高效农杆菌遗传转化系统将ACP反义基因片段导入油菜 总被引:6,自引:0,他引:6
通过对已有的油菜农杆菌遗传转化体系的改进,建立了一种利用农杆菌感染油菜子叶柄的高效遗传转化方法,经过农杆菌感染的子叶柄在含有6-BA2.0mg/L,IBA0.15mg/L,AgNO33.5mg/L的MS培养基上由卡那霉素抗性愈伤组织分化出抗性幼苗的频率达到12.28%。利用已经构建的含有油菜Napin启动子加上反义ACP脱饱和酶第一外显子、内含子的基因片段的植物双元表达载体pNACP,将该反义ACP基因片段转入油菜“沪油15”;PCR和GUS染色结果表明抗性植株中有60%的植株含有导入的目的基因。这为油菜籽脂肪酸遗传改良提供了一种新的方法。 相似文献
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基因及构建特异性PCR方法检测转基因香石竹 总被引:1,自引:0,他引:1
摘要:以澳大利亚Florigene公司和日本Suntory公司研发的两种转基因香石竹Moonshade、Moonlite为研究对象,针对内参照基因ANS和外源基因F3’5’H、CHS启动子、D8ter,建立基因特异性定性PCR检测方法。此外,分别在外源MAC启动子和DFR基因上设计PCR引物,开展构建特异性PCR检测,定性PCR方法的检测灵敏度为0.5%。该方法的建立为转基因香石竹的进口检测、国内监管和环境安全评价提供了初步数据。 相似文献
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上海市转基因植物研究概况 总被引:1,自引:1,他引:0
在国家及上海市各类重大研究计划的持续支持和推动下,本市转基因植物研究进展迅速,在转基因抗除草剂、抗虫、抗病、抗逆境、品质改良和生物反应器研究等方面取得了一系列进展。本文通过简要概括本市科研机构在转基因植物科学领域取得的研究进展,旨在掌握当前该领域的基本现状,分析其发展前景,为转基因植物安全性评价奠定基础。 相似文献
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转基因香石竹中间试验的农艺性状评价 总被引:1,自引:0,他引:1
为了研究转基因香石竹品系月之霓裳Moonshade、月之伊人Moonlite及其亲本品种FE123在农艺性状方面是否存在差异,提供转基因香石竹的环境安全性评价数据,我们对植物生长和开花时期的农艺性状数据进行统计学分析。结果表明:这两个转基因香石竹品系与其受体品种在越夏能力、侧枝数目、植株高度、叶片宽度、叶片厚度、花的直径、花冠高度、花柱数目、花萼数目、雄蕊数目等性状上没有显著差异,而植株茎粗、叶片长度和花瓣数目差异极显著。此外,月之伊人Moonlite的花柱长度小于亲本品种,差异极显著。 相似文献