K88 ad ETEC菌毛蛋白亚基基因faeC的克隆、表达及多克隆抗体的制备

为研究毒素源性大肠杆菌(ETEC)菌毛蛋白分子装配机理，从K88 ad ETEC中PCR扩增出K88菌毛蛋白小亚基基因片段facC，然后将其克隆到大肠杆菌表达载体pET-30a( )中，获得重组质粒pET30C，并将该质粒转入大肠杆菌表达菌株BL21(DE3)中；重组菌株经IPTG诱导后，经过SDS-PAGE分析表明该菌株可以表达FaeC蛋白(16.9kDa)，且重组蛋白主要以包涵体形式存在，约占菌体蛋白的30％。用分离纯化的重组FaeC蛋白免疫小鼠，获得FaeC的鼠抗血清，经免疫学分析表明，利用此重组蛋白制备的抗血清与FaeC重组蛋白及K88 ad ETEC的菌毛蛋白都能发生特异性抗原-抗体反应。